目的:研究抑制高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对大鼠脊髓损伤（SCI）后星形胶质细胞（AS）基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的作用及分子机制。方法:改良Allen打击法制作Sprague-Dawley（SD）大鼠SCI模型，使用丙酮酸乙酯（EP）或甘草甜素（GL）抑制HMGB1作用，将大鼠分为假手术组、SCI组、SCI+EP（50 mg/kg）组、SCI+GL（100 mg/kg）组，观察大鼠脊髓AS的胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、MMP-9的蛋白表达。体外培养SD大鼠脊髓AS，建立氧糖剥夺/复氧（OGD/R）模型，观察OGD 6 h/R 6、12、24、48 h后脊髓AS的MMP-9蛋白表达，以表达最高的时间点用于后续实验为OGD/R组；通过HMGB1 shRNA或EP抑制HMGB1，观察HMGB1对OGD/R处理AS的MMP-9蛋白表达的作用；并使用Toll样受体4（TLR4）、 β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)及核转录因子- κB（NF- κB）的抑制剂，观察HMGB1/TLR4/TRIF/NF- κB通路在OGD/R处理AS的MMP-9蛋白表达中的作用机制。 结果:Western blot结果表明，SCI后1 d大鼠脊髓MMP-9蛋白表达增高，SCI+EP组和SCI+GL组大鼠脊髓MMP-9蛋白表达较SCI组显著减少，差异均有统计学意义（ P<0.001）。免疫荧光结果表明，GFAP与MMP-9蛋白在SCI后脊髓中共定位表达，SCI+EP组和SCI+GL组大鼠脊髓的GFAP、MMP-9蛋白表达较SCI组显著减少，差异均有统计学意义（ P<0.05）。由于在体外培养的脊髓AS中，OGD 6 h/R 12 h的MMP-9蛋白表达较正常组和OGD 6 h/R 6、24、48 h显著增加，以OGD 6 h/R 12 h为OGD/R组。OGD/R+HMGB1 shRNA组和OGD/R+EP组中AS中的MMP-9蛋白表达较OGD/R组显著减少，差异均有统计学意义（ P<0.001）。抑制TLR4、抑制TRIF或抑制NF- κB均可显著减少OGD/R的AS的MMP-9蛋白表达，差异均有统计学意义（ P<0.001）。 结论:抑制HMGB1作用减少大鼠SCI后脊髓AS的MMP-9蛋白表达，并减少OGD/R处理后AS的MMP-9蛋白表达。HMGB1通过TLR4/TRIF/NF- κB信号通路调节OGD/R处理的AS中的MMP-9蛋白表达。

