目的:分析儿童血液感染（BSI）金黄色葡萄球菌（SA）分离株的分子特征、毒力基因及耐药性，以进一步了解血流感染患儿分离SA的分子流行病学特征。方法:收集2016—2021年上海市儿童医院临床血流感染患者的53株SA，采用仪器法和纸片法检测细菌药物敏感性，采用聚合酶链反应技术检测SA的32种毒力基因；并进行多位点序列分型、葡萄球菌蛋白A（spa）分型及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）菌株的葡萄球菌盒式染色体（SCCmec）分型。计数资料采用χ2检验或Fisher确切检验进行统计学分析。结果:53株SA菌株中，MRSA分离率达50.94%（27/53），ST398-t034-SCCmecⅤ（6/27，22.22%）和ST59-t437-SCCmecⅣ（4/27，14.81%）是MRSA分离株最常见的克隆型；甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌（MSSA）分离率达49.06%（26/53），以ST22-t309（3/26，11.54%）和ST7-t091/t1685（各2/26，7.69%）为流行分型。53株SA均携带≥6个毒力基因，33株菌株（62.26%）携带≥10个毒力基因，其中18株MSSA（69.23%）和15株MRSA（55.56%）， pvl基因在MSSA的携带率高于MRSA（12/26，33.33%比6/27，22.22%；χ2=3.382， P=0.065）， sasX仅在MRSA中检出（4/53，7.55%）。53株SA对青霉素、红霉素和克林霉素耐药率分别为98.11%、49.06%和41.51%，MRSA对常用抗菌药物的耐药率普遍高于MSSA。 结论:儿童血流感染MRSA分离率较高，ST398-t034和ST59-t437是其最常见的克隆型。儿童BSI-SA毒力基因携带率较高，毒力基因 pvl在MSSA中的携带率高于MRSA， sasX仅在MRSA中检出。儿童BSI-SA的耐药现状及毒力基因特征应引起临床重视。

目的 比较社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)与医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)的分子分型、毒力基因及耐药基因.方法 选取2019年1月至2020年12月绍兴市人民医院收治的34例门诊及住院患者,共分离获得耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)34株,其中CA-MRSA 7株(占20.6％),HA-MRSA 27株(占79.4％).采用头孢西丁纸片扩散法进行药敏试验,全基因组测序法进行分子分型[包括葡萄球菌mec盒式染色体(SCCmec)分型、葡萄球菌A蛋白(spa)分型、多位点基因序列类型(MLST)分型]、毒力基因及耐药基因检测.结果 CA-MRSA对庆大霉素、左氧氟沙星、利福平、磷霉素、四环素均敏感,对复方新诺明的敏感率为85.7％;HA-MRSA对庆大霉素、利福平、复方新诺明、四环素的敏感率均在80％以上.两种不同来源菌株对各种常用抗菌药物敏感率以及SCCmec、spa、MLST分型比例比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05).CA-MRSA的lukF-PV、lukS-PV检出率均明显高于HA-MRSA菌株(均P＜0.05),sea检出率明显低于CA-MRSA菌株(P＜0.05).HA-MRSA的环丙沙星耐药基因gyrA检出率明显高于CA-MRSA菌株,差异有统计学意义(P＜0.05).CA-MRSA同时携带1～6种抗菌药物耐药基因,头孢西丁-青霉素-克林霉素-红霉素为优势耐药谱;HA-MRSA同时携带1～9种抗菌药物耐药基因,头孢西丁-青霉素-克林霉素-红霉素、阿米卡星-妥布霉素-头孢西丁-青霉素-环丙沙星-克林霉素-红霉素和庆大霉素-阿米卡星-妥布霉素-头孢西丁-青霉素-环丙沙星-四环素-克林霉素-红霉素为优势耐药谱.结论 本院CA-MRSA分离率较高,其携带毒力基因lukF-PV、lukS-PV的比例高于HA-MRSA.

