目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)快速测定黄杨宁制剂中环维黄杨星D的含量.方法:采用UPLC-MS/MS法.色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C18柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),流动相为乙腈-含0.1%甲酸的0.01 mol·L-1甲酸氨溶液,梯度洗脱,流速为0.35 ml·min-1,柱温为30℃,进样量为5 μl.离子源为电喷雾(ESI)离子源,正离子模式,工作模式为多反应监测模式(MRM).结果:环维黄杨星D的线性范围为15.58~1558.00 ng·ml-1(r=0.9995);平均加样回收率为97.7%(RSD=3.8%,n=6).结论:该方法快速、简便、准确、重复性好,适用于黄杨宁制剂的质量控制.

首次建立高效液相色谱-电喷雾检测(HPLC-CAD)法对黄杨宁片原料中环维黄杨星D及有关物质进行定量分析,并用高效液相色谱串联四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪联用技术(HPLC-Q-Exactive)对CAD检测中出现的有关物质进行了定性研究.采用XBridge Amidc色谱柱(4.6 mmx250 mm,5μm)分离;乙腈-100 mmol·L-1甲酸铵溶液(85∶15)(混合溶液用甲酸调pH 2.8)为流动相等度洗脱,流速1.1 mL·min-1,柱温30 ℃;CAD雾化温度35℃,气压62.2 psi;新建立的方法能检测到除环维黄杨星D外的5个有关物质.方法 学结果显示,环维黄杨星D检测限为12.588 ng,定量限为28.323 ng;平均回收率为95.74％,RSD为1.79％(n=6).3个厂家12批原料样品中环维黄杨星D含量为79.94％～88.49％,平均值82.20％.CAD对非挥发性物质具有响应均一性,以环维黄杨星D作为对照品外标法计算5个有关物质含量,结果在15.99％～22.15％,平均值20.10％.该方法对于无发色团的黄杨生物碱类物质具有检测信号齐全和微量组分检测灵敏度高的优势,成分间分离度良好,能与MS兼容,可应用于黄杨宁片原料中成分的定性定量分析.

目的:建立黄杨宁片的溶出度方法,并对不同厂家样品进行溶出曲线评价.方法:采用反相HPLC法,使用Agela Durashell RP C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,以0.01 mol·L-1庚烷磺酸钠与0.01mol· L-1磷酸二氢钾等量混合水溶液(含0.2％三乙胺,用磷酸调节pH至3.5)-乙腈(77∶23)为流动相,流速1.0 mL· min-1,检测波长206 nm;溶出度试验采用小杯法,以150 mL的0.1 mol·L-1盐酸溶液为溶出介质,转速75 r·min-1.结果:环维黄杨星D进样量在0.0255～4.0848μg范围内线性关系良好(r=1.000);平均回收率为97.6％(n=6);不同厂家黄杨宁片的溶出行为有较大差异.结论:建立的HPLC溶出度测定方法简单灵敏可靠,能较好地体现不同厂家样品间的溶出差异.

环维黄杨星D (cyclovirobuxine D,CVB-D)为小叶黄杨Buxus microphylla及其同属植物的主要活性成分,具有保护心脑血管等多种药理作用.以其为主要成分的临床常用药黄杨宁片对于冠心病和心绞痛具有明确治疗作用.但是,在临床应用过程中发现,黄杨宁片作为一种口服片剂,存在着水溶性差、生物利用度低,在胃肠道内具有多个吸收位点、释药不稳定,难以透过血脑屏障,并具有心脏蓄积及肝肾毒性等缺点.因此,有必要通过结构修饰或剂型改变来解决CBV-D存在的上述问题.对CVB-D的结构修饰及黄杨宁片剂型改进的研究进展进行综述,以期为其进一步的研究开发提供理论依据.

环维黄杨星D(CVB-D)属于一种孕甾烷类生物碱,在临床上治疗心血管方面的疾病具有良好的疗效,近期也有研究表明其具有抗肿瘤活性.CVB-D水溶性差、生物利用度较低等问题严重限制了其应用范围.因此对CVB-D进行药物制剂学改造,如新型纳米递药系统,改善CVB-D溶解度,提高治疗效果,降低其毒副作用具有重要的意义.近年围绕环维黄杨宁D的纳米递药系统进行了大量研究,文章主要对CVB-D新型纳米递药系统的研究进展进行综述.

目的 观察黄杨宁对心房颤动犬体内氧化应激水平的影响.方法 15只比格犬随机分为5组:空白对照组、模型组、假手术组、黄杨宁组(0.24 mg/kg)、普罗布考组(7.58 mg/kg).造模经股静脉穿刺置入双极电极于犬右心耳,尾端连接高频起搏器,给予高频刺激构建犬房颤模型.模型成功标准:起搏1周后,心电图证实有房颤发生或程控过程中诱发房颤发作,则认为模型成功.术后1 d开始灌胃,术后1周开始心房起搏,4周后取材.马松染色观察心肌纤维变化;ELISA检测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)血清含量;化学发光法检测活性氧(ROS)的含量、比色法测定总抗氧化能力(TAC);RT-PCR、Western blot测定NADPH氧化酶(Nox)亚单位基因p22、p47表达水平.结果 与空白组对比,模型组的血清AngⅡ、NADPH明显上升(P＜0.05)、ROS/TAC水平明显升高(P＜0.05);p22、p47基因表达明显升高;p22、p47蛋白表达升高.黄杨宁及普罗布考干预后,血清NADPH水平无明显升高;ROS/TAC水平均低于模型组,有显著性差异(P＜0.05);Rac-1、p22、p47基因表达低于模型组,统计学有显著性意义(P＜0.05);P22、P47蛋白表达均低于模型组,有显著的统计学意义(P＜0.05).结论 黄杨宁可减轻房颤犬的氧化应激水平,其作用机制可能与AngⅡ-NOx-ROS信号通路有关.