目的:观察硝菔通结方对功能性便秘大鼠肾脏以及结肠组织水通道蛋白的影响,从现代医学肾脏调节水液代谢的角度探讨中医“肾主水司二便”的科学内涵,揭示硝菔通结方从肾论治便秘的作用机制.方法:48只成年雄性SD大鼠,采用随机法分为空白组(8只)和造模组(40只),造模组灌胃复方地芬诺酯混悬液6周复制便秘模型后随机分为模型组(FC组)、硝菔通结方高、中、低剂量组、阳性药物对照组(苁蓉通便口服液组,简称口服液组).各治疗组给予不同剂量的硝菔通结方、阳性药物对照组给予苁蓉通便口服液(后简称口服液组)灌胃1个月.观察各组大鼠的一般情况,采用ELISA法检测各组大鼠血清中精氨酸加压素(AVP)、环磷酸腺苷(cAMP)的含量,Western-Blot法检测肾脏组织中AQP2以及AQP3的表达,结肠组织中AQP3的表达.结果:与空白组比较,模型组大鼠粪便量少、质地干硬,血清中AVP、cAMP的含量升高(P＜0.05),肾脏组织中AQP2以及AQP3的表达明显升高(P＜0.01),结肠组织中AQP3的表达明显升高(P＜0.01).与模型组相比,各剂量硝菔通结方组以及口服液组大鼠粪便量增加且质地稀软,血清中AVP、cAMP的含量降低(P＜0.05),肾脏组织中AQP2以及AQP3的表达明显降低(P＜0.01),结肠组织中AQP3的表达明显降低(P＜0.01).结论:肾脏能通过调节水通道蛋白而影响肠道的水液代谢,这可能是中医“肾主水司二便”的科学内涵之一;硝菔通结方可通过影响肾脏组织的水通道蛋白而纠正肠道水液代谢紊乱,从而对功能性便秘发挥治疗作用.

目的:探讨莱菔硫烷(SFN)对二乙基亚硝胺(DEN)诱导肝细胞癌(HCC)的抑制作用和可能的机制.方法:反复注射DEN以诱导大鼠发生肝细胞肝癌,并在出现纤维化或肝硬化的症状时给予不同浓度(0.19 mg/kg、0.38 mg/kg和0.57 mg/kg)的SFN.观察评估肝脏标本大体形态与癌变结节数目;苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色检测镜下肝细胞损伤程度和肝细胞癌变程度;ELISA检测肝组织碱性磷酸酶(ALP)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白细胞介素(IL)-1α、IL-6、IL-10、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和转化生长因子β(TGF-β)的含量;分光光度法检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的活性及丙二醛(MDA)的含量.结果:大体观察可见,接受SFN干预的大鼠肝脏样本癌变结节数目较模型组低,且SFN的给药剂量与肝脏癌变程度呈负相关;HE染色与Masson染色示SFN能减轻DEN所致肝脏癌变程度和炎症细胞浸润,缓解程度与SFN用药剂量呈现正相关;ELISA结果显示SFN能减轻DEN所致肝细胞损伤,SFN干预剂量越高,ELISA检测出的肝细胞损伤指标AST、ALT、TBIL和ALP的水平越低;通过SFN干预后,DEN诱导的肝脏样本中与炎症反应相关的炎性因子IL-1α、IL-6、IL-1β和TNF-α的含量在肝组织下降,含量降低程度与给药浓度呈正相关,而炎性因子IL-10和TGF-β的含量随给药浓度增加而上升;分光光度实验法的结果显示,氧化应激标志物SOD、CAT和GPx的活性随SFN给药浓度的增加而降低.结论:SFN对DEN诱发的肝细胞癌具有一定的抑制作用.这种作用可能与SFN能够抗炎、抗氧化应激和减轻肝损伤有关.

目的 研究硝菔通结方对慢性传输型便秘(Slow Transit Constipation,STC)的作用机制.方法 用大黄粉混悬液诱导建立SD大鼠STC模型,将大鼠随机分为模型组、硝菔通结方组、莫沙必利组,另设不造模大鼠为空白组.各组大鼠按剂量每日灌胃1次,共28d.空白组、模型组给与同体积纯水干预.苏木素-伊红(Haematoxylin-eosin,HE)染色法观察大鼠结肠组织病理情况;AB-PAS染色观察结肠黏液细胞的黏液分泌情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测BDNF、TrkB、5-HT、GNDF、GFRα-l、Ret的相关蛋白表达量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测BDNF、TrkB、GNDF、GFRα-l、Ret mRNA表达水平.结果 与空白组比较,模型组大鼠结肠黏膜肿胀,腺体排列杂乱,BDNF、TrkB、5-HT、GNDF、GFRα-1、Ret含量明显降低(P＜0.01);与模型组相比硝菔通结方组BDNF、TrkB、5-HT、GDNF、GFRα-1的蛋白表达及mRNA水平均显著升高(P＜0.01);RetmRNA的表达水平也有提升(P＜0.05).结论 硝菔通结方对STC大鼠GDNF与BDNF及其相关蛋白有促进作用.