N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（Ac-SDKP）是由胸腺素β4通过内肽酶-α和脯氨酰寡肽酶连续水解后产生的内源性短肽，具有免疫调节、促进血管生成、肿瘤发生和拮抗器官纤维化的作用。本文根据我们部分研究结果和近年来相关的文献，就Ac-SDKP研究进展进行综述。

唐古特红景天Rhodiola algida是青藏高原地区特有的药用植物,具有高原人参之美称,主要化学成分包括醇类、黄酮类、苯丙素类、有机酸类、烷烃类及萜类等,具有抗缺氧、抗氧化、抗癌、抑制脯氨酰寡肽酶活性、抗衰老、保护肝脑等药理作用.通过对近年来关于唐古特红景天化学成分、药理活性和毒理研究进行综述,以期提高人们对传统药用植物的认识、利用及保护意识,为唐古特红景天进一步的综合开发利用提供参考.

目的 体外探讨肝星状细胞(HSC)脯氨酰寡肽酶(POP)的生物学功能,以进一步阐述其在肝脏炎症和纤维化发生发展中的作用.方法 取HSC-T6细胞,经不同浓度的POP抑制剂(S17092)处理,采用ELISA法检测HSC-T6细胞N- 乙酰基- 丝氨酸- 天冬氨酸- 赖氨酸- 脯氨酸(Ac-SDKP)水平,使用流式细胞术和CCK8检测HSC-T6凋亡和增殖水平,采用实时定量-PCR法检测相关炎症和肝纤维化基因转化生长因子-β1(TGF-β1)、α- 平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、Ⅰ型胶原(Col I)水平,采用Western blot法检测相关蛋白(POP、TGF-β1、α-SMA、Smad7、p-Smad2/3、PPAR-γ)表达.结果 与对照组比,POP抑制剂干预组细胞内Ac-SDKP水平显著下降(P<0.05);POP被抑制后对HSC-T6凋亡没有显著的影响(P>0.05),但可抑制其增殖(P<0.05);与对照组比,抑制剂组HSC内α-SMA蛋白表达显著升高(P<0.05),而Smad7和PPAR-γ蛋白表达显著下降(P均<0.05);抑制剂组HSC内MCP-1和α-SMA mRNA水平显著上调(P均<0.05).结论 POP在肝星状细胞内可能发挥重要的抗炎抗纤维化作用,其机制可能与其调节Ac-SDKP及Smad7和PPAR-γ的表达有关.

目的 探讨携带脯氨酰寡肽酶(prolyloligopeptidase,POP)基因的慢病毒转染大鼠肝星状细胞系-T6 (hepatic stellate cellsT6,HSC-T6)对其生物学功能的影响,以揭示其在肝脏炎症与纤维化发生、发展中的作用.方法 采用大鼠HSC-T6作为研究对象,设计合成携带大鼠POP基因的慢病毒,转染HSC-T6;通过ELISA方法检测各组HSC内Ac-SDKP水平;Real-time-PCR法检测各组HSC内相关基因表达量变化(POP、TGF-β1、α-SMA、MCP-1、Col Ⅰ);Western blotting方法检测各组HSC中相关蛋白表达变化(POP、TGF-β1、α-SMA、Smad7、p-Smad2/3、PPAR-γ);CCK-8和流式细胞术检测转染POP对HSC增殖和凋亡的影响.结果 慢病毒能高效感染HSC-T6并表达有活性的POP蛋白,与正常对照组及空病毒组相比,POP慢病毒感染的细胞内Ac-SDKP明显升高,Smad7、PPAR-γ蛋白表达显著升高,而α-SMA表达显著下降;POP慢病毒感染的细胞内MCP-1及α-SMA mRNA表达显著下调;此外,POP可促进HSC-T6增殖生长,而对HSC-T6凋亡无影响.结论 POP在HSC内可能发挥抗炎、抗纤维化作用,其机制可能通过促进Smad7及PPAR-γ的表达,抑制MCP-1及α-SMA的表达而发挥作用.

目的:探讨胆总管结扎致肝纤维化模型大鼠肝脏组织中内源性N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)及相关调控因子水平的变化,阐明AcSDKP在肝纤维化过程中的作用.方法:45只普通级大鼠随机分为模型组、阻断组和对照组,每组15只.模型组采用胆总管结扎建立肝纤维化动物模型;阻断组应用血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)后建立肝纤维化动物模型;对照组予以开腹,但不结扎胆总管.分别在1、2和4周后留取血清及肝组织,检测各组大鼠肝功能指标、肝组织纤维化程度以及肝组织中AcSDKP水平,应用Western blotting法检测各组大鼠肝组织中胸腺素β4、赖氨酸寡肽酶(POP)和血管紧张素转换酶(ACE)水平.结果:自第1周开始,模型组大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TB)和白蛋白(ALB)水平高于其他2组(P＜0.05),而阻断组与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).自第2周开始,模型组大鼠血清中ALB及肝组织中AcSDKP水平低于其他2组(P＜0.05),而阻断组与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).第1周,3组大鼠肝组织中Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)和透明质酸(HA)水平比较差异无统计学意义(P＞0.05);第2周,模型组大鼠肝组织中PCⅢ、CⅣ和HA水平高于其他2组(P＜0.05),阻断组与对照组上述指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).第2周开始,模型组大鼠肝组织中胸腺素β4和ACE蛋白表达水平高于其他2组(P＜0.05),而POP蛋白表达水平低于其他2组(P＜0.05);阻断组与对照组上述指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).模型组大鼠肝组织中第1周结构基本正常,第2周时呈现小灶状坏死,第4周时呈现片状坏死;阻断组与对照组大鼠肝组织各时间点结构基本正常.结论:胆总管结扎致肝纤维化大鼠肝组织中内源性AcsDKP水平降低可能是通过Tβ4-POP-AcsDKP轴实现的.

