目的:探讨柚皮苷诱导自噬对骨关节炎模型大鼠血清和关节软骨中炎性因子表达的影响。方法:在2022年11—12月，由温州市人民医院骨科将30只健康Sprague-Dawley大鼠通过随机数字表法分为对照组、模型组及低、中、高剂量实验组各6只。切除模型组及低、中、高剂量实验组大鼠右膝关节内侧半月板和前交叉韧带，构建骨关节炎模型；对照组施行假手术。低、中、高剂量实验组建模期间分别灌胃25 mg·kg -1·d -1、50 mg·kg -1·d -1、100 mg·kg -1·d -1柚皮苷，对照组与模型组则灌胃等量0.9%氯化钠注射液。造模成功后通过国际骨关节炎研究学会（OARSI）评分和滑膜评分评价骨关节炎严重程度；以酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测大鼠血清和软骨细胞中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平；反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测软骨细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA的表达；以蛋白质印迹（WB）法检测软骨细胞中自噬活性和AKT/mTOR信号通路变化。 结果:对照组、模型组及低、中、高剂量实验组大鼠OARSI评分分别为（0.80±0.75）分、（9.40±1.02）分、（8.20±1.33）分、（6.80±1.17）分和（4.60±1.50）分；滑膜评分分别为（0.40±0.49）分、（3.80±0.75）分、（3.40±0.49）分、（2.20±0.98）分和（1.60±0.80）分；大鼠血清中IL-1β水平分别为（186.48±50.31）ng/L、（817.43±66.99）ng/L、（533.42±45.67）ng/L、（462.90±21.43）ng/L和（396.64±24.66）ng/L；IL-6水平分别为（448.25±89.42）ng/L、（1 762.49±171.95）ng/L、（1 517.08±83.87）ng/L、（1 019.78±103.32）ng/L和（819.42±169.37）ng/L；TNF-α水平分别为（419.67±60.99）ng/L、（1 287.40±184.68）ng/L、（948.73±87.82）ng/L、（860.55±102.21）ng/L和（726.95±15.65）ng/L；模型组OARSI评分、滑膜评分、血清IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平及软骨细胞磷酸化AKT（p-AKT）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）蛋白表达量比对照组高，高剂量实验组OARSI评分、滑膜评分、血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量以及软骨细胞p62、p-AKT、p-mTOR蛋白表达量比模型组低，高剂量实验组软骨细胞LC3-Ⅱ蛋白表达量比模型组高，差异均有统计学意义（均 P < 0.05）。 结论:柚皮苷通过抑制AKT/mTOR信号通路，激活自噬，降低骨关节炎模型大鼠炎性因子分泌，最终抑制骨关节炎。

目的:研究三氧预处理对大鼠脑缺血/再灌注（I/R）损伤的作用。方法:选择24只清洁级雄性SD大鼠，按随机数字表法分为假手术组（Sham组）、脑I/R损伤组（I/R组）和三氧预处理组（Ozone组），每组8只。各组大鼠均常规喂养，Ozone组给予腹腔注射80 mg/L三氧水（剂量为0.01 mL/g）预处理，Sham组和I/R组分别输注等体积0.9%生理盐水；每日1次，共注射5 d。之后I/R组与Ozone组采用线栓法制备大鼠脑I/R模型，Sham组只分离不结扎动脉。缺血2 h后，测定大鼠神经功能缺损评分（NDS）；再灌注24 h后，测定改良神经功能缺损评分（mNSS）；并麻醉大鼠取脑组织，采用2，3，5-三苯基氯化四氮唑（TTC）染色观察大鼠的脑梗死情况，计算脑梗死体积占比；另外采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）测定脑缺血半暗带区代谢型谷氨酸受体5（mGluR5）和离子型谷氨酸α-氨基-3-羟基-5甲基-4异恶唑丙酸受体（AMPAR）亚基GluA2的蛋白表达。