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光动力疗法联合EDTA进行根管侧支消毒的实验研究
编辑人员丨5天前
目的:探讨光动力疗法(PDT)联合乙二胺四乙酸二钠(EDTA)对根管侧支内粪肠球菌的杀灭效果。方法:选取64颗人单根管离体前磨牙制备人工根管侧支,建立粪肠球菌根管侧支感染模型。将感染模型按随机数字表法分为PDT组、PDT联合EDTA组、阳性对照组和阴性对照组,每组16个。PDT组于根管中注入40 μg/ml血卟啉单甲醚,避光孵育5 min后将激光器的光纤插入根管内上下提拉照射90 s(激光功率为45 mW);PDT联合EDTA组根管给予5 ml质量分数为17%的EDTA溶液冲洗1 min,无菌纸尖吸出EDTA后进行PDT处理,操作同PDT组;阳性对照组和阴性对照组根管分别给予5 ml质量分数为5.25%的NaClO溶液和质量浓度为9 g/L的NaCl溶液冲洗1 min。各组处理前、后分别用K锉于根管侧支内取样,进行平板菌落计数。处理后将各组牙根置于无菌脑心浸液肉汤(BHI)培养基中厌氧培养24 h,再用K锉取样,统计检出细菌的根管侧支个数。采用扫描电子显微镜观察处理后各组根管侧支内壁的形貌。结果:PDT联合EDTA组的杀菌率达99.56%,明显高于阴性对照组(1.98%)、阳性对照组(85.87%)和PDT组(87.53%),差异均具有统计学意义(均 P<0.05)。回复实验结果显示,PDT联合EDTA组检出细菌的根管侧支数为5个,明显少于阴性对照组(15个)、阳性对照组(12个)和PDT组(11个),差异均具有统计学意义(均 P<0.05)。扫描电子显微镜观察结果显示,PDT联合EDTA组未见明显粪肠球菌在根管侧支内壁附着。 结论:PDT联合EDTA对根管侧支内感染的粪肠球菌杀灭效果良好,有望为临床根管治疗中有效杀灭根管侧支内的粪肠球菌提供一种新方法。
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编辑人员丨5天前
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载血卟啉单甲醚仿生纳米分子探针研制及其显像与声动力治疗乳腺癌的实验研究
编辑人员丨5天前
目的:研制一种乳腺癌细胞膜(CCM)包被的载血卟啉单甲醚(HMME)仿生纳米分子探针,观察其体外靶向同源乳腺癌细胞的能力,并探讨其体外增强光声显像及声动力治疗(SDT)乳腺癌的效果。方法:通过化学裂解及反复冻融法提取乳腺癌4T1细胞膜,然后以双乳化法联合挤压法制备CCM包被的载HMME的聚乳酸-羟基乙酸共聚物仿生纳米粒作为分子探针(CHP-NPs)。检测纳米粒的基本表征;体外观察纳米粒对同源乳腺癌细胞的靶向能力及增强光声显像的效果;以单线态氧荧光探针(SOSG)验证纳米粒产生活性氧(ROS)的性能,并以CCK8细胞毒性实验评估其对乳腺癌细胞的SDT效果。结果:所制备的CHP-NPs大小均一,形态规则呈球形"核壳结构",粒径为(275.23±8.25)nm,表面电位为(-18.43±0.45)mV;激光共聚焦显微镜下观察到CHP-NPs能靶向同源4T1细胞;体外光声显像实验显示,纳米粒光声信号随其浓度的升高而增强;经SOSG探针检测,CHP-NPs在超声辐照下可产生ROS;单独CHP-NPs与4T1细胞共同孵育,不应用超声辐照时,对细胞存活率无明显影响,其浓度为0.6 mg/ml时细胞存活率仍达95%;经超声辐照时,CCK8实验显示该CHP-NPs对乳腺癌细胞具有显著的SDT效果。结论:成功制备出乳腺癌细胞膜仿生纳米分子探针,该探针具有良好的靶向同源肿瘤的能力,并可显著增强肿瘤光声显像及SDT效果。
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编辑人员丨5天前
