目的:了解罕见致病菌马克斯克鲁维酵母（乳酒念珠菌）临床感染状况和耐药趋势，为临床诊疗提供经验。方法:对上海长海医院皮肤科真菌实验室于1例泌尿系结石患者中段尿标本中分离出的1株马克斯克鲁维酵母菌株进行形态学及分子生物学鉴定，体外微量稀释药物敏感性（简称药敏）试验，扫描电镜观察在不同药物作用下菌株超微结构的破坏情况。回顾性分析上海长海医院2009—2021年马克斯克鲁维酵母菌感染临床病例资料。结果:分离到的菌株沙氏琼脂培养基上形成光滑、柔软、奶酪样酵母菌落，镜下可见卵圆形至细长形孢子。经菌落形态、质谱分析和测序分析鉴定为马克斯克鲁维酵母，药敏试验显示两性霉素B最低抑菌浓度0.5 μg/ml，氟康唑0.5 μg/ml，伊曲康唑0.03 μg/ml，伏立康唑≤ 0.03 μg/ml，泊沙康唑0.06 μg/ml，氟胞嘧啶0.5 μg/ml，卡泊芬净≤ 0.016 μg/ml，米卡芬净0.06 μg/ml。扫描电镜观察到未经药物处理时该菌为卵圆形至细长形，大小（3.0 ~ 6.5） μm × （5.5 ~ 11.0） μm；在1 μg/ml药物作用24 h后，泊沙康唑较两性霉素B和伏立康唑对该菌的破坏作用更强，细胞膜皱缩凹陷更明显。2009—2021年上海长海医院共收集8例马克斯克鲁维酵母感染患者，男6例，女2例，菌株分离自腹水3株、肺泡灌洗液1株、痰液和中段尿各2株。结论:对于可疑马克斯克鲁维酵母感染，应利用多种方法尽早确定致病菌种，并完善菌株收集和药敏试验，有助于临床针对性治疗。

目的:探讨一氧化氮（Nitric Oxide，NO）缓释二氧化硅纳米颗粒（简称NO缓释剂）对内镜生物膜的清除效果及其临床应用评价。方法:选择院内临床使用中的消化内镜160件，随机分为两组：清洗剂组80件，采用清洗剂对内镜进行消毒处理；NO组80件，采用NO缓释剂对内镜进行消毒处理。另建模型组，采用铜绿假单胞菌生物膜模型，用磷酸盐缓冲液（phosphate buffered solution，PBS）处理，作为对照。先在体外层面，构建内镜管腔铜绿假单胞菌生物膜模型，经NO缓释剂处理后采用扫描电镜观察生物膜微结构，采用活菌计数法分析NO缓释剂对生物膜细菌的清除效果，再在临床层面，通过分析清洗后临床内镜的蛋白残留测定、菌落计数及ATP生物荧光检测评价NO缓释剂对内镜的实际消毒效果。结果:扫描电镜观察，模型组生物膜完整，NO组和清洗剂组生物膜表面可见散落杆菌。平均标准菌落数，与模型组［（4.86±2.67）×10 6菌落形成单位（colony-forming units，CFU）/mL］比，NO组［（1.37±0.61）×10 4CFU/mL］和清洗剂组［（1.31±0.21）×10 5CFU/mL］均显著降低（清洗剂组比模型组， P=0.009；NO组比模型组， P=0.008），且NO组比清洗剂组更低，组间差异有统计学意义（清洗剂组比NO组， t=9.53， P=0.000 6）。临床消化内镜层面，残留蛋白，NO组处理前后分别为（8.03±1.47）mg/mL、（0.50±0.37）mg/mL，清洗剂组处理前后分别为（8.01±1.51）mg/mL、（0.91±0.52）mg/mL，各组处理前后比较差异有统计学意义（ P<0.01），且NO组降低幅度更大。临床内镜分别经NO缓释剂与清洗剂处理，NO组与清洗剂组的消毒在合格范围内，但NO组的ATP生物荧光值［（78.56±42.59）RLU］、蛋白残留量［（0.50±0.37）mg/mL］与菌落计数量［（7.55±4.56）CFU］均显著低于清洗剂组［（120.80±54.00）RLU，（0.91±0.52）mg/mL，（11.50±4.75）CFU］，差异均有统计学意义（ P均<0.01）。 结论:NO缓释剂能够有效清除内镜生物膜，提高内镜消毒效果，可能对改善患者的诊疗效果及预后具有重要意义。