结果:与Sham组相比，I/R组大鼠的NDS评分、mNSS评分和脑梗死体积占比均明显升高〔NDS评分（分）：2.63±0.52比0，mNSS评分（分）：9.63±1.19比1.13±0.64，脑梗死体积占比：（41.25±2.93）%比0%，均 P<0.05〕，脑缺血半暗带区mGluR5和GluA2的蛋白表达水平均明显降低mGluR5蛋白（mGluR5/β-actin）：0.44±0.14比1.00±0.10，GluA2蛋白（GluA2/β-actin）：0.23±0.08比1.00±0.25，均 P<0.05；与I/R组相比，Ozone组大鼠mNSS评分和脑梗死体积占比均明显降低〔mNSS评分（分）：7.00±1.20比9.63±1.19，脑梗死体积占比：（27.23±6.21）%比（41.25±2.93）%，均 P<0.05〕，脑缺血半暗带区mGluR5和GluA2的蛋白表达水平均明显升高mGluR5蛋白（mGluR5/β-actin）：0.81±0.10比0.44±0.14，GluA2蛋白（GluA2/β-actin）：0.76±0.13比0.23±0.08，均 P<0.05。 结论:三氧预处理可减轻大鼠脑I/R损伤，其机制可能与脑缺血半暗带区GluR5和GluA2蛋白表达上调有关。

目的:探讨小鼠炎症创面组织匀浆体外模拟创面炎症微环境的可行性。方法:(1)取10只8周龄C57BL/6雄性小鼠，在背部中线两侧用打孔器各取直径1.0 cm的圆形全层皮肤组织，制作正常皮肤组织匀浆上清液。形成全层皮肤缺损创面48 h后，取距创缘2 mm内创面组织，制作炎症创面组织匀浆上清液。取2种组织匀浆上清液，调整总蛋白质量浓度为1 mg/mL，酶联免疫吸附测定法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量，样本数为6。(2)取原代人脐带间充质干细胞(hUCMSC)并培养至第3代，培养48 h后提取正常外泌体。另外取第3代hUCMSC，分别加入总蛋白质量浓度为30、50、100 μg/mL正常皮肤组织匀浆上清液和炎症创面组织匀浆上清液，培养48 h后，提取30、50、100 μg/mL正常蛋白刺激外泌体和30、50、100 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体。取正常外泌体、30 μg/mL正常蛋白刺激外泌体和30 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体，透射电子显微镜下观察外泌体形态，纳米颗粒跟踪分析仪检测外泌体粒径，蛋白质印迹法检测CD9和CD63表达。(3)取1 d龄C57BL/6小鼠乳鼠20只，分离培养原代成纤维细胞(Fb)和第3代Fb，倒置相差显微镜下观察细胞形态。取第3代Fb，培养2 h，利用细胞爬片法结合免疫荧光法观察波形蛋白的表达。(4)取第3代Fb，按随机数字表法分为对照组，正常外泌体组，30、50、100 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组及30、50、100 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组，每组4孔。对照组不进行任何处理，其余7组依次加入实验(2)中制备的正常外泌体，30、50、100 μg/mL正常蛋白刺激外泌体和30、50、100 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体，并调整外泌体终质量浓度为10 μg/mL。培养48 h，采用细胞计数试剂盒8法检测8组细胞活力。(5)取2个批次第3代Fb，同实验(4)进行分组及处理，每组4孔，并分别调整外泌体终质量浓度为1、10 μg/mL，采用细胞划痕试验检测培养6、12、24 h细胞迁移率。(6)取2个批次第3代Fb，同实验(4)进行分组及处理，但不设置对照组，每组3孔，并调整外泌体终质量浓度为1、10 μg/mL，实时荧光定量反转录PCR法检测培养48 h转化生长因子β 1(TGF-β 1)、TGF-β 3、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达。对数据行重复测量方差分析、单因素方差分析及Bonferroni法。 结果:(1)伤后48 h，小鼠炎症创面组织匀浆上清液中TNF-α含量为(116±3)pg/mL，显著高于正常皮肤组织匀浆上清液的(97±5)pg/mL， t＝3.306， P<0.05。(2)hUCMSC正常外泌体、30 μg/mL正常蛋白刺激外泌体、30 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体均呈典型茶托样；3种hUCMSC外泌体粒径为30～150 nm，均在外泌体正常粒径范围内；3种hUCMSC外泌体CD9和CD63均呈阳性表达。(3)原代细胞轮廓清晰，呈突起的纺锤形、不规则多角形或细长条状；第3代细胞形态与原代细胞相近。