目的:探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对大鼠脊髓损伤(SCI)后微血管内皮细胞(EC)葡萄糖转运体1(GLUT1)表达的作用及机制。方法:改良Allen’s法制作Sprague-Dawley大鼠SCI模型，观察SCI 1 d后抑制HMGB1作用脊髓GLUT1表达。培养大鼠脑脊髓EC，建立氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型，观察减少HMGB1对OGD 6 h/R 12 h处理EC的GLUT1表达的作用。使用Toll样受体4(TLR4)、TRIF及核转录因子-κB(NF-κB)的激动剂或抑制剂，激动或抑制通路蛋白作用，观察TLR4/TRIF/NF-κB通路在体内外HMGB1调节GLUT1表达中的作用。统计学方法采用单因素方差分析，两两比较采用Tukey’s检验。结果:SCI 1 d后大鼠脊髓GLUT1表达增高(SCI 1 d组高于sham组，1.655±0.083比1.000±0， q＝24.580， P<0.01)。丙酮酸乙酯(实验组低于SCI组，1.356±0.096比2.107±0.115， q＝14.730， P<0.01)或甘草甜素(实验组低于SCI组，1.311±0.093比2.107±0.115， q＝15.620， P<0.01)抑制HMGB1作用减少SCI 1 d大鼠脊髓GLUT1表达。SC 1 d大鼠激动TLR4增加GLUT1表达(实验组高于SCI组，1.880±0.120比1.655±0.076， q＝5.032， P<0.05)，抑制TRIF(实验组低于SCI组1.427±0.118比1.655±0.076， q＝5.109， P<0.05)或抑制NF-κB(实验组低于SCI组1.301±0.076比1.655±0.076， q＝7.948， P<0.01)都可减少GLUT1表达。体外培养的脑脊髓EC，加入含HMGB1的星形胶质细胞条件培养基(ACM)并进行OGD 6 h/R 12 h处理后增加GLUT1表达(OGD 6 h/R 12 h组高于Normal组，2.122±0.075比1.000±0， q＝38.720， P<0.01)，减少ACM内HMGB1含量降低GLUT1表达(实验组低于OGD 6 h/R 12 h组，1.316±0.131比1.950±0.166， q＝8.737， P<0.01)。抑制TLR4(CLI-095：实验组低于OGD 6 h/R 12 h组，1.753±0.103比2.230±0.103， q＝13.515， P<0.01；C34：实验组低于OGD 6 h/R 12 h组，1.306±0.038比2.230±0.103， q＝16.440， P<0.05)，抑制TRIF(实验组低于OGD 6 h/R 12 h组，1.383±0.027比2.230±0.103， q＝23.750， P<0.05)或抑制NF-κB(实验组低于OGD 6 h/R 12 h组，1.149±0.064比2.230±0.103， q＝17.510， P<0.05)都可减少加入ACM并进行OGD 6 h/R 12 h处理的EC的GLUT1表达。 结论:抑制HMGB1作用减少SCI后EC的GLUT1表达，HMGB1通过TLR4/TRIF/NF-κB信号通路发挥上述调节作用。

甘草甜素(glycyrrhizin ，GLY)是药用植物甘草(glycyrrhiza uralensis)的主要有效成分，研究发现它具有抗菌、抗病毒，抗氧化和调节机体免疫反应的功能。随着分子生物学技术的进步和研究的进展，GLY在感染性疾病中的应用价值得到了进一步的探索。现就GLY在感染性疾病中的作用及相关机制进行综述，为进一步的基础研究和临床应用提供参考。

目的:探究甘草甜素(GL)调节多巴胺D2受体(Drd2)/α-B晶状体蛋白(Cryab)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的治疗作用.方法:从60只产后第7d的新生大鼠中选取12只为假手术组,其余新生大鼠均采用Rice-Vannucci法建立HIBD新生大鼠模型.将造模成功的36只新生大鼠采用随机数字表法分为HIBD组、GL组、氟哌啶醇组(Drd2抑制剂),每组12只.对各组新生大鼠进行神经功能缺损评分及脑含水量测定;苏木素-伊红染色法(HE)及尼氏(Nissl)染色观察海马组织病理改变;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色检测神经细胞凋亡;酶联免疫吸附法(ELISA)法检测血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;免疫印记法(Western blot)检测海马组织中Drd2/Cryab/NF-κB通路蛋白表达.结果:与假手术组比较,HIBD组海马CA1结构模糊不清,神经元排列无序,尼氏小体数量减少,神经功能缺损评分、脑含水量、神经元凋亡率、TNF-α、IL-6、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达升高,Drd2、Cryab蛋白表达降低(P＜0.05);与HIBD组比较,GL组神经元排列相对整齐,尼氏小体数量增多,神经功能缺损评分及脑含水量、神经元凋亡率、TNF-α、IL-6、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达降低,Drd2、Cryab蛋白表达升高(P＜0.05);与GL组比较,氟哌啶醇组上述指标均显著逆转(P＜0.05).结论:GL可抑制HIBD新生大鼠炎症反应和神经细胞凋亡,减轻HIBD新生大鼠神经损伤,其作用机制可能与激活Drd2/Cryab/NF-κB信号通路有关.