目的：:观察局部应用螺旋藻多糖提取物（PSP）对大白兔金黄色葡萄球菌性角膜炎的治疗效果。方法：:实验研究。从钝顶螺旋藻干粉中提取PSP，并制备0.01% PSP滴眼液。在45只大白兔右眼角膜中央采用基质注射针基质注射5 μl金黄色葡萄球菌菌液[（ATCC25923，约100个菌落形成单位（CFU）]，构建兔金黄色葡萄球菌性角膜炎模型。角膜基质注射菌液8 h后，将兔随机分成基底对照组、0.9%氯化钠溶液组和PSP组3组，每组15只。0.9%氯化钠溶液组和PSP组分别给予0.9%氯化钠溶液或PSP点眼给药，每15 min点眼1次，持续点眼5次后，改为每30 min点眼1次，持续点眼14次，最后1次点眼后1 h，角膜荧光素钠染色，裂隙灯显微镜下观察兔实验眼角膜上皮缺损情况并给予临床评分，角膜取材后对CFU进行测定；每组随机取3只眼球进行组织病理学观察，采用实时定量PCR检测角膜中炎症因子的表达。组间数据比较采用独立样本 t检验。 结果：:0.9%氯化钠溶液组角膜上皮缺损严重，PSP组角膜上皮缺损较少。与0.9%氯化钠溶液组相比，PSP组临床指标评分明显降低，差异有统计学意义（ t=5.293， P<0.001）。与0.9%氯化钠溶液组相比，PSP组的CFU明显减少，差异有统计学意义（ t=4.383， P<0.001）。组织病理学结果显示0.9%氯化钠溶液组有明显的炎症细胞浸润；PSP组与0.9%氯化钠溶液组相比，眼部结构相对良好，炎细胞浸润较少。实时定量PCR结果显示PSP组角膜组织中炎症因子白细胞介素-6、白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α的表达明显低于0.9%氯化钠溶液组。 结论：:0.01% PSP滴眼液能明显降低金黄色葡萄球菌性角膜炎病变的严重程度和角膜细菌载量，提示PSP对金黄色葡萄球菌性角膜炎可能具有潜在的治疗价值。

为探讨疫苗候选抗原—结核分枝杆菌肝素结合血凝素（HBHA）通过黏膜接种诱导的保护性免疫效应。动物实验均使用6~8周龄雌性C57BL/6小鼠。30只小鼠接受不同的免疫接种策略，采用随机数字表法分为对照组、早期分泌抗原靶蛋白-6（ESAT-6）滴鼻组、HBHA滴鼻组、BCG初免PBS对照组、BCG初免HBHA加强组，每组6只。通过检测免疫后小鼠血浆白细胞介素17A（IL-17A）等细胞因子水平；肺IL-17A mRNA相对表达量（RQ）；肺三级淋巴结构的形成，及与其形成相关的趋化因子的检测；脾Th1、Th17细胞比例比较，从而分析免疫效应。BCG初免PBS对照组和BCG初免HBHA加强组（每组各30只小鼠），用BCG滴鼻模拟感染。在感染后预设的时间点做肺组织菌落计数，以评估细菌清除效率。多组间比较采用单因素方差分析，事后分析采用 LSD检验；两组间比较采用独立样本 t检验。结果显示，免疫后的小鼠血浆细胞因子IL-17A水平和肺IL-17A mRNA相对表达量，在BCG初免HBHA加强组［（14.76±4.73）pg/mL，RQ 为（12.27±6.71）］中最高，比对照组［（5.57±2.95）pg/mL，RQ为（1.30±0.97）］明显升高（ t=4.213， P<0.001； t=5.984， P<0.001），也显著高于BCG初免PBS对照组［（6.81±2.18）pg/mL，RQ 为（1.44±1.16）］（ t=3.646 P=0.001； t=6.185 P<0.001）。脾脏Th17细胞比例，与BCG初免PBS对照组（0.38±0.38）%比较，BCG初免HBHA加强组（1.02±0.34）%显著增高（ t=-0.280， P=0.048），该组在肺部诱导形成了三级淋巴结构，并在感染的早期降低了肺细菌负荷。综上，HBHA通过黏膜递送可有效增强BCG接种后的免疫保护效应，可能是一种有潜力的候选疫苗组分。