培养2 h，细胞中波形蛋白呈阳性表达，细胞鉴定为Fb。(4)培养48 h，30 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组细胞活力为(137.4±2.8)%，明显高于对照组的100%、正常外泌体组的(107.5±2.4)%、30 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组的(113.3±3.2)%及50、100 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组的(104.0±2.0)%、(101.9±1.5)%， P<0.01, 30 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组细胞活力明显高于对照组、正常外泌体组及50、100 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组[(103.4±2.2)%、(102.5±1.4)%]， P<0.01。(5)外泌体终质量浓度为1 μg/mL时，培养6、12、24 h，30 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组细胞迁移率明显高于对照组、正常外泌体组、30 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组及50、100 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组( P<0.05)；培养12 h，30 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组细胞迁移率明显高于对照组、正常外泌体组以及50、100 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组( P<0.05)。外泌体终质量浓度10 μg/mL时，培养6 h，30 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组细胞迁移率明显高于对照组、正常外泌体组( P<0.05)；30 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组细胞迁移率明显高于50、100 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组( P<0.05)。培养12、24 h，30 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组细胞迁移率明显高于对照组、正常外泌体组及50、100 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组( P<0.05)；30 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组细胞迁移率明显高于对照组、正常外泌体组及50、100 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组( P<0.05)。(6)外泌体终质量浓度1 μg/mL时，7组细胞培养48 h TGF-β 1、TGF-β 3、α-SMA mRNA表达量组间总体比较，差异无统计学意义( F＝1.123、1.537、1.653， P>0.05)。外泌体终质量浓度为10 μg/mL时，培养48 h，7组细胞TGF-β 1、α-SMA mRNA表达量组间总体比较，差异无统计学意义( F＝1.487、1.308， P>0.05)。50 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组细胞培养48 h TGF-β 3 mRNA表达量明显高于正常外泌体组、50 μg/mL正常蛋白刺激外泌体组及30、100 μg/mL炎症蛋白刺激外泌体组( P<0.05)。 结论:小鼠炎症创面组织匀浆上清液预处理对hUCMSC外泌体的总蛋白含量无影响，低浓度炎症创面组织匀浆上清液刺激所得的hUCMSC外泌体能够上调Fb的增殖和迁移能力，但炎症创面组织匀浆上清液中的炎症介质含量过低，不足以有效启动间充质干细胞抗炎及组织修复旁分泌效应。