目的 探讨骨科创伤患者伤口分离的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)的分子特征及耐药性,分析患者伤口 SA的分子分型、毒力基因及耐药性,为防治患者伤口 SA感染提供参考依据.方法 选取2020年1月—2022年6月苏州大学附属无锡九院128例骨科创伤患者伤口分离的SA,采用PCR鉴别耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin-susceptible Staphylococ-cus aureus,MSSA),再分析多位点序列(Multilocus Sequence Typing,MLST)、金黄色葡萄球菌 A蛋白(Staphylococcal pro-tein A,spa)、葡萄球菌盒式染色体(staphylococcal chromosomal cassette mec,SCCmec)、附属调节基因(accessory gene regu-latory,agr)的分子分型及毒力基因、耐药性.结果 分离的128株SA中,MRSA有76株(59.38％),MSSA有52株(40.62％).MRSA 分型显示,MLST 以 ST59 为主(60.53％),spa以t437为主(52.63％),SCCmec以 Ⅰ、Ⅳ型为主(42.11％,39.47％);MSSA 分型显示,MLST 以 ST188 为主(30.77％),spa以t189为主(61.54％),agr以 Ⅰ 型为主(53.85％);MLST 分型中,MRSA 的 ST59 型高于 MSSA,MRSA 的 ST188、ST6 型低于 MSSA(x2=36.207,20.227,9.984,P＜0.05);spa 分型中,MRSA的t437型高于MSSA,MRSA的t189型低于MSSA(x2=18.276,32.781,P＜0.05).毒力基因显示,MRSA的hlb、seb携带率高于MSSA(x2=47.838,10.261,P＜0.05),MRSA的cna、ebpS携带率低于MSSA(x2=26.176,8.305,P＜0.05).药敏试验显示,MRSA、MSSA对万古霉素、利奈唑胺的耐药率均为0;MRSA对苯唑西林、红霉素、克林霉素的耐药率分别为86.84％、68.42％、76.32％,高于 MSSA 的 7.69％、42.31％、46.15％(x2=78.055,8.623,12.200,P＜0.05).多重耐药菌株(multi-drug resistant strains,MDR)分析显示,76株MRSA 均为 MDR菌株,52株MSSA 中有 12株(23.08％)为 MDR菌株.结论 骨科创伤患者伤口 SA的分子特征主要为ST59-t437-SCCmec Ⅰ/Ⅳ的MRSA菌株和ST188/ST6-t189-agr Ⅰ的MSSA菌株,对苯唑西林、红霉素、克林霉素有较高的耐药性,对万古霉素、利奈唑胺有较高的敏感性,与毒力基因携带情况密切相关,临床需重视MSSA存在的MDR,应依据SA的分子特征及耐药性制定合适的抗菌策略.

目的 研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性及其基因分型.方法 收集某院2014年1月—2015年11月检出的非重复金黄色葡萄球菌967株,检测其药敏结果及m ecA抗性基因、杀白细胞素(PVL)基因;MRSA菌株经多重PCR进行葡萄球菌盒式染色体mec(SCC m ec)分型、多位点序列分型(MLST)、金黄色葡萄球菌蛋白A基因(spa)分型、金黄色葡萄球菌附属因子调节子(agr)分型.结果 967株金黄色葡萄球菌共检出210株 MRSA,MRSA检出率为21.72%;痰标本 MRSA 检出率高于皮肤软组织标本(68.09% vs 11.83%,P<0.05);金黄色葡萄球菌中未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药菌株,MRSA对庆大霉素、四环素、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、呋喃妥因、利福平的敏感率均低于 MSSA,差异均有统计学意义(均P<0.05);MRSA对复方磺胺甲口恶唑的敏感率高于 MSSA,差异有统计学意义(P<0.05).皮肤软组织分离的 MRSA对庆大霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、利福平的敏感率为86.90% ~95.24%,而痰分离的 MRSA仅为1.56% ~15.63%.967 株金黄色葡萄球菌检测出210 株携带m ecA基因,10 株携带PVL基因,210 株MRSA 中有8 株未分型,占3.81%.MLST主要以ST 239(177株)为主;SCCmec分型主要以Ⅲ型(177株)为主;spa 分型主要以 t 030 (177株)为主;agr分型主要以Ⅰ型(196株)为主.结论 该院 MRSA 菌株主要流行克隆 ST239-MRSA-SCCmecⅢ-t030,耐药形势严峻,应加强医院内耐药菌株的监测.

目的 了解滨州医学院附属医院MRSA菌株多位点序列分型(MLST)联合SCCmec基因型分布和各种基因型的耐药特征.方法 采用聚合酶链反应(PCR)对MRSA菌株进行MLST联合SCCmec基因分型;采用WalkWAY96PLUS PC33药敏板检测MRSA抗菌药物敏感性.结果 SCCmec基因分型结果以Ⅲ型为主(63/67株,占94.03%),MLST分型共检测出6种基因型:ST 88、ST 121、ST 221、ST 82、ST 239及ST 399,其中以ST 239(61/67,91.04%)为主,耐药性分析显示SCCmec Ⅲ型MRSA菌株表现为多重耐药.结论 ST239-MRSA-SCCmec Ⅲ型菌株为鲁北地区MRSA主要流行菌株,该型菌株对多种抗生素呈多重耐药;MLST联合SCCmec基因分型方法是MRSA遗传背景研究简便快速的方法.