目的 研究甘草甜素(GA)通过调节磷酸肌苷3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成酶激酶3β(GSK3β)信号通路对脑卒中偏瘫痉挛状态大鼠神经行为学的影响.方法 用大脑中动脉闭塞(MCAO)建立脑卒中后痉挛(PSS)大鼠模型.将大鼠分为对照组、假手术组、模型组、低剂量甘草甜素组、高剂量甘草甜素组、巴氯芬组.模型组、假手术组和对照组大鼠每天灌胃等量的0.9％NaCl,高剂量甘草甜素组每天灌胃给予10.8 g·kg-1甘草甜素,低剂量甘草甜素组每天灌胃给予5.4 g·kg-1甘草甜素,巴氯芬组每天灌胃5.4 mg·kg-1巴氯芬,连续4周.用改良Ashworth量表评定肌肉张力,用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法分析脑组织中脑梗死体积,用尼氏染色法和透射电镜观察GA对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经元损伤的保护作用,用免疫组化染色法检测脑梗死和脑干周围脑组织中磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt(p-Akt)和磷酸化GSK3β(p-GSK3β)的表达水平.结果 假手术组、模型组、低剂量甘草甜素组、高剂量甘草甜素组和巴氯芬组大鼠脑梗死体积分别为0、(34.23±1.21)％、(24.12±1.03)％、(18.26±1.08)％和(26.38±1.35)％.对照组、假手术组、模型组、低剂量甘草甜素组、高剂量甘草甜素组的尼氏小体含量分别为(126.23±8.13)％、(131.14±9.62)％、(52.21±6.11)％、(84.29±6.17)％和(112.24±8.21)％.在4周时,假手术组、模型组、低剂量甘草甜素组、高剂量甘草甜素组和巴氯芬组的p-PI3K在脑梗死周围的脑组织中的表达分别为5.45±0.44、4.89±0.34、5.54±0.42、20.59±1.35、25.34±1.46 和6.47±0.45,p-PI3K在脑干周围的脑组织中的表达分别为14.47±1.48、10.82±1.24、15.39±1.45、13.51±1.32、25.55±1.49 和 8.84±0.74,p-Akt 在脑梗死周围的脑组织中的表达分别为 6.47±0.41、6.18±0.32、5.58±0.51、19.54±1.48、28.56±1.48和14.39±1.56,p-Akt在脑干周围的脑组织中的表达分别为6.45±1.41、8.09±1.32、6.05±1.12、13.63±1.45、16.58±1.61 和10.75±1.01,p-GSK3β在脑梗死周围的脑组织中的表达分别为8.64±0.52、5.18±0.61、18.54±1.45、39.56±1.63、43.57±1.59 和 18.43±1.48,p-GSK3β在脑干周围的脑组织中的表达分别为8.04±1.39、6.91±1.01、6.82±1.16、15.59±1.33、15.65±1.18 和 5.18±0.47.与模型组相比,低剂量甘草甜素组、高剂量甘草甜素组的大鼠脑梗死和脑干周围脑组织中 p-PI3K、p-Akt和p-GSK3β的表达均显著上调(均P＜0.05).结论 甘草甜素对PSS大鼠痉挛的抑制作用可能与上调PI3K/Akt/GSK3β通路有关.

目的:甘草甜素(Gly)调节高迁移率族蛋白(HMGB1)/晚期糖基化终产物受体(RAGE)信号通路对高糖诱导的心肌细胞凋亡和自噬的影响.方法:体外培养大鼠心肌细胞H9c2,将其分为7组:对照组、高糖组、高糖+Gly组、高糖+pcDNA3.1空载体组、高糖+pcDNA3.1-HMGB1组、高糖+Gly+pcDNA3.1空载体组、高糖+Gly+pcDNA3.1-HMGB1组.细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活力;V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)法检测细胞凋亡率;透射电镜观察细胞自噬;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病基因-2相关X蛋白基因(Bax)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)和Beclin-1凋亡、自噬相关蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针法检测活性氧(ROS)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测HMGB1、RAGE mRNA表达水平.结果:与对照组比较,高糖组H9c2细胞活力下降,细胞凋亡率、自噬小体数量及Bax、LC3、Beclin-1蛋白表达增加,IL-1β、TNF-α、ROS水平及HMGB1、RAGE mRNA表达增加,差异均有统计学意义(P＜0.05);与高糖组比较,高糖+Gly组H9c2细胞活力升高,细胞凋亡率、自噬小体数量及Bax、LC3、Beclin-1蛋白表达减少,IL-1β、TNF-α、ROS水平及HMGB1、RAGE mRNA表达减少,差异均有统计学意义(P＜0.05);与高糖+Gly组比较,高糖+Gly+pcDNA3.1-HMGB1组H9c2细胞活力下降,细胞凋亡率、自噬小体数量及Bax、LC3、Beclin-1蛋白表达增加,IL-1β、TNF-α、ROS水平及HMGB1、RAGE mRNA表达增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:Gly能够减轻高糖诱导的H9c2细胞炎症和氧化应激反应,抑制其凋亡和自噬,可能与抑制HMGB1/RAGE信号通路有关.