目的:探讨绞股蓝皂苷ⅩⅦ调控核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件（Nrf2/ARE）信号通路抗脑缺血/再灌注（I/R）的机制。方法:将40只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、I/R模型组及25、50和100 mg/kg绞股蓝皂苷ⅩⅦ组，每组8只。绞股蓝皂苷ⅩⅦ组分别给予绞股蓝皂苷ⅩⅦ 25、50、100 mg/kg灌胃（灌胃量0.01 mL/g），连续给药14 d；其余两组给予相同剂量生理盐水灌胃。然后采用改良线栓法制备大鼠脑I/R模型；假手术组大鼠采用相同方法手术，但不产生实质性栓塞。再灌注后24 h，评估各组大鼠神经功能缺损评分；采集大鼠腹主动脉全血检测血清活性氧（ROS）、血红素加氧酶-1（HO-1）、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）、超氧化物歧化酶（SOD）、醌NADH氧化还原酶1（NQO1）、丙二醛（MDA）水平；随后取完整大脑组织并分离大脑皮质脑梗死周围半暗带组织，观察大鼠脑组织大体情况及脑梗死体积，光镜下观察脑组织病理学变化，采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测脑缺血半暗带组织Nrf2和Keap1的mRNA表达，采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测脑缺血半暗带组织Nrf2和Keap1的蛋白表达。结果:再灌注后24 h，与假手术组比较，I/R模型组大鼠神经功能缺损评分明显升高，脑组织梗死体积明显增大，血清NQO1、SOD和γ-GCS水平均明显降低、血清MDA、HO-1和ROS水平均明显升高，脑缺血半暗带组织Nrf2和Keap1的mRNA及蛋白表达均明显升高。与I/R模型组比较，50 mg/kg与100 mg/kg绞股蓝皂苷ⅩⅦ能明显降低脑I/R大鼠的神经功能缺损评分（分：1.50±0.53、1.37±0.52比2.75±0.46），缩小脑组织梗死体积〔（19.8±5.1）%、（21.4±6.4）%比（42.3±5.8）%〕，明显提高血清NQO1、SOD、HO-1和γ-GCS水平〔NQO1（ng/L）：186.05±10.38、220.75±16.22比131.36±5.95，SOD（kU/L）：63.23±5.30、72.70±8.62比36.75±6.55，HO-1（ng/L）：60.57±7.93、60.35±4.72比42.72±4.95，γ-GCS（kU/L）：8.81±0.53、8.72±0.69比6.80±0.56〕，明显降低血清MDA和ROS水平〔MDA（μmol/L）：5.94±0.66、5.61±0.53比10.88±1.34，ROS（kU/L）：69.11±4.23、67.12±4.52比104.43±7.54〕，同时可明显提高脑缺血半暗带组织Nrf2和Keap1的mRNA及蛋白表达〔Nrf2 mRNA（2 -△△Ct）：1.90±0.13、2.13±0.18比1.48±0.11，Keap1 mRNA（2 -△△Ct）：1.78±0.11、1.85±0.10比1.43±0.10，Nrf2/β-actin：0.73±0.04、0.79±0.03比0.60±0.03，Keap1/β-actin：0.71±0.01、0.76±0.03比0.61±0.01〕，比较差异均有统计学意义（均 P<0.01）；25 mg/kg绞股蓝皂苷ⅩⅦ无明显作用。 结论:绞股蓝皂苷ⅩⅦ （50 mg/kg和100 mg/kg）可能通过Nrf2/ARE信号通路调节NQO1、SOD、HO-1、γ-GCS、ROS及MDA起到抗脑I/R损伤的作用。

目的:探讨噪声、强光及机械刺激对脓毒症大鼠睡眠、血脑屏障和认知功能的影响。方法:选择40只雄性SD大鼠，均经腹腔注射10 mg/kg脂多糖（LPS）制备脓毒症模型，并分别给予0、30、45、60、75 dB噪声刺激或0、50、100、200、400 Lux光照刺激（均 n＝4），96 h后通过测定血清皮质醇、褪黑素及脑组织伊文思蓝（EB）含量等指标筛选后续实验条件。然后另外选择40只雄性SD大鼠，按随机数字表法分为对照组（Con组）、LPS组、噪声干预组（LPS+60 dB组）、200 Lux光照干预组（LPS+200 Lux组）及机械刺激组（LPS+MS组），每组8只。分别予以相应刺激96 h后，通过旷场实验及条件性恐惧实验评估大鼠探索行为和认知功能；用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测脑组织白细胞介素-6（IL-6）含量和血清皮质醇、褪黑素水平以评估大鼠睡眠质量、中枢炎症及应激反应；通过EB渗透实验评估血脑屏障完整性；用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测海马组织密闭小带蛋白1（ZO-1）、封闭蛋白5（Claudin-5）、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）蛋白表达以评估大鼠海马区血脑屏障完整性和神经元凋亡情况。 