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种常见的人兽共患病病原菌,其分泌的外毒素如溶血素、杀白细胞素、脱皮毒素、肠毒素等可引发人或养殖动物多种疾病.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)是携带含mec基因簇的葡萄球菌盒氏染色体(Staphylococcal chromosome cassette mec,SCCmec)遗传元件的多重耐药菌.SCCmec对MRSA的多重耐药性起重要作用.SCCmec元件中mecA基因介导了MRSA对β-内酰胺类药物的耐药性,而SCCmec元件的可变区插入的耐药基因对MRSA的多重耐药性具有重要作用.近年来,欧洲、北美等国家陆续报道在养殖业环境及动物中检测到多重耐药的养殖源MRSA(Livestock-associated MRSA,LA-MRSA),且LA-MRSA可以通过养殖环境等途径传播到人,对人的健康和公共卫生安全构成潜在威胁.本文综述了S.aureus的耐药性变化、MRSA的SCCmec耐药元件和SCCmec型别变迁以及LA-MRSA的毒力危害和流行状况,对了解S.aureus耐药性和SCCmec分型以及控制和预防LA-MRSA在人兽间传播、感染具有一定的指导意义.

目的 明确我国儿童皮肤软组织感染(skin and soft tissue infections,SSTIs)社区相关性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(community-associated Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,CA-MRSA)的分子生物学特征.方法 收集我国13家儿童医院皮肤科门诊SSTIs来源的CA-MRSA,进行多位点基因分型(MLST)、葡萄球菌A蛋白序列(spa)分型及葡萄球菌盒式染色体(SCCmec)分型,同时进行杀白细胞毒素(Panton-Valentine Leukocidin,pvl)基因检测.结果 1 705株金黄色葡萄球菌来自SSTIs患儿,临床共分离CA-MRSA 44株,分离率仅为2.6％(44/1 705株).44株CA-MRSA共检测到2种SCCmec分型,为SCCmecⅣ和SCCmecⅤ型,分别占45.5％(20/44株)和54.5％(24/44株);13个MLST型别中,最主要的MLST型别是ST121(18/44株,40.9％),其次是ST59(9/44株,20.5％);15种spa型别中,最主要的spa型别是t437(18/44株,40.9％).ST121菌株有8种spa型别,以t2086最常见(6/18株,33.3％),而ST59仅有1种spa型别,即t437.华中与华东地区未见ST121、ST59和t437菌株型别.44株CA-MRSA中vl阳性率为9.1％(4/44株),均来自南部地区.结论 儿童SSTIs来源CA-MRSA最常见的克隆是MRSA-ST121-SCCmecⅣ/Ⅴ,CA-MRSA菌株分子流行病学已经发生变化,ST121已取代ST59成为目前主要流行株型别.

目的 了解新生儿金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)感染致病株分子特征,为防治提供参考依据.方法 收集北京儿童医院2016年2月至2017年1月新生儿金葡菌感染病例临床信息,并检测分离株分子生物学特征,采用头孢西丁纸片法及PCR法扩增mecA鉴定甲氧西林耐药金葡菌( methicil-lin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和甲氧西林敏感金葡菌( methicillin-susceptible Staphylococcus aureus,MSSA),对所有分离株进行多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)、葡萄球菌 A 蛋白(spa)基因分型和agr分型分析,MRSA葡萄球菌盒式染色体( SCCmec)基因分型,采用PCR法检测11种黏附基因和3种毒力基因(pvl、psma 、hlα),琼脂稀释法或E-TEST法检测菌株对12种抗生素药物敏感性.结果 研究期间共收集到57 例新生儿金葡菌感染病例,最常见临床诊断为肺炎38 例(66. 7%),皮肤感染综合征( skin and soft tissue infections,SSTIs) 28 例(49. 1%). MRSA 感染31 例(54. 4%),MSSA感染 26 例( 45. 6%). MRSA 组 SSTIs 比例( 64. 5%)和 2 个以上部位感染比例(61. 3%,19/31)显著高于 MSSA 组( 30. 8%,8/26 和 23. 1%,6/31 ). 57 株金葡菌共检测出 16 种MLST型和29种spa型,分别以ST59(40. 4%)和 t437(33. 3%)最常见. MRSA和MSSA最常见的流行克隆分别是 ST59-SCCmecIVa-t437 ( 54. 8%)和 ST22-t309 ( 11. 5%). MRSA 的 sdrE 携带率高于MSSA,而sdrD、cna携带率低于MSSA (P<0. 05),其他黏附和毒力基因携带率在两种菌株间无明显差异.所有菌株的多重耐药率为61. 4%(35/57),除内酰胺类抗生素外,MRSA和MSSA最常见的耐药表型均为ERY-CLI,所占比例分别为74. 2%和26. 9%.结论 我院新生儿金葡菌感染类型主要是肺炎和SSTIs,MRSA感染者SSTIs和多部位感染更为多见. MRSA和MSSA分离株均有克隆播散特征,最常见克隆分别是ST59-SCCmecIVa-t437和ST22-t309,携带毒力因子状况无明显差异.新生儿金葡菌分离株的多重耐药率较高.