慢性骨髓炎主要由金黄色葡萄球菌引起，是一种以反复发作的窦道流脓、慢性胀痛和骨质破坏为特征的严重感染性疾病。该疾病的治疗面临着高复发率和致残率的挑战，给患者带来巨大的身体和经济负担，现已成为亟待解决的全球性重大健康问题。近年来，随着医疗技术和微生物学的发展，关于慢性骨髓炎迁延难愈的病理机制相关研究不断深入。骨陷窝网络结构的入侵和小菌落变体表型转变的致病机制逐渐被揭示，为解释其治疗的复杂性提供了新视角。这一发现继细菌耐药、生物膜形成和胞内感染等机制之后，成为理解该疾病的新突破。本文综述了这些机制对慢性骨髓炎治疗挑战的影响，并探讨了最新的治疗前景。

目的:了解广州地区腹泻患儿感染非伤寒沙门菌(NTS)的流行病学特征和临床表现，为我国儿童NTS感染的防治提供依据。方法:2019年1月至12月在广州市妇女儿童医疗中心的3个院区利用分层抽样收集腹泻患儿粪便标本570份，非腹泻儿童粪便标本296份，通过细菌培养，挑取相应菌落使用沙门菌诊断血清进行初步血清诊断，再用系统生化法进行确诊，同时使用结构化问卷收集研究对象基本信息。结果:腹泻患儿组NTS检出率为6.67%(38/570例，95% CI：4.90%～9.02%)，非腹泻儿童组NTS检出率为1.01%(3/296例，95% CI：0.34%～2.93%)，2组NTS检出率比较差异有统计学意义( χ2＝13.805， P<0.05； OR＝6.976，95% CI：2.135～22.796)；男、女腹泻患儿NTS检出率比较差异无统计学意义( χ2＝0.395， P>0.05； OR＝1.254，95% CI：0.619～2.541)；NTS检出率在<2岁儿童中为5.30%(22/416例，95% CI：3.52%～7.88%)，在>2岁儿童组中为10.40%(16/154例，95% CI：6.50%～15.21%)，2组NTS检出率比较差异有统计学意义( χ2＝4.700， P<0.05； OR＝2.076，95% CI：1.060～4.068)；NTS检出率在门诊腹泻患儿中为5.40%(25/460例，95% CI：3.70%～7.89%)，在住院腹泻患儿中为11.80%(13/110例，95% CI：7.04 %～19.18%)，2组NTS检出率比较差异有统计学意义( χ2＝5.813， P<0.05； OR＝2.332，95% CI：1.152～4.721)；NTS腹泻患儿检出率在春季为4.60%(10/217例，95% CI：2.52%～8.28%)，在夏季为8.50%(12/141例，95% CI：4.93%～14.29%)，在秋季为9.60%(15/144例，95% CI：6.41%～16.48%)，在冬季为1.50%(1/168例，95% CI：0.11%～3.30%)，不同季节NTS检出率比较差异有统计学意义( χ2＝9.404， P<0.05)。NTS检出阳性与阴性的患儿临床出现发热、呕吐、腹痛、血便和糊状便的发生率比较差异均有统计学意义(均 P<0.05)。NTS分型以肠炎沙门菌为主，其次为鼠伤寒沙门菌。 结论:NTS是广州地区引起儿童腹泻的重要细菌性病原体之一，男女感染率无差异，2岁以上儿童多发，秋季高发，容易出现发热、呕吐、腹痛、血便和糊状便的临床表现。NTS分型以肠炎沙门菌为主，其次为鼠伤寒沙门菌。实验室检测可为NTS相关腹泻的诊治提供参考。

