目的:评价晚蚕沙外敷治疗寒凝血瘀型糖尿病周围神经病变(DPN)的临床效果。方法:将60例寒凝血瘀型DPN患者随机分为试验组和对照组，每组30例。两组患者均给予甲钴胺基础治疗，试验组在此基础上加用晚蚕沙外敷治疗，疗程均为4周，比较治疗前后两组患者肱踝指数(ABI)和足部震动感觉阈值(VPT)的改善情况。结果:两组患者治疗后左、右侧ABI值均较治疗前上升，治疗后VPT值均较治疗前下降；治疗后试验组左、右侧ABI较对照组上升( t＝6.690、8.355，均 P＝0.000)，治疗后试验组较对照组VPT值降低( t＝6.447、6.734，均 P＝0.000)。 结果:晚蚕沙外敷治疗寒凝血瘀型DPN能在ABI、VPT方面获益，且具有较好的安全性，值得临床推广。

目的 比较蚕沙发酵肥在发酵前后的微生物结构变化,阐明蚕沙发酵肥的微生物多样性.方法 蚕沙发酵肥由基底土和蚕沙按一定比例混合后发酵30 d而来,因此实验共分为4个处理组,分别为基底土组、蚕沙组、蚕沙发酵肥30 d组和蚕沙发酵肥90 d组.分别采集基底土、蚕沙以及发酵30 d后的蚕沙发酵肥进行MiSeq高通量测序,比较蚕沙发酵肥与发酵前的基底土、蚕沙之间的细菌多样性变化,并采集发酵90 d的蚕沙发酵肥进行测序,比较不同发酵时间对发酵肥细菌多样性的影响.结果 蚕沙发酵肥30 d组的细菌多样性指数最高,蚕沙最低,说明蚕沙在与基底土混合发酵后细菌多样性水平升高.β多样性结果显示蚕沙发酵肥的稳定性好,且发酵肥与蚕沙的近缘关系较与土壤的更近.比较优势菌属发现,蚕沙发酵肥30 d组有10种优势菌属,分别为Sphingobacterium、Parapedobacter、Ochrobactrum、Fla vobacterium、Bordetella、Brucella、Rhizobium、Olivibacter、Devosia和Paracoccus;发酵肥90 d组中的优势菌属有70％与30 d组相同;蚕沙组中仅有5种优势菌属,分别为Para pedobacter、Bacillus、Pseudomonas、Fla voba cterium和Sphingobacterium, 其中Parapedobacter、Flavobacterium和Sphingobacterium也为发酵肥30 d组的优势菌属;基底土的优势菌属大部分为酸杆菌门,分别为Gpl、Gp2、Gp3、Bradyrhizobium、Rhizomicrobium和Rhodoplanes,它们在经发酵后含量大大下降.蚕沙发酵肥中的大部分优势菌属均为具有生防作用的生防菌,其中部分优势菌属也存在于施用了发酵肥的连作白菊根际土中.结论 蚕沙与基底土混和发酵制成蚕沙发酵肥后细菌多样性发生显著变化,生防菌种类显著增加,同时蚕沙发酵肥中的这些生防菌来源于蚕沙并非基底土.蚕沙发酵肥缓解连作障碍的机制之一可能是由于蚕沙发酵肥中存在的大量生防菌.

目的:观察降酸通痹汤治疗慢性痛风性关节炎(肝肾不足,痰湿瘀滞证)的临床疗效及对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)及白细胞介素-8(interleukin -8,IL-8)水平、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)和C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)的影响.方法:将120例患者随机分为对照组和观察组,每组60例.两组患者均给予非药物干预指导.对照组采用别嘌醇片治疗,每次100 mg,每天3次,饭后服用,血尿酸正常后,以100～200 mg维持.若血尿酸不达标加服苯溴马隆片,每次50 mg,每天1 次.痛风急性发作者加用塞来昔布胶囊,每次0.2 g,每天1次,口服.观察组在对照组治疗的基础上加用降酸通痹汤治疗,药物组成:桑寄生20 g,杜仲15 g,熟地黄30 g,川牛膝10 g,胡桃衣15 g,芡实10 g,薏苡仁30 g,忍冬藤 20 g,山药15 g,积雪草10 g,蚕沙10 g,老桑枝30 g,伸筋草20 g.急性发作者加威灵仙15 g,秦艽15 g,土茯苓30 g,车前子20 g,去熟地黄、桑寄生、杜 仲和胡桃衣.每天1剂.两组患者疗程均为6个月.记录治疗6个月内的急性痛风发作次数;血尿酸治疗前、治疗后2个月、治疗后4个月和治疗后6个月各测量一次血 尿酸水平;对主要症状、体征和中医证候进行评分;检测ESR、CRP、IL-8和TNF-α水平.结果:两组患者临床疗效比较,观察组有效率为95.0％,高于对照组的81.67％,差异有统计学意义(χ2=5.175,P＜0.05);在6个月的观察期内,对照组发作(1.75±0.86)次,观察组发作(0.92±0.51)次,观察组患者平均发作次数少于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);观察组在治疗后4个月和6个月血尿酸水平持续下降,并低于同期对照组水平,差异均有统计学意义(P＜0.01);治疗后观察组主要症状、体征和中医证候评分均低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01);治疗后观察组患者ESR、CRP、IL-8和TNF-α水平低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论:在西医常规治疗的基础上,采用降酸通痹汤治疗慢性痛风性关节炎能减少痛风发作次数,降低尿酸水平,改善临床症状,并能减轻炎症反应,临床疗效显著,其作用机制可能与降低ESR、CRP、IL-8和TNF-α水平有关.