目的:探究甘草甜素(Gly)对喉癌Hep-2细胞侵袭和迁移的影响及作用机制.方法:体外培养正常人喉黏膜上皮细胞和喉癌Hep-2细胞,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和蛋白印迹实验检测微小RNA-205-5p(miR-205-5p)、沉默信息调节因子2相关酶3(SIRT3)mRNA和蛋白表达水平.将喉癌Hep-2细胞分为对照组、Gly低浓度组、Gly中浓度组、Gly高浓度组、Gly高浓度+空载质粒组、Gly高浓度+miR-205-5p抑制剂组.各组给予相应浓度的Gly干预或转染对应质粒培养48 h.Transwell实验和划痕实验分别检测各组Hep-2细胞侵袭和迁移能力.RT-qPCR法和蛋白印迹实验检测各组Hep-2细胞miR-205-5p、SIRT3 mRNA和蛋白表达水平.双荧光素酶报告基因实验分析miR-205-5p与SIRT3的靶向关系.结果:与人喉黏膜上皮细胞比较,喉癌Hep-2细胞miR-205-5p水平降低,SIRT3 mRNA和蛋白水平升高(均P＜0.05).与对照组比较,Gly低、中、高浓度组穿膜细胞数和划痕愈合率、SIRT3 mRNA和蛋白水平依次降低,miR-205-5p水平依次升高(均P＜0.05).与Gly高浓度组和Gly高浓度+空载质粒组比较,Gly高浓度+miR-205-5p抑制剂组穿膜细胞数和划痕愈合率、SIRT3 mRNA和蛋白水平升高,miR-205-5p水平降低(均P＜0.05).miR-205-5p可靶向调控SIRT3表达.结论:Gly能够抑制Hep-2细胞侵袭和迁移,其机制可能与上调miR-205-5p表达,进而靶向下调SIRT3表达有关.

目的 研究甘草甜素(GL)是否可以通过调节TGF-β/Smad信号通路对肺癌荷瘤小鼠放射性肺损伤(RILI)产生影响.方法 取48只小鼠,先随机选出12只小鼠作为NC组,其余小鼠构建肺癌荷瘤小鼠模型并采用X射线照射全胸建立RILI模型,再将小鼠随机分为照射+Model组、照射+GL组(10 mg/kg)、照射+GL+SRI-011381组(10 mg/kg+30 mg/kg TGF-β激动剂).使用酶联免疫吸附(ELISA)法检测小鼠血清中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;HE染色法检测小鼠肺组织病理损伤;试剂盒检测小鼠肺组织中羟脯氨酸(HYP)、髓过氧化物酶(MPO)含量;免疫组化法(IHC)检测肺组织中TGF-β、α-SMA表达;Western Blot检测小鼠肺组织中TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7蛋白表达.结果 与NC组比较,照射+Model 组小鼠血清中 IL-6、TNF-α 水平、HYP、MPO、TGF-β 和 α-SMA 表达、TGF-β1、p-Smad2/3 蛋白表达升高,肺组织病理损伤加重,Smad7蛋白表达降低(P＜0.05);与照射+Model组比较,照射+GL组小鼠血清中IL-6、TNF-α水平、HYP、MPO、TGF-β和α-SMA表达、TGF-β1、p-Smad2/3蛋白表达减少,肺组织病理损伤减轻,Smad7蛋白表达增加(P＜0.05);照射+GL+SRI-011381组中实验检测结果则与照射+GL组结果趋势相反,表明SRI-011381干预后减弱了 GL对肺癌荷瘤小鼠RILI的改善作用.结论 甘草甜素可以通过抑制TGF-β/Smad信号通路对肺癌荷瘤小鼠放射性肺损伤进行修护改善.

