-
全蝎分子鉴定及其配方颗粒的位点特异性PCR鉴别
编辑人员丨2024/4/27
全蝎是我国临床常用动物药材,《中国药典》规定全蝎的唯一基原为钳蝎科动物东亚钳蝎,但目前我国蝎目物种丰富,全蝎药材及其深加工制品都存在混伪现象,其中全蝎深加工制品在加工过程中,其显微特征可能不完整或丢失,使得基原鉴别变得困难.该研究基于东亚钳蝎与其他蝎物种的形态和氧化酶亚基1(COⅠ)序列,构建ML系统发育树进行物种鉴定,从而发现全蝎主要混伪品为细尖狼蝎;使用特异性聚合酶链式反应(PCR)鉴定方法,通过CO Ⅰ序列的差异SNP位点设计东亚钳蝎特异性鉴别引物,并筛选出全蝎药材与其配方颗粒的稳定引物区间,对全蝎药材及配方颗粒进行鉴定.通过优化PCR反应体系,当退火温度61 ℃、循环次数30次时,东亚钳蝎及其配方颗粒均可扩增出约150 bp明亮的特异性条带,其他混伪品均无条带.并对该方法的适应性进行考察,全蝎药材到冻干粉再到配方颗粒以及市售配方颗粒均可扩增出约150 bp的条带.研究结果表明,该方法可用于全蝎药材及其配方颗粒真伪鉴别,有利于完善全蝎配方颗粒的质量控制体系,为其临床应用提供保障.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2024/4/27
-
全蝎及其混伪品细尖狼蝎的鉴别方法研究
编辑人员丨2024/2/3
目的:建立一种能同时鉴别全蝎(东亚钳蝎)及其混伪品细尖狼蝎的有效方法.方法:基于东亚钳蝎和细尖狼蝎的线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(CO Ⅰ)基因差异,设计区分东亚钳蝎、细尖狼蝎的特异性引物,建立多重PCR方法,并对退火温度、引物浓度、循环次数、DNA模板用量等条件进行优化筛选.对不同来源的东亚钳蝎和细尖狼蝎样品进行实测验证,根据特异性条带大小进行鉴别.结果:当退火温度为51.6℃,循环次数为30,DNA模板用量为30 ng时,东亚钳蝎和细尖狼蝎分别出现约342 bp和108 bp的特异性条带.结论:该方法可以实现东亚钳蝎、细尖狼蝎及掺杂样品的快速而又准确地鉴别,并可弥补传统鉴别方法的不足.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2024/2/3