本研究使用生物膜发生器法建立体外铜绿假单胞菌生物膜实验模型，评价2种流经杀菌树脂的水对铜绿假单胞菌生物膜清除效果，探讨低浓度消毒因子持续处理对口腔综合治疗台水路消毒的有效性。实验组选择消毒因子浓度为1~2 mg/L的聚碘树脂（iodinated resin，IR）滤过水、溴代聚苯乙烯海因树脂（简称：溴代海因树脂，bromined hydantoin resin，BHR）滤过水，对照组选择无菌蒸馏水，使用浸泡法持续处理生物膜片，处理时间为3、7、10、20、40 d。应用生物膜菌落总数计数法（total viable count，TVC）及激光共聚焦显微镜观察法（confocal laser scanning microscopy，CLSM）对生物膜的清除效果进行评价。结果显示，（1）TVC：IR组处理3、7、10、20 d后及BHR组处理3、7、10 d后，细菌清除率均低于99.9%，判定为消毒不合格；IR组处理40 d后及BHR组处理20、40 d后，细菌清除率分别达99.95%、99.99%、100.00%，消毒合格。（2）CLSM观察：处理前铜绿假单胞菌生物膜片呈片状、团块状分布，生物膜细菌覆盖率为19.24%±1.97%，活细菌比例为93.91%±1.39%，生物膜基质覆盖率为17.69%±1.11%。处理20 d后，IR组可见生物膜减少，但仍有基质残留，生物膜细菌覆盖率为6.77%±1.61%，活细菌比例为54.85%±5.65%，生物膜基质覆盖率为2.41%±0.85%，与处理前及对照组比较，差异均有统计学意义（ F=359.996， P<0.001）；BHR组未见生物膜样结构。处理40 d后，IR组仍存有少量生物膜基质残留，生物膜基质覆盖率为0.67%±0.47%，与处理前及对照组相比，差异有统计学意义（ F=1 021.373， P<0.001），未见生物膜细菌覆盖；BHR组未见生物膜样结构。综上，BHR滤过水持续浸泡法在清除生物膜活、死细菌及生物膜基质方面更具优势，含相应低浓度消毒因子的诊疗用水在口腔综合治疗台水路系统生物膜控制领域可发挥重要作用。

目的:探讨碘伏对金黄色葡萄球菌生物膜(BBF)的抗菌作用。方法:体外培养金黄色葡萄球菌，选取480枚钛合金板，分别在钛板表面建立7，14，21，28 d金黄色葡萄球菌生物膜体外模型，每个时相点120枚。再将每个时相点生物膜按随机数字表法分为无碘伏浸泡组(PBS组)、碘伏浸泡5 min组(5 min组)和碘伏浸泡10 min组(10 min组)。PBS组分别采用异硫氰酸荧光素标记的刀豆蛋白(FITC-ConA)与碘化丙啶(PI)、PI与SYT09染料将金黄色葡萄球菌染色，染色后使用激光共聚焦显微镜和扫描电镜观察细菌生物膜的形态结构，并采用活菌计数法(CFU计数)清点菌落数；5 min组、10 min组采用PI和SYT09染色，染色后使用激光共聚焦显微镜观察碘伏浸泡后的生物膜变化及细菌活力，采用活菌计数法评估碘伏的抗菌效果。结果:PBS组采用FITC-ConA和PI染色后，通过激光共聚焦显微镜观察可见，随着培养时间的延长，细菌胞外多聚物逐渐增多，生物膜空间结构逐渐成熟，到21 d时生物膜空间结构变化明显，28 d时成熟；PI和SYT09染色后通过激光共聚焦显微镜观察可见细菌数量增多，外形呈山峰状。扫描电镜观察可见，随着培养时间的延长，细菌胞外多聚物逐渐增多，形成了结构化的微环境并逐渐成熟。5 min组、10 min组中培养7 d[0(0，0)CFU/ml]及14 d[0(0，0)CFU/ml]时细菌被全部杀灭，21 d时5 min组及10 min组抗菌作用均减弱，但10 min组[100(100，125)CFU/ml]较5 min组[300(275，425)CFU/ml]的抗菌效果好( P<0.05)，28 d时碘伏浸泡5 min组[500(375，700)CFU/ml]和10 min组[250(175，400)CFU/ml]的抗菌效果差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:生物膜的成熟是细菌和胞外多聚物的整体成熟并形成空间化的微环境，生物膜以21 d为界分成年轻生物膜和成熟生物膜，二者的主要区别在于胞外多聚物及微环境的成熟；对于培养时间≤21 d的细菌生物膜，碘伏浸泡10 min较5 min抗菌效果好，而对培养时间>21 d的细菌生物膜延长碘伏浸泡时间对于抗菌效果没有明显差别。

