目的 探究番茄碱通过单磷酸腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/环氧合酶-2(COX-2)通路抑制食管癌凋亡的机制研究.方法 将人食管癌EC9706细胞随机分为对照组、低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组、高剂量+抑制药组;对照组细胞不做处理,低、中、高剂量实验组细胞分别给予1.0、2.0和4.0μmol·L-1的番茄碱处理细胞48 h,高剂量+抑制药组使用4.0 μmol·L-1番茄碱和10 μmol·L-1 AMPK抑制药Dorsomorphin共同处理细胞48 h.用细胞计数试剂盒8(CCK8)法检测细胞存活率;用流式细胞术和TUNEL法检测细胞凋亡情况;用蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞相关蛋白表达情况.结果 对照组,低、中、高剂量实验组及高剂量+抑制药组细胞TUNEL阳性细胞率分别为(3.73±0.60)％、(12.48±1.05)％、(17.03±1.29)％、(33.04±2.25)％和(13.99±1.12)％,Ki67 蛋白表达水平分别为 0.98±0.09、0.79±0.07、0.59±0.09、0.33±0.03 和 0.71±0.07,胱天蛋白酶(Cl-caspase-3)蛋白表达水平分别 为0.30±0.04、0.59±0.05、0.75±0.07、1.00±0.06 和 0.54±0.05,p-AMPK蛋白表达水平分别为 0.28±0.05、0.56±0.06、0.73±0.04、1.09±0.10 和 0.69±0.04;COX-2 蛋白表达水平分别为 1.13±0.08、0.74±0.07、0.57±0.07、0.39±0.04 和 0.72±0.07.低、中、高剂量实验组上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05);高剂量+抑制药组上述指标与高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 番茄碱可通过激活AMPK/COX-2信号通路抑制食管癌细胞增殖、诱导凋亡.

目的 考察番茄碱对人结直肠癌HCT116细胞增殖、凋亡与转移的影响及潜在作用机制.方法 体外培养人结直肠癌HCT116细胞,给予不同剂量番茄碱处理后,利用CCK8试剂和平板克隆实验检测细胞增殖活性;划痕及迁移和侵袭实验检测细胞的转移能力;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;Western B1ot蛋白质印迹法检测细胞的凋亡和转移相关蛋白的表达情况.结果 与对照组相比,番茄碱可抑制人结直肠癌HCT116细胞的增殖和转移能力并诱导其凋亡,其作用机制可能与促进细胞内Bax、E-Cadherin蛋白的表达和降低Bcl-2、α-SMA的表达有关.结论 番茄碱能通过抑制HCT116细胞的增殖与转移,促进细胞凋亡进而抑制结直肠癌的发生与发展.

目的 研究α-番茄碱对人肝癌细胞HuH-7增殖、凋亡、迁移及相关蛋白的影响.方法 不同浓度α-番茄碱(1、1.5、2、2.5μmol/L)处理肝癌细胞24 h,检测HuH-7细胞糖酵生化指标变化,细胞增殖实验和平板克隆实验检测细胞增殖活性变化,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移活性变化,Western blot检测糖酵解相关蛋白HIF-1α、MCT4、LDHA表达,生物信息分析MCT4的基本情况.结果 与对照组比较,α-番茄碱处理后HuH-7细胞葡萄糖消耗水平、乳酸生成水平、ATP水平、细胞增殖能力、转移能力、HIF-1α、MCT4和LDHA蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01),且生信分析表明MCT4在肝癌细胞中高表达并且与不良预后有密切关系.结论 番茄碱可能通过抑制糖酵解降低人肝癌细胞HuH-7增殖与迁移能力,且可能抑制MCT4进而在预防肝癌中发挥重要作用.

目的 观察番茄碱对人食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其中相关分子机制.方法 采用CCK-8法检测不同浓度(1、2、3、4、5、6、7、8、9μmol/L)番茄碱对食管癌Eca-109细胞增殖抑制率的影响;采用流式细胞术和Western Blot蛋白质印迹法分别测定不同浓度(0、1.5、3、6μmol/L)番茄碱诱导食管癌Eca-109细胞的凋亡率及其核因子-κB(NF-κB)p65、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白相对表达量.结果 通过CCK-8法观察到,番茄碱呈剂量依赖性地抑制食管癌Eca-109细胞的增殖活性,差异有统计学意义(P<0.001),其时间依赖性低,差异无统计学意义(P>0.05),当番茄碱浓度>6μmol/L时,食管癌Eca-109细胞几乎不能存活.在含番茄碱浓度3、6μmol/L培养基中培养食管癌Eca-109细胞24 h后,细胞早期、晚期和总体凋亡率增加,差异有统计学意义(P<0.05),且伴随NF-κB p65、VEGF蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.001).结论 番茄碱在体外细胞实验中,可以抑制食管癌Eca-109细胞的增殖,并促进其早期、晚期凋亡,其作用机制可能与下调肿瘤增殖生长相关蛋白NF-κB与VEGF相关.