结果:与0 dB噪声组或0 Lux光照组相比，60 dB噪声组及200 Lux光照组血清褪黑素水平即明显降低，血清皮质醇及脑组织EB含量即明显升高，故选取60 dB噪声、200 Lux光照作为后续实验条件。与Con组相比，LPS组旷场实验水平分数、垂直分数明显降低，僵直时间占比、脑组织EB和IL-6含量、血清褪黑素和皮质醇水平以及海马区ZO-1、Claudin-5、caspase-3蛋白表达差异均无统计学意义。与LPS组相比，LPS+60 dB、LPS+200 Lux、LPS+MS组大鼠水平分数、垂直分数及僵直时间占比明显降低〔水平分数（分）：73.8±9.7、80.3±9.4、64.5±8.3比103.6±15.5，垂直分数（分）：9.4±1.7、11.2±1.9、6.8±0.9比15.9±2.8，僵直时间占比：（45.3±4.7）%、（53.3±5.8）%、（42.1±5.1）%比（66.1±6.3）%〕，血清褪黑素水平明显降低（ng/L：53.62±6.20、44.25±6.41、45.33±5.84比74.39±7.54），血清皮质醇水平明显升高（nmol/L：818.34±95.53、710.04±65.41、989.73±91.63比398.82±72.59），脑组织EB、IL-6含量明显升高〔EB（μg/g）：2.80±0.35、2.38±0.31、3.24±0.42比1.59±0.26，IL-6（ng/g）：31.56±4.11、26.69±3.75、37.47±4.56比16.28±2.69〕，海马组织ZO-1、Claudin-5蛋白表达明显降低（ZO-1/β-actin：0.37±0.04、0.32±0.05、0.24±0.04比0.80±0.09，Claudin-5/β-actin：0.62±0.08、0.47±0.06、0.35±0.05比0.97±0.20），caspase-3蛋白表达明显升高（caspase-3/β-actin：0.56±0.06、0.39±0.04、0.72±0.12比0.20±0.03），差异均有统计学意义（均 P<0.05）。 结论:60 dB噪声、200 Lux光照或机械刺激96 h可显著抑制脓毒症大鼠血清褪黑素分泌、促进皮质醇分泌，激活中枢炎症反应，促使海马区神经元凋亡、血脑屏障通透性升高，进而导致睡眠障碍和认知功能损害。

目的:了解HIV抗体不确定结果的特征及其与HIV感染转归的关系。方法:收集广州医科大学附属市八医院HIV确证实验室2015—2019年报告HIV抗体不确定的蛋白印迹试验（WB）结果，分析带型特征及其与转归的关系。结果:共3 365份样本进行了WB试验，其中HIV抗体不确定199份，有确定转归结果185例，其中转归为阳性的比例为89.73%（166/185）。HIV不确定结果的WB组合带型共有13种，最常见为p24+gp160，占32.66%，其次为gp120+gp160和gp41+gp120+gp160，分别占16.58%和16.08%。在上述最常见的3种组合带型中，除了1例gp120+gp160组合带型样本最后转归为阴性，其他均转归为阳性。阳转者外膜蛋白带gp160和gp120带型出现率显著高于阴转者（ χ2=36.116和4.188， P均<0.05）。 结论:WB不确定结果中，大多数转归为HIV感染。外膜蛋白类不确定结果预示HIV感染的机会比较大。

目的:探讨过表达线粒体融合蛋白2（Mfn2）对急性呼吸窘迫综合征（ARDS）肺纤维化的抑制作用及其机制。方法:离体培养人胚肺成纤维细胞（HELF），待细胞生长贴壁率达80%以上进行消化传代，选取状态良好的细胞进行实验。给予5 mg/L脂多糖（LPS）刺激制备ARDS细胞模型（LPS组）；并将75 mol/L携带线粒体融合蛋白2腺病毒载体（Adv-Mfn2）转染到HELF中（Adv-Mfn2+LPS组）；同时设空白对照组（完全培养基培养）和空载腺病毒载体（Adv-vector）+LPS组作为对照。采用磺基罗丹明B（SRB）法观察各组细胞培养0、12、24、36、48 h的增殖情况；Hoechst 33342染色后，共聚焦显微镜下观察细胞形态学改变；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测抗凋亡基因Bcl-2和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）的蛋白表达；采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测Bcl-2和caspase-3的基因表达。