目的:探究miR-125b在凋亡相关蛋白(Fas)/凋亡相关蛋白配体(FasL)信号介导胃癌细胞生长中的调控作用。方法:体外培养胃癌SGC-7901细胞，将miR-125b inhibitor序列、NC序列、转染试剂分别转染至SGC-7901细胞中，分为miR-125b抑制组、NC组、Control组。用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测转染后细胞miR-125b表达，CCK-8法检测细胞增殖情况；平板细胞克隆形成实验检测菌落形成情况；流式细胞术检测细胞凋亡以及周期情况；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Fas、FasL的蛋白表达；荧光素酶活性测定检测miR-125b对Fas的靶向调控作用。结果:miR-125b抑制组细胞miR-125b表达水平及细胞菌落形成数量显著低于Control组、NC组，细胞增殖抑制率、凋亡率显著高于Control组、NC组(均 P<0.05)。miR-125b抑制组G 1期DNA含量显著高于Control组、NC组，S期细胞DNA含量显著低于Control组、NC组(均 P<0.05)。miR-125b抑制组Fas、FasL蛋白表达显著高于Control组、NC组(均 P<0.05)。Fas mRNA的3′-UTR中存在miR-125b的靶位点，与NC+Fas 3′UTR-Wt组相比，miR-125b抑制组+Fas 3′-UTR-Wt组荧光素酶活性显著降低( P<0.05)。 结论:抑制miR-125b表达后可激活Fas/FasL信号进而抑制SGC-7901细胞增殖，引起细胞周期G 1期阻滞，促进其凋亡。

目的:探索使用网络药理学方法和动物实验研究黄连治疗龋齿的作用机制。方法:通过中药系统药理学（TCMSP）数据库与分析平台筛选出黄连有效成分及其靶点，并通过GeneCards数据库在线检索疾病靶点。在Venny 2.1网站筛选出黄连和龋齿的交集靶点，并将交集靶点在线进行蛋白-蛋白相互作用分析和基因本体（GO）及京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。然后，使用Cytoscape制作"成分-靶点-通路"网络图。将大鼠随机分为模型组和黄连组，建立龋齿大鼠模型。模型组大鼠用浸有150 μl 0.9%氯化钠溶液小棉球反复涂擦大鼠磨牙各面5 min，黄连组大鼠将浸有黄连（5.8 mg黄连融入150 μl 0.9%氯化钠溶液）的小棉球反复涂擦大鼠磨牙各面5 min。2组大鼠每周处理1次，连续处理4周。对变异链球菌菌落数进行计数，并采用酶联免疫法检测血清丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1（AKT1）、JUN、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子（TNF）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）蛋白表达。结果:黄连中有11个有效成分，通过干预54个靶点，调节多个分子通路，从而治疗龋齿。槲皮素、小檗碱、黄藤素、小檗浸碱和四氢小檗碱等是核心成分，AKT1、JUN、IL-6、TNF、Bcl-2为核心靶点。GO分析显示，BP主要包括细胞因子活性、信号受体激活剂活性、信号受体调节剂活性、细胞因子受体结合和受体配体活性等；CC主要包括对脂多糖的反应、对细菌分子的反应、细胞对脂质的反应、炎症反应和细胞群体增殖负调控等；MF主要包括膜筏、膜微区、细胞外基质、外部封装结构和质膜蛋白复合物等。KEGG分析显示晚期糖基化终末产物-晚期糖基化终末产物受体（AGE-RAGE）、TNF、IL-17、Toll样受体、缺氧诱导因子-1（HIF-1）、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、核因子-κB（NF-κB）、表皮生长因子受体（EGFR）、Janus激酶-信号转导子与转录激活子（JAK-STAT）、磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B（PI3K-Akt）等信号通路与黄连治疗龋齿相关。动物实验结果显示，黄连治疗后血清Bcl-2蛋白表达增加，血清AKT1、JUN、IL-6、TNF等蛋白表达减少。结论:黄连可以通过多种通路参与调控龋齿的靶点，具有良好的治疗效果和广泛的作用机制，有望成为开发治疗龋齿的中成药的重要组分。