目的 研究石蒜碱介导人乳腺癌MDA-MB-231细胞自噬及凋亡的作用机制.方法 采用CCK-8法检测石蒜碱对MDA-MB-231细胞增殖的影响;倒置显微镜、荧光显微镜和激光共聚焦扫描显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)观察细胞形态;细胞集落实验检测细胞克隆形成能力;划痕实验检测细胞迁移能力;流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、线粒体膜电位;LSCM检测线粒体膜通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)开放情况;Western blotting检测线粒体自噬相关蛋白[线粒体内膜转位酶(translocase of inner membrane,TIM)、线粒体外膜转位酶(translocase of outer membrane,TOM)、E3 泛素连接酶(E3 ubiquitin protein ligase,PARKIN)、PTEN 诱导的激酶 1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)、微管相关蛋白轻链 3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3-B)、p62]和凋亡相关蛋白[半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cystein-asparate protease-3,Caspase-3)、Bcl-2 相关 X 蛋白(Bcl-2associatedXprotein,Bax)、B 淋巴细胞瘤-2(B-celllymphoma-2,Bcl-2)、细胞色素 C(cytochrome-C,Cyt-C)]的表达.结果 石蒜碱对MDA-MB-231细胞具有生长抑制作用,其半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值为6.21 μmol/L;石蒜碱能够改变细胞形态,部分细胞出现凋亡迹象;石蒜碱能够显著抑制细胞的增殖和迁移能力(P＜0.01);与对照组比较,随着石蒜碱给药浓度的增加,细胞凋亡率随之升高(P＜0.01),ROS水平升高(P＜0.01),线粒体膜电位下降(P＜0.01),MPTP开放(P＜0.01);石蒜碱给药48h后,细胞内TIM、TOM、p62和Bcl-2蛋白表达量下调(P＜0.01),PARKIN、PINK1、LC3-B、Caspase-3、Bax和Cyt-C蛋白表达量上调(P＜0.01),且呈浓度相关性.结论 石蒜碱对MDA-MB-231细胞具有生长抑制作用,并可通过调控线粒体氧化损伤介导MDA-MB-231细胞的自噬及凋亡.

目的 在体外探讨石蒜碱(LYC)对缺氧条件下心肌细胞损伤和心肌成纤维细胞活化与胶原合成的影响及其生物学机制.方法 分离SD乳鼠心肌细胞与心肌成纤维细胞;使用低氧条件诱导心肌细胞损伤,并将细胞分为 4 组:对照(Ctl)组、缺氧(Hyp)组、缺氧与LYC联合处理(Hyp+LYC)组、缺氧与含NLR家族Pyrin域蛋白(NLRP)3 炎症小体抑制剂MCC950 联合处理(Hyp+MCC950)组;Western印迹检测不同缺氧时间(1、2、4、8 h)对心肌细胞中NLRP3 蛋白表达的影响;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上述 4 组心肌细胞培养上清液中炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子(TNF)-α与心肌细胞损伤标记分子乳酸脱氢酶(LDH)的含量;TUNEL染色检测各组心肌细胞的凋亡水平;Western印迹检测各组心肌细胞中NLRP3、凋亡相关的斑点样蛋白(ASC)、活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(cleaved caspase)-1、cleaved IL-1β 和cleaved IL-18 与cleaved GSDMD蛋白表达水平;应用血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导心肌成纤维细胞纤维化,并将细胞同样分为4 组:对照(Control)组,Ang Ⅱ处理(Ang Ⅱ)组,联合使用Ang Ⅱ与LYC处理(Ang Ⅱ+LYC)组,联合使用Ang Ⅱ与MCC950 处理(Ang Ⅱ+MCC950)组;5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷(EDU)染色与Transwell实验观察各组心肌成纤维细胞的增殖活力与迁移能力;细胞免疫荧光(IHC)染色检测各组心肌成纤维细胞中α-平滑肌肌动蛋白(SMA)表达丰度;Western印迹检测心肌成纤维细胞中纤维化标志分子Ⅰ型胶原蛋白(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Col Ⅲ)、α-SMA和转化生长因子(TGF)-β的蛋白表达水平.结果 低氧处理可显著刺激心肌细胞中NLRP3 蛋白表达(P<0.05,P<0.01),且处理 4 h时细胞中NLRP3 增加趋势最为显著(P<0.01);与Ctl组相比,Hyp组心肌细胞中 IL-1β、IL-18、TNF-α 与 LDH 浓度、TUNEL 阳性细胞率和 NLRP3、ASC 与cleaved caspase-1、cleaved IL-1β与leaved IL-18 及cleaved GSDMD蛋白表达水平均显著增加(P<0.05,P<0.01);与Hyp组相比,Hyp+LYC组与Hyp+MCC950 组上述检测指标均明显降低(P<0.05),后两组无明显差异(P>0.05);与Control组相比,Ang Ⅱ组、Ang Ⅱ+LYC与Ang Ⅱ+MCC950 组心肌成纤维细胞的EDU阳性率、迁移能力和细胞中α-SMA蛋白表达丰度及Col Ⅰ、Col Ⅲ、α-SMA和TGF-β蛋白表达水平均显著增加(P<0.05,P<0.01);较 Ang Ⅱ组相比,Ang Ⅱ+LYC 与 Ang Ⅱ+ MCC950 组成纤维细胞的上述检测指标均明显降低(P<0.05),后两组无明显差异(P>0.05).结论 LYC可能通过降低NL-RP3 炎症小体的激活在体外改善缺氧诱导的心肌损伤与炎症反应,并抑制心肌成纤维细胞的活化与促纤维介质的释放.

