目的 建立大盘龙七Bergeniae Scopulosae Rhizoma的HPLC指纹图谱及多酚类成分的含量测定方法,为大盘龙七药材质量控制及临床应用提供依据.方法 采用Agilent 5 TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.1％磷酸水为流动相进行梯度洗脱,体积流量为1.0mL/min,检测波长为275 nm,柱温25 ℃;对10批大盘龙七药材进行指纹图谱构建,基于指纹图谱相似度分析结合聚类分析与主成分分析,同时测定熊果苷、没食子酸、岩白菜素、儿茶素、4-O-没食子酰岩白菜素、11-O-没食子酰岩白菜素、儿茶素没食子酸酯的含量.结果 建立了大盘龙七药材的HPLC指纹图谱,其中S5的相似度为0.752,其余批次的相似度均大于0.92,共标定了 14个共有峰,指认出7个色谱峰,分别为熊果苷、没食子酸、岩白菜素、儿茶素、4-O-没食子酰岩白菜素、11-O-没食子酰岩白菜素、儿茶素没食子酸酯.聚类分析将10批大盘龙七药材分为3类;经主成分分析,主成分1～4是影响药材样品质量评价的主要因子;采用正交偏最小二乘法判别分析标记了大盘龙七中6个差异性成分.含量测定结果表明10批大盘龙七药材中熊果苷、没食子酸、岩白菜素、儿茶素、4-O-没食子酰岩白菜素、11-O-没食子酰岩白菜素、儿茶素没食子酸酯的含量范围分别为7.30～63.24、0.26～2.98、15.96～78.04、1.54～11.17,0.97～2.54、2.09～7.38、0.64～12.30 mg/g.结论 建立的大盘龙七药材的HPLC指纹图谱及多酚类成分的含量测定方法操作简便、重复性好,可用于大盘龙七药材的定性定量分析,为大盘龙七药材的质量评价提供参考.

根据市场需求和野生资源现存状况,筛选厚叶岩白菜(Bergenia crassifolia)、秦岭岩白菜(B.scopulosa)和岩白菜(B.purpurascens)进行规模化繁殖,并利用ISSR分子标记对组培苗进行遗传稳定性分析.以顶芽为外植体,筛选出MS+0.5mg·L-16-BA+0.01 mg·L-1 NAA+2.0 mg·L-1 Vc为最佳增殖培养基,3种岩白菜属植物增殖系数分别为3.10、2.50和2.10;在1/2MS+1.0 mg·L-1 IBA+2.0 mg·L-1Vc培养基上,3种岩白菜属植物生根率分别为85％、80％和75％;在腐殖土:黄沙:珍珠岩=2∶1∶1 (v/v/v)的混合基质中,移栽成活率分别为90％、85％和80％.规模化繁殖厚叶岩白菜20万株,秦岭岩白菜2万株,岩白菜1万株,目前还在持续生产中.ISSR分子标记结果表明,岩白菜后代遗传变异较大,秦岭岩白菜后代遗传变异较小,3个种在继代至第20代时出现了遗传变异;岩白菜和秦岭岩白菜的平均遗传变异率随继代次数的增加而增加,厚叶岩白菜的平均遗传变异率随继代次数的增加呈现不规律变化.

目的:采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法(UHPLC-Q Exactive Focus MS/MS)对秦岭岩白菜药材的化学成分进行快速识别和鉴定.方法:选择秦岭岩白菜的75％甲醇提取液作为供试品溶液,采用Thermo Accucore aQ RP18色谱柱(2.1 mm×150 mm,2.6 μm),流动相甲醇(A)-0.1％甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0～40 min,5％～95％A;40～45 min,95％A),流速0.3 mL· min-1,柱温30℃C;质谱分析采用加热电喷雾离子源(HESI),正、负离子模式扫描,扫描范围m/z 80～1 200.结果:共鉴定出了66个成分,包括游离氨基酸2个、岩白菜素类7个、黄酮类15个、有机酸类1 5个、糖苷类25个及其他类2个.结论:该方法可系统、准确、快速地对秦岭岩白菜药材中化学成分进行定性分析,其中8个成分(琥珀酸、熊果苷、没食子酸、原儿茶酸、岩白菜素、儿茶素、绿原酸和咖啡酸)与对照品比对而准确鉴定,51个成分为首次在秦岭岩白菜中发现,28个成分为首次从岩白菜属植物中发现,可为秦岭岩白菜药效物质研究及质量评价提供重要依据.