目的:研究抗纤维化四肽N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（Ac-SDKP）对矽肺大鼠纤维化肺组织中磷酸化热休克蛋白27（P-HSP27）及锌指家族核转录因子1（SNAI1）表达的调控，以探讨Ac-SDKP抗矽肺纤维化作用。方法:于2014年12月，采用一次性支气管灌注二氧化硅（SiO 2）粉尘的方法制备大鼠矽肺动物模型，选取80只SPF级健康成年Wistar大鼠，根据随机数字表法将大鼠分为8组，每组10只。模型对照4周组（饲养4周）、模型对照8周组（饲养8周）：支气管灌注生理盐水1.0 ml/只；矽肺模型4周组（饲养4周）、矽肺模型8周组（饲养8周）：支气管灌注50 mg/ml的SiO 2混悬液1.0 ml/只；单独Ac-SDKP给药4周组（饲养4周）、单独Ac-SDKP给药8周组（饲养8周）：Ac-SDKP 800 μg·kg -1·d -1腹腔泵给药；Ac-SDKP预防治疗组：Ac-SDKP 800 μg·kg -1·d -1给药48 h后，支气管灌注SiO 2混悬液1.0 ml/只，饲养8周；Ac-SDKP抗纤维化治疗组：支气管灌注SiO 2混悬液1.0 ml/只4周后，给予Ac-SDKP 800 μg·kg -1·d -1治疗4周。蛋白免疫印迹（Western blotting）检测各组P-HSP27、SNAI1、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA），以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达，免疫组织化学技术检测P-HSP27和SNAI1的表达，激光共聚焦显微镜检测P-HSP27和α-SMA共定位表达。 结果:与模型对照组比较，矽肺模型组大鼠矽肺纤维化区域P-HSP27、SNAI1、α-SMA、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达增强，差异均有统计学意义（ P<0.05）。给予Ac-SDKP干预后，与矽肺模型8周组比较，Ac-SDKP预防和抗纤维化治疗组大鼠P-HSP27、SNAI1、α-SMAⅠ型和Ⅲ型胶原蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。而单独Ac-SDKP给药组与模型对照组P-HSP27、SNAI1、α-SMA、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达无明显变化，差异均无统计学意义（ P>0.05）。激光共聚焦结果显示，矽肺模型组大鼠肺组织表达P-HSP27和α-SMA的阳性细胞多于模型对照组；与矽肺模型组比较，Ac-SDKP预防和抗纤维化治疗组表达P-HSP27和α-SMA的阳性细胞减少；与模型对照8周组比较，矽肺模型8周组结节中有部分P-HSP27和α-SMA表达的双阳性细胞。 结论:Ac-SDKP可能通过调节P-HSP27/SNAI1通路发挥抗矽肺纤维化的作用。

目的:通过Meta分析研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（Ac-SDKP）对肺纤维化的抗纤维化作用。方法:于2021年5月，检索中国知网、万方数据库、维普、中国生物医学文献数据库、PubMed、OVID数据库，检索时间为2008年1月至2021年5月，筛选关于Ac-SDKP抑制肺纤维化的随机对照试验，其中对照组为肺纤维化模型组，实验组为Ac-SDKP治疗组。采用SYRCLE风险偏倚评估工具进行文献质量评价，并提取数据，采用RevMan5.4软件进行数据分析。结果:纳入文献18篇，总计动物模型428个。Meta分析结果显示：与对照组比较，实验组的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、转化生长因子-β（TGF-β）及结节面积各指标含量均降低[SMD=-2.44，95% CI（-3.71~-1.17）， P=0.000]、[SMD=-5.36, 95% CI（-7.13~-3.59）， P=0.000]、[SMD=-3.07, 95% CI（-4.13~-2.02）； P= 0.000]、[SMD=-2.88, 95% CI（-3.63~-2.14）， P=0.000]、[SMD=-1.80, 95% CI（-2.42~-1.18）， P=0.000] ，羟脯氨酸含量更高[SMD=7.62 ，95% CI（4.90~10.33）， P=0.000]。 结论:Ac-SDKP对肺纤维化进程具有明显的抑制作用，并可能成为治疗肺纤维化的一种新的临床药物。

N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（Ac-SDKP）是由胸腺素β4通过内肽酶-α和脯氨酰寡肽酶连续水解后产生的内源性短肽，具有免疫调节、促进血管生成、肿瘤发生和拮抗器官纤维化的作用。本文根据我们部分研究结果和近年来相关的文献，就Ac-SDKP研究进展进行综述。

尘肺我国常见的、危害严重的职业性疾病,每年新发病例超过2万例.据有关部门统计,2014年职业性尘肺病新增病例26 873例,占2014年职业病报告总例数的89.7％,其中94.2％的病例为煤工尘肺和矽肺[1].由于尘肺病进展呈不可逆性,且发生、发展机制复杂,所以对尘肺病发生机制及其防治的研究,一直是职业病研究领域的难点与热点课题.研究表明,肾素-血管紧张素系统(renin-angiotesin system,RAS)在器官纤维化形成中发挥着重要的调控作用.