目的 研究土壤处理措施对白术连作障碍的调控效应.方法 以石灰氮、石灰、商品生物菌肥、蚕沙发酵肥等处理连作土壤,以存苗率、株高、蓬径和产量等指标考察不同处理措施的效果,并用HPLC分析处理后白术药材中白术内酯Ⅰ和Ⅲ的含量.结果 施用石灰氮、蚕沙发酵肥和生物菌肥等措施,能不同程度增加连作白术的存苗率,增加幅度为106.98％～219.49％;也能不同程度增加白术的株高,增加幅度为33.48％～52.01％,且施石灰氮处理后的株高表现均优于未施石灰氮处理;蓬径表现与株高类似;上述措施均能增加白术药材鲜产量,增产幅度为180.70％～429.82％,且不施用石灰氮处理的产量均优于施用石灰氮处理,可能原因是施用石灰氮后土壤含氮量过高,引起植株地上部分旺长.白术内酯Ⅰ和Ⅲ的总含量以“石灰0.20 kg·m-2+蚕沙发酵肥+生物菌肥1.50 kg”处理最高.结论 连作种植前,用熟石灰中和土壤酸性,结合施用蚕沙发酵有机肥或商品生物菌肥,能有效提高白术存苗率,降低发病率,提高药材产量和质量,一定程度上缓解了白术连作障碍.

目的:对不同产地、不同龄期蚕沙中多类型资源性化学成分进行分析评价,为蚕沙的资源化利用提供科学依据.方法:采用超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法(UPLC-TQ/MS法)分析蚕沙中黄酮类、生物碱类、核苷及氨基酸类等资源性化学成分组成及含量.分析条件:黄酮类成分,采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.1％甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0～8 min,90％A→40％A;8～8.5 min,40％A→20％A),流速0.4 mL·min-1,检测方式为多反应监测(MRM);生物碱类、核苷及氨基酸类成分,采用ACQUITY UPLC BEH Amide色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为含有5 mmol·L-1甲酸铵、5 mmol·L-1乙酸铵和0.2％甲酸的水溶液(A)-含有1 mmol·L-1甲酸铵、1 mmol·L-1乙酸铵和0.2％甲酸的乙腈(B),梯度洗脱(0～3 min,10％A;3～9 min,10％A→18％A;9～15 min,18％A→20％A;15～16 min,20％A→46％A;16～18 min,46％A),流速0.4 mL·min-1,检测方式为多反应监测(MRM).采用紫外-可见分光光度法分析蚕沙中可溶性多糖及叶绿素含量:采用葡萄糖和葡萄糖醛酸作为中性多糖和酸性多糖的对照品,检测波长分别是490 nm和512 nm;通过在645和663 nm检测波长下的吸收度,根据Amon公式计算叶绿素含量.结果:可溶性多糖类成分在蚕沙中含量最高,其中收集于云南大理的蚕沙中可溶性多糖含量最高,达11.9％;黄酮类成分主要为异槲皮苷、芦丁、紫云英苷,不同产地含量差别显著,其中收集于云南大理的蚕沙中黄酮类成分含量约为河南蚕沙的25倍;苏州产蚕沙中生物碱类成分含量最高,为1.63 mg·g-1;共检出5个核苷类成分,14个氨基酸类成分,其中苏州产蚕沙核苷类和氨基酸类成分含量最高,达0.26％;叶绿素含量以镇江三龄蚕沙为最高,达2.62 mg·g-1.结论:除产地外,蚕沙中资源性化学成分的含量与龄期关系密切,其中黄酮类、可溶性多糖类、叶绿素类成分含量均随龄期的增加而降低,生物碱类成分含量随龄期的增加而升高.研究结果为蚕沙的资源化利用与产业化开发提供了科学依据.