器官纤维化是多种疾病终末期的共同病理变化,可导致器官功能衰竭.近年来有关N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(N-acetylseryl-aspartyl-lysyl-proline,Ac-SDKP)在抗器官纤维化方面的作用引起了学术界的关注.Ac-SDKP是由赖氨酸寡肽酶水解其前体胸腺素β4而产生的内源性四肽,在哺乳动物组织中普遍存在[1].研究表明,血管紧张素转化酶抑制剂能够增加血浆和组织中Ac-SDKP浓度[2],肾单位可释放Ac-SDKP[3].早期研究发现Ac-SDKP具有抑制造血干细胞生长的生物学功能,其后大量研究结果表明Ac-SDKP具有抗炎和抗纤维化作用,对各原因所致的器官纤维化,包括肺纤维化、心肌纤维化、肾纤维化、肝脏纤维化等均具有抑制作用[4-6].现就有关Ac-SDKP在抑制心脏纤维化、肾纤维化和硅肺纤维化方面的研究进展综述如下.

脯氨酰寡肽酶(prolyl oligopeptidase,POP)又称为脯氨酰内肽酶,是一种脯氨酸后切割酶,主要存在于细胞质中,负责短神经肽和肽激素的成熟和降解,与神经相关性疾病密切相关.POP的活性位点位于三联体催化结构域和β-螺旋桨结构域的界面.POP抑制剂具有神经保护、抗遗忘和增强认知的特性,同时对肿瘤、高血压等也有一定的治疗作用.本文就POP的功能、作用机制及其抑制剂的研究作一综述.

背景:如何能使移植后的间充质干细胞更好地存活并发挥其功能是目前间充质干细胞研究的热点之一.目的:探索过表达脯氨酰寡肽酶的骨髓间充质干细胞对大鼠肝纤维化的修复作用,并探讨相关机制.方法:35只雄性SD大鼠随机选取5只进入正常对照组(n=5),其余30只大鼠采用皮下多点注射四氯化碳花生油溶液方法制备大鼠肝纤维化模型,造模成功后被随机分为模型损伤组(n=10)、骨髓间充质干细胞组(n=10)、过表达脯氨酰寡肽酶的骨髓间充质干细胞组(n=10),经尾静脉分别注射生理盐水、1×106骨髓间充质干细胞、1×106过表达脯氨酰寡肽酶的骨髓间充质干细胞.3周后将大鼠处死,收集各组大鼠下腔静脉血,检测肝功能、肝纤维化指标;摘取肝脏行苏木精-伊红染色观察病理变化,荧光显微镜下观察细胞定位情况,Western blot法检测肝组织转化生长因子β蛋白的表达水平.结果与结论:①与模型损伤组比较,2个细胞移植组大鼠肝功能、肝纤维化指标均明显改善,且过表达脯氨酰寡肽酶的骨髓间充质干细胞组改善更明显(P<0.05);②大鼠肝组织冰冻切片荧光显微镜下观察显示:过表达脯氨酰寡肽酶的骨髓间充质干细胞组可见绿色荧光细胞,说明骨髓间充质干细胞成功在大鼠肝脏定植;③肝组织苏木精-伊红染色显示,2个细胞移植组肝纤维化程度明显改善,且过表达脯氨酰寡肽酶的骨髓间充质干细胞组肝脏病理更接近于正常;④2个细胞移植组转化生长因子β蛋白表达较模型损伤组均有明显降低(P<0.05),且过表达脯氨酰寡肽酶的骨髓间充质干细胞组降低更明显(P<0.05);⑤结果表明,过表达脯氨酰寡肽酶能够显著提高骨髓间充质干细胞对肝纤维化的修复能力.

目的 观察脯氨酰寡肽酶(POP)抑制剂S17092对脂质超载人肝细胞株LO2脂质沉积的改善作用,并探讨其机制.方法 将LO2细胞随机分为3组,对照组LO2细胞用1％无脂肪酸(FFA)的1640培养基培养,模型组LO2细胞用FFA制备脂质超载模型后再用1640培养基培养,实验组LO2细胞制备脂质超载模型后再加入含S17092的1640培养液培养.各组细胞继续培养24 h后,采用油红O染色法观察各组细胞内脂质沉积情况,采用Bio-Rad蛋白质测定法检测各组细胞内甘油三酯(TG),采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞内POP、固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD1)mRNA.结果 油红O染色结果显示,与对照组相比,模型组LO2细胞内含有大量的红染颗粒,而实验组较模型组红染颗粒相对较少.对照组、模型组、实验组细胞内TG水平分别为(1.995±0.221)pmole/μL、(2.910±0.030)pmole/μL、(2.573±0.113)pmole/μL,组间相比,P均<0.05.与对照组相比,模型组、实验组细胞中POP、SREBP-1c、FAS、ACC1、SCD1 mRNA相对表达量明显升高(P均<0.05);与模型组相比,实验组细胞中POP、SREBP-1c、FAS、ACC1、SCD1 mRNA相对表达量明显降低(P均<0.05).结论 POP抑制剂S17092可改善脂质超载LO2细胞的脂质沉积,其机制可能与抑制SREBP-1c及其靶基因的表达有关.