结果:经LPS刺激12～48 h，LPS组细胞增殖率随时间延长而逐渐增加，而且明显高于空白对照组〔12 h：（10.75±1.51）%比（0.73±1.22）%，24 h：（20.09±1.71）%比（1.15±1.12）%，36 h：（20.58±1.55）%比（1.20±1.12）%，48 h：（21.30±1.51）%比（1.23±1.10）%，均 P<0.01〕；LPS组与Adv-vector+LPS组各时间点细胞增殖率比较差异则均无统计学意义；而Adv-Mfn2+LPS组过表达Mfn2后12、24、36、48 h的细胞增殖率分别为（8.93±1.14）%、（10.52±1.24）%、（10.72±1.30）%、（10.91±1.20）%，均较LPS组明显降低（均 P<0.05）。共聚焦显微镜下显示，空白对照组细胞核大小不一，部分细胞核碎裂或核固缩，形成凋亡小体；LPS组和Adv-vector+LPS组细胞核呈圆形或椭圆形，大小均匀，仅出现个别凋亡细胞；而Adv-Mfn2+LPS组过表达Mfn2后，凋亡细胞较LPS组增多。Western blotting和RT-qPCR检测结果显示，给予LPS刺激后，LPS组Bcl-2表达较空白对照组明显上调〔Bcl-2蛋白（Bcl-2/GAPDH）：0.68±0.01比0.29±0.01，Bcl-2 mRNA（2 -ΔΔCT）：2.23±0.34比1.00±0.00，均 P<0.01〕，而caspase-3的表达较空白对照组明显下调〔caspase-3蛋白（caspase-3/GAPDH）：0.37±0.02比0.66±0.02，caspase-3 mRNA（2 -ΔΔCT）：0.31±0.05比1.00±0.00，均 P<0.01〕；与LPS组比较，Adv-Mfn2+LPS组过表达Mfn2蛋白后，Bcl-2表达明显下调〔Bcl-2蛋白（Bcl-2/GAPDH）：0.46±0.01比0.68±0.01，Bcl-2 mRNA（2 -ΔΔCT）：1.45±0.14比2.23±0.34，均 P<0.01〕，caspase-3表达明显上调〔caspase-3蛋白（caspase-3/GAPDH）：0.54±0.02比0.37±0.02，caspase-3 mRNA（2 -ΔΔCT）：0.88±0.10比0.31±0.05，均 P<0.01〕。 结论:Mfn2蛋白参与ARDS肺纤维化，可能与线粒体介导的抑制细胞增殖途径有关。

目的:对2012—2021年北京市海淀区HIV筛查阳性样本的确证试验中HIV抗体不确定结果进行分析。方法:对HIV筛查实验室上送的8 454例次筛查阳性样本进行免疫印迹试验（western blot，WB），分析不确定样本的带型特点和随访情况，并用SPSS 24.0软件进行统计分析。结果:在8 454例次筛查阳性样本中，HIV抗体不确定样本1 895例次，占比22.4%，主要来自医疗机构（50.5%），其次是血液中心（47.8%）。WB条带出现率最高是gag蛋白中的p24（78.7%）和env蛋白中的gp160（17.7%）。在完成随访的211例样本中，其中35例（16.6%）转为阳性，79例（37.4%）转为阴性。18~44岁年龄组的男性，尤其是有男男性行为的转阳率较高。条带越多转阳率越高。结论:北京市海淀区HIV抗体不确定结果存在较高假阳性。尽管病例随访率低，但是仍发现一些急性期阳转病例。应加大随访力度，做到早发现早诊断早治疗。

目的:探讨消皮素D（GSDMD）在重症急性胰腺炎（SAP）小鼠肠道损伤中的作用机制。方法:将C57BL/6小鼠按随机数字表法分为生理盐水（NS）组、小干扰RNA（siRNA）-NS组、SAP模型组和siRNA-SAP组，每组6只。通过腹腔注射雨蛙素50 μg/kg联合脂多糖（LPS）10 mg/kg构建SAP小鼠模型；NS组给予等量NS；siRNA-SAP组和siRNA-NS组在制模或注射NS前分3次经尾静脉注射siRNA 50 mg/kg。制模12 h后取各组小鼠眼球血，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清白细胞介素（IL-1β、IL-18）水平。处死小鼠观察腹腔内大体改变；取胰腺和回肠组织，光镜下观察胰腺及肠黏膜病理学改变；采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肠道组织长链非编码RNA uc.173（lnc uc.173）表达；采用免疫组化法检测肠黏膜上皮细胞紧密连接蛋白带状闭锁蛋白-1（ZO-1）及闭合蛋白（Occludin）的表达；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测肠道组织GSDMD蛋白表达。