目的:分析分离自住院患者的社区获得耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(community-associated methicillin re-sistant Staphylococcus aureus,CA-MRSA)菌株的分子水平特征和耐药性,为监测CA-MRSA的流行及治疗、控制提供依据.方法:收集2014年4月到2015年12月期间从住院患者标本(入院后48 h内获取)中分离的金黄色葡萄球菌,检测其mecA基因以区分耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)与甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(methicillin sensitive Staphylococcus aureus,MSSA),并根据葡萄球菌盒式染色体基因mec(Staphylococcal cassette chromosome mec,SCCmec)的携带情况,筛选CA-MRSA基因型菌株.采用金黄色葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal protein A,SPA)基因分型、多位点序列分型(multilocus-sequence typing,MLST)等方法分析CA-MRSA菌株的分子水平特征;根据美国临床和实验室标准研究所(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)指南,采用纸片扩散法检测CA-MRSA菌株的药物敏感性,并对CA-MRSA菌株是否携带杀白细胞素基因(panton-valen-tine leukocidin gene,pvl基因)进行检测.结果:共收集到147株金黄色葡萄球菌,其中MRSA 58株,根据SCCmec分型结果,共有9株CA-MRSA,包括SCCmecⅣ3株、SCCmecⅤ6株.9株CA-MRSA菌株对多种非β-内酰胺类抗生素耐药,其中有8株对红霉素和克林霉素耐药,主要是由红霉素核糖体甲基化酶(erythromycin ribosomal methylase,erm)(B)基因介导;有8株对氨基糖苷类药物(主要为卡那霉素)耐药.对9株CA-MRSA菌株进行分子流行病学特征分析后发现,CA-MRSA主要以t437-ST59克隆为主,其他还有t034-ST804、t127-ST1、t008-ST8、t437-ST338等克隆;9株CA-MRSA菌株中,有5株携带毒力基因pvl.结论:致病性较强的CA-MRSA菌株逐渐进入医疗环境中,且对非β-内酰胺类药物的耐药性也逐渐增加,应加强对住院患者CA-MRSA分离株的监控.

目的 研究金黄色葡萄球菌附属基因调节子(agr)功能缺陷金黄色葡萄球菌的流行及遗传学特征.方法 收集上海市和浙江省5家医院临床分离的1238株金黄色葡萄球菌,采用头孢西丁纸片法确定其对甲氧西林的耐药性;采用δ溶血活性检测筛选agr功能缺陷菌株,应用agr分型、葡萄球菌盒式染色体mec(SCCmec)分型、金黄色葡萄球菌蛋白A基因(spa)分型和多位点序列分型(MLST)确定相关菌株的分子特征.结果 agr功能缺陷金黄色葡萄球菌总流行率为3.6％(45/1238),其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率[5.0％(28/565)]显著高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)[2.5％(17/673)](P=0.023).基因分型结果显示,agr功能缺陷MRSA以ST5(CC5)-SCCmecⅡ-t002/t311/t2460-agr2和ST239(CC8)-SCCmecⅢ-t037-agr1为主,而MSSA主要为ST188(CC1)-t189-agr1.结论 沪浙地区agr功能缺陷金黄色葡萄球菌并不常见,其流行可能与特定型别克隆株的传播有关.