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微小RNA-938在肝细胞癌中的表达及对肝癌细胞增殖的影响
编辑人员丨6天前
目的:探讨微小RNA-938(miR-938)在肝癌组织中的表达情况及其对肝癌细胞增殖的影响和调控机制。方法:收集2015年1月至2019年6月在南通大学第二附属医院就诊并手术切除的40例肝细胞癌患者肝癌组织和癌旁组织,其中男性25例,女性15例,平均年龄61.4岁。miR-938过表达组HepG2肝癌细胞转染miR-938模拟物,阴性对照组转染阴性对照序列。采用试剂盒检测细胞增殖情况,荧光定量聚合酶链反应检测miR-938及琥珀酸脱氢酶复合体亚基D(SDHD)的表达,Western印迹检测SDHD蛋白表达。双荧光素酶报告实验验证miR-938的靶基因。结果:肝癌组织中miR-938相对表达量为(0.060±0.002),高于癌旁组织(0.030±0.002),差异有统计学意义( P<0.05)。肝癌组织中SDHD mRNA相对表达量为(0.028±0.002),低于癌旁组织(0.062±0.002),SDHD蛋白相对表达为(0.963±0.008),低于癌旁组织(1.083±0.037),差异均有统计学意义(均 P<0.05)。miR-938过表达组细胞增殖活力明显高于阴性对照组,差异有统计学意义( P<0.05)。双荧光素酶报告结果显示只有miR-938模拟物和pGL3-SDHD野生型质粒组荧光素酶活性下降。阴性对照组SDHD mRNA和蛋白相对表达量均高于过表达组,差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:miR-938在肝细胞癌患者肝癌组织中高表达,miR-938可能通过抑制SDHD的表达,促进肝癌细胞增殖。
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编辑人员丨6天前
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低氧预处理对氧糖剥夺人脑微血管内皮细胞线粒体呼吸功能的保护作用
编辑人员丨2023/8/6
目的 通过观察低氧预处理对氧糖剥夺人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cell, HBMVEC)低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α)和线粒体琥珀酸脱氢酶复合体亚基2(succinate dehydrogenase complex iron sulfur subunit B, SDHB)表达水平以及线粒体ATP合成的影响,评价低氧预处理对氧糖剥夺HBMVEC的保护作用. 方法 离体培养HBMVEC,采用随机数字表法将HBMVEC分为5组(每组6孔):正常对照组(A组)、氧糖剥夺组(B组)、氧糖剥夺+低氧预处理组(C组)、氧糖剥夺+低氧预处理+二甲基草酰甘氨酸(dimethyloxalylglycine, DMOG)组(D组)和氧糖剥夺+低氧预处理+2-ME组(E组).给予低氧预处理及HIF-1α抑制剂和稳定剂后,对HBMVEC进行氧糖剥夺,使用Annexin V检测细胞凋亡和坏死;用ATP检测试剂盒测定细胞内ATP含量;采用Western blot法测定HIF-1α、SDHB蛋白表达. 结果与A组比较,B组、C组、D组和E组HIF-1α表达水平明显升高,ATP含量明显减少,细胞凋亡率明显升高(P<0.05),B组、C组和E组SDHB表达水平明显降低(P<0.05);与B组比较,C组和D组HIF-1α和SDHB表达水平明显升高,ATP含量明显增加,细胞凋亡率明显降低(P<0.05). 结论 低氧预处理可通过调节HIF-1α表达改善氧糖剥夺所致的HBMVEC线粒体呼吸链复合体Ⅱ的损伤,发挥对氧糖剥夺HBMVEC模型的保护作用.
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编辑人员丨2023/8/6
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基于能量代谢与燥性相关性考察茅苍术、北苍术药性差异
编辑人员丨2023/8/5
目的:探讨苍术燥性与能量代谢的相关性,分析茅苍术、北苍术的药性差异.方法:将110只健康SD大鼠随机分为11组,分别为正常组、茅苍术挥发油1~5组(S1~S5组,剂量分别为447、473、442、489、496 mg·kg-1)和北苍术挥发油1~5组(N1~N5组,剂量分别为197、118、281、222、185 mg·kg-1),给药体积均为10 mL·kg-1,灌胃给药21 d.通过比较大鼠体质量、饮水量、尿量、全血黏度及颌下腺病理组织切片评估茅苍术、北苍术对大鼠燥性效应的影响,采用免疫组织化学法测定大鼠肾脏中水通道蛋白2(AQP2)的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝脏中细胞色素C氧化酶亚基7A2(COX7A2)、琥珀酸脱氢酶复合体D亚基(SDHD)mRNA的表达量,比色法测定大鼠血浆中琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)和钠离子-钾离子-三磷酸腺苷酶(Na+-K+-ATPase)的含量.应用变异系数法对茅苍术、北苍术质量进行评价,并运用Pearson相关系数分析苍术燥性与能量代谢之间的相关性.结果:与正常组比较,茅苍术挥发油组与北苍术挥发油组大鼠饮水量、尿量增加,颌下腺腺泡萎缩;茅苍术挥发油组大鼠全血黏度显著增加(P<0.01),COX7A2、SDHD mRNA表达水平和SDH、LDH、Na+-K+-ATPase活性均显著上升(P<0.01),肾脏AQP2表达量显著降低(P<0.01);北苍术挥发油组COX7A2 mRNA表达水平、SDH活性、全血黏度明显升高(P<0.05,P<0.01),肾脏AQP2表达量、SDHD mRNA表达水平、LDH和Na+-K+-ATPase活性的差异则均无统计学意义.经各指标综合评分分析,发现茅苍术挥发油对大鼠产生的燥性影响和能量代谢强于北苍术挥发油,燥性指标和能量代谢指标呈正相关.结论:两类指标均表明茅苍术药性作用强于北苍术,且能量代谢与苍术燥性密切相关.提示从能量代谢角度评价苍术燥性效应具有一定合理性,可以进一步丰富苍术药性评价指标.
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编辑人员丨2023/8/5