结果:ELISA显示，SAP模型组血清IL-1β、IL-18水平较NS组和siRNA-NS组明显升高〔IL-1β（ng/L）：146.66±1.40比44.48±5.76、81.49±10.75，IL-18（ng/L）：950.47±177.09比115.43±16.40、84.84±21.90，均 P<0.05〕；siRNA-SAP组IL-1β、IL-18水平较SAP模型组明显降低〔IL-1β（ng/L）：116.26±15.54比146.66±1.40，IL-18（ng/L）：689.96±126.08比950.47±177.09，均 P<0.05〕。大体观察显示，NS组和siRNA-NS组小鼠腹腔内未见明显异常；SAP模型组和siRNA-SAP组可见肠道有不同程度水肿、充血，但siRNA-SAP组损伤较SAP模型组明显减轻。光镜下显示，NS组和siRNA-NS组胰腺未见明显变化，肠黏膜未见明显损伤；SAP模型组和siRNA-SAP组胰腺组织有不同程度水肿、炎性细胞浸润、小叶结构破坏，回肠可见不同程度的肠黏膜破坏和绒毛断裂，但siRNA-SAP组病理损伤较SAP模型组明显减轻。RT-PCR显示，SAP模型组肠道组织lnc uc.173表达较NS组和siRNA-NS组显著降低（2 -ΔΔCt：0.26±0.12比1.01±0.37、0.67±0.32，均 P<0.05）；而siRNA-SAP组lnc uc.173表达较SAP组明显升高（2 -ΔΔCt：0.60±0.39比0.26±0.12， P<0.05）。免疫组化显示，NS组ZO-1、Occludin均沿肠黏膜上皮细胞分布，并呈强阳性表达；SAP模型组和siRNA-SAP组ZO-1、Occludin表达均明显减弱，但siRNA-SAP组较SAP模型组有所增强。Western blotting显示，SAP模型组肠道组织GSDMD蛋白表达水平较NS组和siRNA-NS组明显升高〔GSDMD蛋白（GSDMD-N/β-actin）：1.99±0.46比1、1.00±0.78，均 P<0.05〕；与SAP模型组相比，siRNA-SAP组GSDMD蛋白表达明显下降〔GSDMD蛋白（GSDMD-N/β-actin）：1.42±0.42比1.99±0.46， P<0.05〕。 结论:SAP小鼠全身炎症反应和肠黏膜屏障损伤可能与肠道组织GSDMD表达升高有关，GSDMD通过介导细胞焦亡促进炎性因子释放，导致肠道损伤，下调肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1及Occludin的表达，致使肠道黏膜损伤。

患者女，38岁，因口腔糜烂1个月，面部、躯干、四肢红斑、水疱20 d就诊。患者1个月前无明显诱因下出现口腔黏膜糜烂，伴疼痛，糜烂逐渐增多，当地医院行组织病理检查示寻常型天疱疮（pemphigus vulgaris，PV）。20 d前躯干部皮肤开始出现红斑、松弛水疱、大疱，易破溃，逐渐蔓延至四肢近端及面部，无发热、关节疼及光敏等症状。既往史：15年前诊断系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE），近10年服用甲泼尼龙（6 mg/d）并间断加用硫酸羟氯喹（0.2 g每日2次）。对头孢类抗生素、青霉素、磺胺、洛美沙星、阿奇霉素、达那唑过敏。除长期服用甲泼尼龙及硫酸羟氯喹外否认接触新药史。体检：各系统未见明显异常。皮肤科检查：颊部、胸背及四肢近端散在红斑和0.5 ~ 4.0 cm不等薄壁松弛水疱，疱液清亮，尼氏征阳性，其间散在糜烂及渗出（图1A）。上下齿龈黏膜、颊黏膜及上腭后部多处糜烂（图1B）。未见面部蝶形红斑、脱发及关节肿胀。实验室检查：血常规示白细胞9.10 × 10 9/L，嗜酸性粒细胞计数1.12 × 10 9/L[参考值：（0.02 ~ 0.52） × 10 9/L，下同]，红细胞4.35 × 10 12/L，血红蛋白126 g/L（115 ~ 150 g/L），血小板503 × 10 9/L。肝肾功能、尿便常规未见异常。抗核抗体阴性（1个月及2个月复查均为1∶320），红细胞沉降率、免疫球蛋白、补体C3及C4、抗链球菌溶血素O、类风湿因子、抗ENA抗体、抗双链DNA抗体、C反应蛋白均正常；抗桥粒芯糖蛋白1（Dsg1）抗体26.19 RU/ml（阴性< 20 RU/ml），Dsg3抗体138.02 RU/ml（阴性< 20 RU/ml）。血清免疫印迹试验：表皮产物出现Dsg3条带，未见其他条带。口腔黏膜病理：表皮内水疱，基底细胞层上棘层松解（图1C）；未见基底细胞空泡样变性，炎症细胞浸润以淋巴细胞为主。