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PCR-膜芯片技术在牦牛及犏牛肉制品的真假鉴定中的应用
编辑人员丨2023/8/6
旨在利用PCR-膜芯片技术快速高效的鉴定牦牛及犏牛肉制品的真假.采集样品(猪、山羊、黄牛、水牛、牦牛、鸡、鸭、兔、狗、真犏牛、假犏牛肉样各8个,19个肉干制品样品),提取并纯化DNA,利用11对特异性引物进行多重PCR,将扩增产物与含有12个探针的膜芯片反向点杂交,测试膜芯片的准确度及灵敏度,并鉴定市场上销售的牦牛肉制品真假.结果表明,膜芯片准确度高,特异性强,无交叉反应,灵敏度能达到0.1 ng,检测灵敏度高.通过鉴定市场上销售的假牦牛肉干制品几乎都以黄牛和水牛肉为原料制作.应用PCR-膜芯片技术可快速准确的鉴定出牦牛肉制品的真假,有利于打击假冒产品,维护市场平衡.
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编辑人员丨2023/8/6
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基于RNA-Seq技术的犏牛囊胚冷冻前后单核苷酸多态性和可变剪切分析
编辑人员丨2023/8/5
目的 对犏牛囊胚玻璃化冷冻前后的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)和可变剪切(alternative splicing,AS)进行比较分析.方法 采用普通娟珊牛精子和牦牛卵母细胞,以体外授精(in vitro fertilization,IVF)的方式获得犏牛囊胚.提取犏牛新鲜囊胚和经玻璃化冷冻复苏后的犏牛冻融囊胚总RNA,构建文库并进行高通量测序.采用SAMtools-0.1.19和ASprofile软件分别进行SNP和AS分析.结果 犏牛新鲜囊胚和冻融囊胚样本通过去低质量序列、去接头污染等过程后,分别得到51 099 116和54 192 358条待分析数据(Clean Reads).新鲜囊胚和冻融囊胚分别检测到116 681和224 750个SNP位点.在新鲜囊胚转换型SNP中,C/T类型数量略多于A/G类型;但在冻融囊胚中,A/G类型数量略多于C/T类型;两样本颠换型SNP中,A/T所占比例最少.新鲜囊胚和冻融囊胚转换和颠换型SNP的比例分别为2.57和2.45.新鲜囊胚和冻融囊胚分别检测出49 388和65 241个AS事件,主要有5种AS类型,其中转录起始区域和转录结束区域AS所占比例最大.结论 利用RNA-Seq技术对玻璃化冷冻前后犏牛囊胚SNP和AS进行比较分析,可为后续人类胚胎冷冻前后相关基因功能分析和挖掘提供有效数据和理论基础.
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编辑人员丨2023/8/5
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犏牛雄性不育的减数分裂基因表达与表观遗传调控研究进展
编辑人员丨2023/8/5
种间杂交雄性不育是自然界普遍现象,是物种形成生殖隔离的重要方式.犏牛作为牦牛(Bos grunniens)和普通牛(Bos taurus)的种间杂交后代,表现为公犏牛不育,而母犏牛可育,是研究种间杂交雄性不育的良好动物模型.近年来利用分子生物学技术发现犏牛睾丸组织中大量基因表达紊乱.研究表明,DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA等表观遗传因素参与精子发生过程.本文从减数分裂相关的基因表达、DNA甲基化、microRNA(miRNA)、PIWI蛋白相互作用的RNA(PIWI-interactingRNA,piRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)和组蛋白甲基化修饰等方面总结了犏牛雄性不育的相关研究进展,以期从遗传和表观遗传调控角度更加深入理解犏牛雄性不育的分子机理.
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编辑人员丨2023/8/5