目的 研究Ac-SDKP调节p-CREB、p-Smad2/3信号抑制矽肺纤维化的作用.方法 Wistar大鼠随机分为:对照组、矽肺模型组、Ac-SDKP抗纤维化治疗组、Ac-SDKP预防治疗组.Van Gieson染色观察肺组织形态,Western Blot检测α-SMA、cAMP、PKA、p-CREB和p-Smad2/3蛋白表达;免疫荧光检测p-Smad2/3与α-SMA的共表达.结果 矽肺模型组,纤维化病变区域可见胶原沉积,α-SMA、p-Smad2/3蛋白表达明显增多,cAMP、PKA及p-CREB表达显著减少.经Ac-SDKP干预后,cAMP、PKA及p-CREB的表达显著增加,α-SMA、p-Smad2/3的蛋白表达明显降低,肺组织损伤减轻,胶原沉积减少.结论 Ac-SDKP可通过cAMP/PKA/p-CREB信号抑制p-Smad2/3的表达,发挥抑制矽肺纤维化的作用.

目的 探讨Ac-SDKP通过对组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)、热休克蛋白90(HSP90)的调节,抑制大鼠矽肺纤维化的作用机制.方法 非暴露式支气管内灌注法复制大鼠矽肺模型,分为对照4周组、矽肺模型4周组、对照8周组、矽肺模型8周组、Ac-SDKP抗纤维化治疗组和Ac-SDKP预防治疗组.采用转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导原代培养新生大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化,并予以Ac-SDKP和HDAC6特异性抑制剂TCS HDAC620b预处理.采用苏木精-伊红染色法观察病理形态变化,免疫组织化学法、Western blot检测Ⅰ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、HDAC6及HSP90的表达.结果 免疫组织化学法结果显示,HDAC6和HSP90阳性表达主要位于矽结节内,给予Ac-SDKP抗纤维化治疗或预防治疗均能抑制Ⅰ型胶原、α-SMA、HDAC6及HSP90蛋白表达的上调.而TGF-β1能诱导大鼠成纤维细胞 α-SMA阳性表达,同时伴随HDAC6和HSP90蛋白表达上调,而予以TCS HDAC620b或Ac-SDKP预处理均能抑制该变化.结论 Ac-SDKP能够通过对HDAC6和HSP90信号的调节,在体内外抑制矽肺大鼠肌成纤维细胞分化和胶原沉积,从而发挥抗矽肺纤维化的作用.

目的 探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)对肺成纤维细胞分化过程中胞内氯离子通道蛋白4(CLIC4)表达的影响.方法 非暴露式支气管内灌注法制作大鼠矽肺模型,分为对照4周组、矽肺4周组、对照8周组、矽肺8周组、Ac-SDKP抗纤维化治疗组和Ac-SDKP预防治疗组,免疫组化法、Western blot法检测Ⅰ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及CLIC4蛋白的表达.培养新生大鼠肺成纤维细胞,观察转化生长因子(TGF)-β1诱导肺成纤维细胞后Ⅰ型胶原、α-SMA、CLIC4蛋白表达变化,同时观察给予 Ac-SDKP、Smad2/3特异性抑制剂 LY364947、Rock -1特异性抑制剂 Y -27632、ERK1/2特异性抑制剂PD98059、JNK特异性抑制剂SP600125和P38特异性抑制剂SB203580干预后对Ⅰ型胶原、α-SMA、CLIC4蛋白的影响.结果 免疫组织化学染色结果显示矽肺大鼠矽结节内可见CLIC4阳性表达,给予Ac-SDKP抗纤维化治疗或预防治疗均能够抑制Ⅰ型胶原、α-SMA及CLIC4蛋白表达的上调.TGF-β1诱导肺成纤维细胞后CLIC4蛋白表达上调,而给予Ac-SDKP、LY364947、Y-27632或PD98059预处理均能够抑制该变化,SP600125和SB203580预处理后则无改变.结论 Ac-SDKP可能通过作用于TGF-β1介导的CLIC4激活途径,从而发挥抗矽肺纤维化的作用.

