目的:探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶亚单位4(Nox4)在草酸钙结石患者肾乳头中的表达及其作用机制。方法:通过GEO数据库检索Randall钙斑芯片，按照GSE73680的样本描述，将样本分为无结石对照组(6例)和草酸钙结石组(24例)。采用GEO2R分析正常人肾乳头和草酸钙肾结石患者肾乳头组织中Nox4及成骨相关蛋白基因的表达差异变化。采用高钙处理大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)，免疫荧光技术(IF)检测Nox4的表达，蛋白质印迹法(Western blot)检测Nox4和骨形态发生蛋白(BMP-2)的表达，化学发光法测定氧化应激标志物丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。组间比较采用 t检验。 结果:GEO2R分析结果显示Nox4在草酸钙结石组表达升高，差异表达倍数为0.726倍( t＝2.040， P<0.05)，基质Gla蛋白(MGP)在草酸钙结石组表达下降，差异表达倍数为-1.228倍( t＝-1.230， P>0.05)，骨钙素(OCN)在草酸钙结石组表达升高，差异表达倍数为0.439倍( t＝1.241， P>0.05)，骨保护素(OPG)在草酸钙结石组表达升高，差异表达倍数为0.639倍( t＝0.888， P>0.05)，骨桥蛋白(OPN)在草酸钙结石组表达升高，差异表达倍数为1.664倍( t＝1.171， P>0.05)。免疫荧光结果显示高钙处理的NRK-52E细胞中Nox4的平均荧光吸光度明显高于对照组(0.651、1.446、1.480， t＝8.023、6.477， P<0.05)。Western blot显示相对于未处理的正常对照组，高钙处理的NRK-52E细胞中Nox4的表达明显增加(0.426、0.594、0.734， t＝28.954、53.082， P<0.01)，BMP-2表达也呈增高趋势(0.242、0.472、0.676， t＝12.765、14.257， P<0.01)。此外，高钙处理NRK-52E细胞后，MDA含量增加(0.188、0.390、0.650， t＝2.679、6.686， P<0.05)，SOD活性下降(40.630、38.060、36.230， t＝4.079、10.390， P<0.05)。 结论:Nox4在肾结石患者肾乳头中表达明显增加，Nox4介导的氧化应激可能在肾结石形成过程中发挥重要作用。

目的:探索烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶亚单位4（NOX4）与鼻咽癌放疗敏感性的关系及相关分子机制。方法:Western blot法检测鼻咽癌细胞CNE1、CNE2和HONE1及正常鼻咽上皮NP69细胞中NOX4的表达。构建NOX4基因干扰和过表达慢病毒载体转染鼻咽癌细胞，联合放射线、PI3K/AKT通路抑制剂LY294002处理，Western blot法检测相关蛋白的表达，CCK-8法检测细胞增殖情况，流式细胞术检测细胞凋亡情况。用GraphPad Prism 5进行作图及统计分析， P<0.05为差异有统计学意义。 结果:鼻咽癌细胞中NOX4的蛋白表达水平高于正常鼻咽上皮细胞。与空载慢病毒转染组（siNC组）相比，NOX4干扰慢病毒转染组（siNOX4组）鼻咽癌细胞增殖能力较弱[72 h吸光度（ A）值：1.16比0.75]、凋亡率较高（2.9%比10.0%）。与空载慢病毒转染组（Vector组）比较，NOX4过表达组（NOX4组）鼻咽癌细胞增殖能力较强[72 h A值：1.01比1.32]、凋亡率较低（1.7%比1.1%）。联合PI3K/AKT通路抑制剂LY294002处理，与NOX4组比较，NOX4+LY294002组鼻咽癌细胞增殖能力减弱[72h A值：1.32比0.77）、凋亡率增加（1.1%比3.1%）。当联合4 Gy剂量放射线照射处理，与siNC/Vector+放射组比较，siNOX4+放射组鼻咽癌细胞增殖能力较弱[72 h A值：0.72比0.33]、凋亡率较高（7.8%比17.3%）；NOX4+放射组鼻咽癌细胞增殖能力较强[72 h A值：0.65比0.78]、凋亡率较低（8.1%比3.8%）。与NOX4+放射组相比，NOX4+放射+LY294002组鼻咽癌细胞增殖能力较弱[72 h A值：0.79比0.56]，凋亡率较高（3.8%比8.1%）。 结论:NOX4通过激活PI3K/AKT通路抑制鼻咽癌细胞对放疗的敏感性。