目的:探讨天然植物提取物石蒜碱对口腔鳞癌细胞的作用及相关机制.方法:应用平板克隆形成实验和流式细胞术检测石蒜碱对口腔鳞癌细胞体外增殖的作用,采用划痕实验和Transwell实验检测石蒜碱对口腔鳞癌细胞侵袭的作用,应用Western免疫印迹和免疫荧光验证石蒜碱对口腔鳞癌细胞SCAP蛋白的抑制作用.构建裸鼠荷瘤模型检测石蒜碱的体内抗口腔鳞癌效果.采用Graphpad Prism软件包进行统计学分析.结果:平板克隆形成和流式细胞实验显示,石蒜碱对口腔鳞癌细胞的体外增殖具有明显的抑制作用.划痕实验和Transwell结果显示,石蒜碱对口腔鳞癌细胞的体外迁移、侵袭也具有明显的抑制作用.Western免疫印迹和免疫荧光结果显示,石蒜碱能够降解口腔鳞癌细胞的SCAP蛋白,影响癌细胞的胆固醇代谢.动物实验结果进一步表明,石蒜碱在体内也具有良好的抗癌活性,能显著抑制口腔鳞癌细胞的生长,降低癌细胞内SCAP蛋白水平.结论:石蒜碱能够通过降解SCAP蛋白,抑制口腔鳞癌细胞增殖与侵袭,有望成为治疗口腔鳞癌的低毒高效天然植物提取药物.

目的 研究石蒜碱对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及机制.方法 将H9c2心肌细胞随机分为 4组:对照组、H/R组、H/R+石蒜碱低剂量组、H/R+石蒜碱高剂量组;使用CCK-8分析H9c2心肌细胞活力;用试剂盒测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量,丙二醛(MDA)和活性氧簇(ROS)的含量,超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;用流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测Notch1蛋白水平;用Real-time聚合酶链反应检测HES-1、HES-5和Hey-1 mRNA水平.结果 与对照组比较,H/R组H9c2心肌细胞的活力减弱(P<0.05),SOD和GSH-Px的活性减弱(P<0.05),细胞凋亡率,LDH释放量,MDA和ROS含量,Notch1蛋白水平,HES-1、HES-5和Hey-1 mRNA水平均增加(P<0.05);与H/R组相比,石蒜碱低、高剂量组H9c2心肌细胞的活力增强(P<0.05),SOD和GSH-Px的活性增强(P<0.05),细胞凋亡率,LDH释放量,MDA和ROS含量均降低(P<0.05),Notch1蛋白水平,HES-1、HES-5和Hey-1 mRNA水平均增加(P<0.05).结论 石蒜碱能减轻H/R诱导心肌细胞的损伤作用,其作用机制是否与上调Notch通路有关有待于进一步研究.