目的 体外探讨肝星状细胞(HSC)脯氨酰寡肽酶(POP)的生物学功能,以进一步阐述其在肝脏炎症和纤维化发生发展中的作用.方法 取HSC-T6细胞,经不同浓度的POP抑制剂(S17092)处理,采用ELISA法检测HSC-T6细胞N- 乙酰基- 丝氨酸- 天冬氨酸- 赖氨酸- 脯氨酸(Ac-SDKP)水平,使用流式细胞术和CCK8检测HSC-T6凋亡和增殖水平,采用实时定量-PCR法检测相关炎症和肝纤维化基因转化生长因子-β1(TGF-β1)、α- 平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、Ⅰ型胶原(Col I)水平,采用Western blot法检测相关蛋白(POP、TGF-β1、α-SMA、Smad7、p-Smad2/3、PPAR-γ)表达.结果 与对照组比,POP抑制剂干预组细胞内Ac-SDKP水平显著下降(P<0.05);POP被抑制后对HSC-T6凋亡没有显著的影响(P>0.05),但可抑制其增殖(P<0.05);与对照组比,抑制剂组HSC内α-SMA蛋白表达显著升高(P<0.05),而Smad7和PPAR-γ蛋白表达显著下降(P均<0.05);抑制剂组HSC内MCP-1和α-SMA mRNA水平显著上调(P均<0.05).结论 POP在肝星状细胞内可能发挥重要的抗炎抗纤维化作用,其机制可能与其调节Ac-SDKP及Smad7和PPAR-γ的表达有关.

目的 探讨携带脯氨酰寡肽酶(prolyloligopeptidase,POP)基因的慢病毒转染大鼠肝星状细胞系-T6 (hepatic stellate cellsT6,HSC-T6)对其生物学功能的影响,以揭示其在肝脏炎症与纤维化发生、发展中的作用.方法 采用大鼠HSC-T6作为研究对象,设计合成携带大鼠POP基因的慢病毒,转染HSC-T6;通过ELISA方法检测各组HSC内Ac-SDKP水平;Real-time-PCR法检测各组HSC内相关基因表达量变化(POP、TGF-β1、α-SMA、MCP-1、Col Ⅰ);Western blotting方法检测各组HSC中相关蛋白表达变化(POP、TGF-β1、α-SMA、Smad7、p-Smad2/3、PPAR-γ);CCK-8和流式细胞术检测转染POP对HSC增殖和凋亡的影响.结果 慢病毒能高效感染HSC-T6并表达有活性的POP蛋白,与正常对照组及空病毒组相比,POP慢病毒感染的细胞内Ac-SDKP明显升高,Smad7、PPAR-γ蛋白表达显著升高,而α-SMA表达显著下降;POP慢病毒感染的细胞内MCP-1及α-SMA mRNA表达显著下调;此外,POP可促进HSC-T6增殖生长,而对HSC-T6凋亡无影响.结论 POP在HSC内可能发挥抗炎、抗纤维化作用,其机制可能通过促进Smad7及PPAR-γ的表达,抑制MCP-1及α-SMA的表达而发挥作用.

目的 研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)通过阻断小G蛋白Ras相关的C3肉毒素底物(Rac1)信号,抑制转化生长因子β1(T G F-β1)介导的皮肤肌成纤维细胞转化的机制.方法 原代培养大鼠乳鼠皮肤成纤维细胞,分为空白对照组、TGF-β1诱导组及Ac-SDKP预处理组.划痕实验检测细胞迁移能力,免疫细胞化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Rac1蛋白的表达,Western-blot法检测α-SMA、血清应答因子(SRF)、心肌蛋白相关转录因子(MRTF-A)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)及Rac1蛋白的表达.结果 细胞划痕实验显示,TGF-β1诱导组与空白对照组比较,细胞迁移至中央划痕区的距离明显增大,Ac-SDKP预处理组与TGF-β1诱导组比较,细胞迁移至中央划痕区的距离减小.免疫细胞化学法检测结果显示,TGF-β1诱导组α-SMA和Rac1的阳性表达较空白对照组增强,而Ac-SDKP预处理组可明显抑制α-SMA和Rac1的阳性表达.TGF-β1诱导组的α-SMA,SRF,MRTF-A,ColⅠ及Rac1蛋白表达均较空白对照组明显上调,Ac-SDKP预处理组的蛋白表达较TGF-β1诱导组下降(P<0.05).结论 Ac-SDKP能够阻断Rac1信号,抑制TGF-β1介导的皮肤成纤维细胞迁移能力的提高和肌成纤维细胞转化.