目的 通过同位素标记相对与绝对定量蛋白质组学技术筛查丁烯醛导致人动脉内皮细胞损伤进程中的氧化损伤相关蛋白标记物.方法 根据细胞活力损伤曲线确定导致90％细胞损伤所需的丁烯醛药物浓度(LD90).利用蛋白质组学技术检测丁烯醛处理和未处理过的人动脉内皮细胞的蛋白质表达情况;采用生物信息学手段分析蛋白质数据;使用平行反应监测技术进行蛋白标记物的验证;通过检测线粒体膜电位与分光光度法测谷胱甘肽活性验证目标蛋白改变对氧化损伤功能的影响.结果 以倍数变化＞1.5的标准(上调＞1.5倍或者下调至＜67％)共鉴定出153个差异表达蛋白,其中氧化损伤相关差异表达蛋白质共12种:传感蛋白(A0A2P9AJA0)、激活信号辅整合素1复合体亚基2(B1AH59)、烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶 1(B1AN62)、cDNA FLJ58404(B4DRL9)、cDNA FLJ55250(B4DV58)、cDNA FLJ55007(B4DY35)、氧化酶(细胞色素 1)装配蛋白样 1(E7EVY0,OXA1L)、电子转移黄素蛋白α亚单位(H0YL12)、细胞色素C氧化酶亚基6A(O95101)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶调节亚基(P48507)、细胞色素C氧化酶装配因子4(Q9NYJ1)、39S核糖体蛋白L3(P09001).基因本体(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析显示差异蛋白明显富集的生物过程与碳水化合物、脂肪酸等有机物的代谢有关,而代谢过程则与ATP的产生、代谢氧化产物的产生和集聚、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)的相互作用等密切相关.丁烯醛作用于人动脉内皮细胞后线粒体膜电位出现明显降低,谷胱甘肽活性出现了明显下降.蛋白网络互作结果显示,OXA1L、电子转移黄素蛋白亚单位α(ETFA)、线粒体核糖体蛋白L3(MRPL3)及谷氨酸-半胱氨酸连接酶修饰亚单位(GCLM)为4个关键的候选蛋白质.结论 丁烯醛改变了人动脉内皮细胞的氧化损伤相关蛋白表达模式,表现为OXA1L、ETFA、GCLM蛋白表达升高,MRPL3表达下降.

目的 观察黄杨宁对心房颤动犬体内氧化应激水平的影响.方法 15只比格犬随机分为5组:空白对照组、模型组、假手术组、黄杨宁组(0.24 mg/kg)、普罗布考组(7.58 mg/kg).造模经股静脉穿刺置入双极电极于犬右心耳,尾端连接高频起搏器,给予高频刺激构建犬房颤模型.模型成功标准:起搏1周后,心电图证实有房颤发生或程控过程中诱发房颤发作,则认为模型成功.术后1 d开始灌胃,术后1周开始心房起搏,4周后取材.马松染色观察心肌纤维变化;ELISA检测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)血清含量;化学发光法检测活性氧(ROS)的含量、比色法测定总抗氧化能力(TAC);RT-PCR、Western blot测定NADPH氧化酶(Nox)亚单位基因p22、p47表达水平.结果 与空白组对比,模型组的血清AngⅡ、NADPH明显上升(P＜0.05)、ROS/TAC水平明显升高(P＜0.05);p22、p47基因表达明显升高;p22、p47蛋白表达升高.黄杨宁及普罗布考干预后,血清NADPH水平无明显升高;ROS/TAC水平均低于模型组,有显著性差异(P＜0.05);Rac-1、p22、p47基因表达低于模型组,统计学有显著性意义(P＜0.05);P22、P47蛋白表达均低于模型组,有显著的统计学意义(P＜0.05).结论 黄杨宁可减轻房颤犬的氧化应激水平,其作用机制可能与AngⅡ-NOx-ROS信号通路有关.