目的:探讨甘草甜素抑制良性前列腺增生的作用及其机制.方法:体内实验选取成年雄性SD大鼠随机分为 6 组(每组 10 只):正常对照组、甘草甜素对照组、高迁移率族蛋白B-1组(HMGB-1)对照组、模型组、甘草甜素组、HMGB-1组,干预 21 d取材前列腺组织.HE染色观察大鼠前列腺组织病理学改变;免疫组化(IHC)和蛋白免疫印记法分析HMGB-1及自噬相关蛋白表达;测量法分析前列腺的质量、体积及其指数;透射电镜观察大鼠前列腺组织自噬小体形成.体内外实验选择BPH-1、WPMY-1 细胞,分为丙酸睾丸素组、HMGB-1 对照组、甘草甜素对照组、HMGB-1组、甘草甜素组,Western Blot检测HMGB-1、AR、Beclin-1、P62 蛋白表达及LC-3bⅡ/Ⅰ水平,MDC法及吖啶橙染色及检测细胞的自噬水平.结果:与正常对照组比较,模型组前列腺腺体上皮细胞呈复层高柱状增生、部分细胞间质纤维结缔组织增生,前列腺体积、质量、指数显著增加,前列腺组织中AR、HMGB-1、AR、Beclin-1 及LC-3bⅡ/Ⅰ水平均显著升高,大鼠前列腺组织透射电镜下自噬小体数目显著增加,P62 蛋白表达显著降低(P<0.05).在体外实验中,模型组细胞自噬水平显著升高,前列腺AR、HMGB-1、Beclin-1蛋白表达及LC-3Ⅱ/Ⅰ水平显著升高,P62 蛋白表达显著降低(P<0.05).HMGB1 处理可引起和加剧前列腺组织增生、自噬.甘草甜素可降低前列腺增生和自噬水平.结论:甘草甜素能通过抑制HMGB-1来抑制良性前列腺增生.

目的:探讨甘草甜素对病毒性脑炎小鼠神经元活性及血清神经元特异性烯醇化酶(neuronspe-cific enolase,NSE)的影响.方法:将SD小鼠30只随机分为生理盐水组、病毒性脑炎组和甘草甜素组,每组10只.注射柯萨奇病毒B3建立病毒性脑炎模型,甘草甜素组灌胃甘草甜素50 mg/kg,生理盐水组及病毒性脑炎组灌胃等剂量生理盐水.采用迷宫测试方法检测小鼠行为能力,甲酚紫(cresyl violet,CV)法检测神经元病理变化,酶联免疫法检测NSE与TUNEL法检测小鼠神经元凋亡情况,免疫印迹法检测神经元内Bax、Caspase-3.结果:3组小鼠逃避潜伏期与NSE值均随灌胃天数的增加而减少,其中病毒性脑炎组高于生理盐水组(P＜0.05),甘草甜素组低于病毒性脑炎组(P＜0.05);与生理盐水组相比,病毒性脑炎组S100B升高(P＜0.05);与病毒性脑炎组相比,甘草甜素组S100B下降(P＜0.05);小鼠神经元凋亡率,病毒性脑炎组高于生理盐水组(P＜0.05),甘草甜素组低于病毒性脑炎组(P＜0.05);生理盐水组小鼠几乎无Bax、Caspase-3蛋白表达,甘草甜素组Bax、Caspase-3蛋白相对表达量低于病毒性脑炎组(P＜0.05).结论:甘草甜素对病毒性脑炎小鼠行为能力及神经元活性改善有一定积极作用,其作用机制可能与调控NSE、S100B、Bax及Caspase-3水平有关.