目的 探讨晚蚕沙外熨对糖尿病性周围神经病变寒凝血瘀症患者血糖、血脂及血浆同型半胱氨酸(Hcy)的影响. 方法 260例糖尿病性周围神经病变寒凝血瘀症患者随机分为对照组(130例)与观察组(130例).对照组给予甲钴胺500 μg,3次/d,口服.观察组给予甲钴胺500 μg,3次/d,口服联合晚蚕沙外熨肢体麻凉痛部位.两组患者4周为1个疗程,1个疗程后观察两组患者血糖、血脂及血浆Hcy各项指标变化. 结果 治疗后两组血脂、血液流变学均有明显改善,观察组较对照组改善更加明显(P＜0.05);治疗后两组血浆Hcy水平均有明显降低,观察组血浆Hcy水平低于对照组(P＜0.05). 结论 晚蚕沙外熨能有效改善血糖、血脂代谢,降低血浆Hcy水平,对糖尿病周围神经病变具有较好的防治作用.

目的 基于前期研究表明二氢卟吩f的3-乙烯基成醚修饰具有更强的光敏抗肿瘤活性而设计合成二氢卟吩p6醚类光敏剂(1),研究其初步体外光动力抗癌活性.方法 以蚕沙叶绿素a粗提物酸水解产物脱镁叶绿酸a(5)经碱及空气氧化降解制得的紫红素-18(4)为先导物,通过碱水解和CH2N2甲基化制得二氢卟吩p6三甲酯(2),2与33％HBr加成后再和烷氧醇发生亲核取代反应生成目标化合物(1),并评价其对黑色素瘤B16-F10细胞的光动力杀伤效应.结果 6个目标化合物1a-1f对黑色素瘤B16-F10细胞的体外光动力抗癌活性均优于同类阳性对照药他拉泊芬和维替泊芬,其结构经电喷雾质谱(ESI-MS)、氢谱(1HNMR)、碳谱(13CNMR)及电喷雾高分辨质谱(ESI-HRMS)确证.结论 二氢卟吩p6醚类光敏剂具有光动力抗癌活性强、治疗指数(暗毒/光毒比)高等优点,值得进一步开发研究.

目的:从水通道蛋白角度研究蚕沙的“化湿”作用.方法:SD大鼠,随机分为5组,即正常组、模型组、蚕沙低、中、高剂量组.采用“外湿侵体+正气耗损+过食肥甘”的方法,建立“湿阻中焦”证模型,Western blot法检测肾AQP1、肺AQP1、结肠AQP3、皮肤AQP3、颌下腺AQP5蛋白的表达,qPCR法检测AQP mRNA的表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠肾中AQP1蛋白和mRNA表达明显升高(P＜0.05),且肺AQP1、结肠AQP3、皮肤AQP3、颌下腺AQP5蛋白和mRNA表达均明显降低(P＜0.05);与模型组比较,蚕沙高剂量组肾AQP1蛋白和mRNA表达显著降低(P＜0.05),肺AQP1、结肠AQP3、皮肤AQP3、颌下腺AQP5蛋白和mRNA表达均显著升高(P＜0.05).结论:蚕沙可能通过调节肾、肺、结肠、皮肤、颌下腺组织中AQP的表达,发挥“化湿”的作用.

目的 探究蚕沙防治类风湿关节炎合并糖尿病的药效物质基础及其作用靶点,揭示其多成分、多靶点、多途径的作用特点.方法 结合文献检索和数据库挖掘对蚕沙中的主要化学成分进行整理,通过Parm Mapper反向分子对接方法预测蚕沙主要活性成分的作用靶点,利用UniProt数据库校正蛋白名称,疾病靶点数据库(TTD)校正靶点相关疾病信息,筛选出与类风湿关节炎、糖尿病相关的作用靶点;利用Cytoscape软件构建蚕沙"成分-靶点-疾病"网络,及其蛋白相互作用(PPI)网络,并对蚕沙治疗类风湿关节炎和糖尿病的相关作用靶点进行基因本体论(GO)功能注释及京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析.结果 经筛选和分析,获得蚕沙主要活性成分为β-胡萝卜素(beta-Carotene)、β-谷甾醇(beta-Sitosterol)、胆甾醇(Cholesterol)和山豆根黄烷酮A7(Euchrenone A7);与类风湿关节炎和糖尿病相关的作用靶点共计37个,其中与2种疾病均相关的作用靶点共计6个,包括SEC14样蛋白2(S14 L2)、二肽基肽酶-4(DPP4)、皮质类固醇11-β-脱氢酶同工酶1(DHI1)、半胱天冬酶1(CASP1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)、α-生育酚转移蛋白(TTPA).经GO功能注释分析得到GO条目7个(P<0.05),其中涉及生物过程条目3个,分子功能条目4个.KEGG信号通路筛选出催乳素(prolactin)、破骨细胞分化(Osteo-clast differentiation)、Th17细胞分化(Th17 cell differentiation)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)等4条信号通路.结论 蚕沙在防治类风湿关节炎合并糖尿病方面体现了中药多成分、多靶点、多途径的作用特点,为深入阐释蚕沙防治疾病的作用机制提供参考,为蚕沙"异病同治"研究提供科学依据,但其关键靶点和调控机制仍需进一步的实验验证.