恶性肿瘤发病率与病死率日益递增,对人类健康造成巨大威胁,已成为全球关注的公共卫生问题.目前,以放化疗为主治疗肿瘤疾病的方法因其不良反应大、预后不良及肿瘤耐药等短板,使肿瘤治疗遭遇瓶颈.中医药以其多途径、多靶点、多通路调控的优势在抗肿瘤方面崭露头角.石蒜碱是石蒜科植物的主要有效成分,研究表明,石蒜碱具有显著的抗肿瘤活性,对肾癌、肝癌、结直肠癌、肺癌、宫颈癌、前列腺癌、骨髓瘤、白血病、乳腺癌等均有抑制作用.文章就石蒜碱近年来抗肿瘤相关研究进行综述,对其抗肿瘤作用机制进行归纳总结,以期为其抗肿瘤开发利用提供一定参考.

仙茅为石蒜科植物仙茅的干燥根茎,主要含有酚类与酚苷类、皂苷元与皂苷类、黄酮类、木脂素类、生物碱等成分[1] . 淫羊藿性热味辛,归肝、肾、脾经,具有补肾阳、强筋骨、祛寒湿等功效. 在精准辨证论治的前提下,中药剂量是疗效的根本保障.

石蒜科生物碱具有很好的药用价值,目前,其主要获取方式以植物提取为主,然而植物获取存在植物培育周期长、人工生物碱含量低等难题,本论文对石蒜科生物碱类的化合物按其生物发生谱系和环型进行分类,对生物合成途径进行了系统的整理和分类,并且总结了石蒜科生物碱参与生物合成的关键合成酶,旨在为今后石蒜科生物碱可持续性研究提供参考.

目的 通过对长爪沙鼠食物进行调查,为进一步控制长爪沙鼠密度及疫情提供参考.方法 通过挖掘长爪沙鼠粮仓,对粮仓内容物进行分析鉴定,观察洞口食物残渣以及查阅历史文献资料等方式调查长爪沙鼠食物.结果 通过长爪沙鼠食物调查,获得植物种类:禾本科、亚麻科、蓼科、蒺藜科、菊科、茄科、车前科、十字花科、豆科、苋科、紫草科、唇形科、毛莨科、石蒜科、蔷薇科共15科28属30种.结论 长爪沙鼠主要以农作物的种子和植物种籽为食,根据长爪沙鼠的食性配置毒饵,选择合适的灭鼠时机进行灭鼠能收到良好效果.针对其储粮习性,在秋季农作物和草籽成熟时密切注意长爪沙鼠活动,及时采取必要措施控制鼠密度,严防鼠疫疫情发生.

该文报道了湖北药用植物1个新记录属:金线兰属Anoectochilus及其对应的新记录种金线兰Anoectochilus roxburghii;7个新记录种:甘青大戟Euphorbia micractina、武陵黄耆Astragalus wulingensis、东风草Blumea megacephala、钉柱委陵菜Potentilla saundersiana、台北艾纳香B.formosana、江苏石蒜Lycoris houdyshelii、大野芋Colocasia gigantea;1个新记录变种花叶对叶兰Neottia puberula var.maculata.其中金线兰和花叶对叶兰为国家二级保护植物;IUCN将金线兰列为濒危(EN)级别,武陵黄耆被列为极危(CR)级别.该文对这些物种的新分布区域进行报道,拓宽了这些物种的分布范围,丰富了湖北植物多样性.

比利时布鲁塞尔自由大学(ULB)理学院Denis Lafontaine领导的新研究测试了一种名为网球花胺(HAE)的天然水仙提取物的抗癌特性.HAE是一种天然生物碱,即在植物中发现的一种天然化学物质,对人体有强烈的生理作用.正如Lafontaine和他的团队解释的那样,这种水仙提取物被认为对抗癌症有帮助;以前的体外研究(由Lafontaine团队和其他研究人员进行)表明,HAE具有克服细胞对细胞凋亡或细胞死亡的抗性的抗癌作用.在这项新研究中,来自科学院RNA分子生物学实验室和ULB癌症研究中心的研究人员揭示了HAE激活了“抗肿瘤监测通路”.这些结果有助于阐明家族中被称为石蒜科生物碱的植物可以对抗癌症的机制.