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光动力疗法对大鼠龋齿模型的防龋效果及机制
编辑人员丨2023/8/6
目的 观察光动力疗法(PDT)对大鼠龋齿模型的防龋效果,并探讨其防龋机制.方法 将以变异链球菌为致龋菌建立大鼠龋齿模型成功的40只21 d鼠龄、断奶的无特定病原体级Wistar雄性大鼠随机分为生理盐水组、血卟啉单甲醚(HMME)-PDT组、单纯激光组、单纯光敏剂组和氟化钠组,每组8只.生理盐水组大鼠用浸有150 μL生理盐水的小棉球反复涂搽磨牙各面5 min;HMME-PDT组大鼠用浸有150 μL40 mg·L-1 HMME的小棉球放于磨牙各牙面上,避光孵育5 min后,用532 nm的半导体激光垂直照射磨牙各面,功率密度为140 mW·cm-2,照射时间为90 s,能量密度为12.6J·cm-2;单纯激光组大鼠不进行光敏剂HMME处理,仅用532 nm的半导体激光垂直照射磨牙各面,照射时间、功率密度、能量密度均同HMME-PDT组;单纯光敏剂组大鼠仅用浸有150 μL 40 mg·L-1 HMME的小棉球放于磨牙各牙面上,避光孵育5 min,不进行激光照射;氟化钠组大鼠用浸有150 μL2 g·L-1氟化钠溶液的小棉球反复涂搽磨牙各面5 min;各组大鼠每周处理1次,连续4周,每次处理后及时采集大鼠口腔变异链球菌进行培养,平板菌落计数记录细菌抑制情况,连续4周后处死大鼠,记录龋齿Keyes计分,扫描电镜观察牙齿表面形态.结果 时间因素对大鼠口腔变异链球菌的生长无影响(F=0.11,P>0.05),处理因素对大鼠口腔变异链球菌的生长有影响(F=230.89,P< 0.05),且处理和时间因素存在交互效应(F=6.36,P<0.05).第1、2、3、4周处理后,HMME-PDT组和氟化钠组大鼠牙齿变异链球菌菌落数均少于生理盐水组、单纯光敏剂组和单纯激光组(P<0.05);第1、2、3周处理后,HMME-PDT组大鼠牙齿变异链球菌菌落数均少于氟化钠组(P<0.05).各组大鼠平滑面龋齿均未检出Dx级龋损;HMME-PDT组和氟化钠组大鼠平滑面龋齿均未检出Dm级龋损.HMME-PDT组、氟化钠组大鼠平滑面龋齿E、Ds级龋损的Keyes计分均显著低于生理盐水组、单纯光敏剂组和单纯激光组(P<0.05),但HMME-PDT组与氟化钠组大鼠平滑面龋齿E、Ds级龋损的Keyes计分比较差异无统计学意义(P>0.05).各组大鼠窝沟龋齿中,仅生理盐水组检出Dx级龋损.HMME-PDT组、氟化钠组大鼠窝沟龋齿E、Ds、Dm级龋损Keyes计分均显著低于生理盐水组、单纯光敏剂组和单纯激光组(P<0.05),但HMME-PDT组与氟化钠组大鼠之间窝沟龋齿E、Ds、Dm级龋损的Keyes计分比较差异无统计学意义(P>0.05).扫描电镜显示,生理盐水组和单纯光敏剂组大鼠牙釉质表面粗糙,凸凹不平,有大量凹坑状脱矿区和划痕;单纯激光组大鼠牙釉质表面相对光滑,有少量圆形凹坑并可见凹坑内熔融状结构;氟化钠组大鼠牙釉质表面相对光滑,脱矿区较少,并可见到脱矿区的再矿化;HMME-PDT组大鼠牙釉质表面较平整,点状凹陷减少,深脱矿区少,且脱矿区域大多表浅.结论 HMME-PDT可通过减少致龋菌数量、改善牙齿表面结构等途径对大鼠致龋模型起到明显的预防作用.
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编辑人员丨2023/8/6
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声动力疗法辅助治疗大鼠牙周炎效果研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 研究血卟啉单甲醚(HMME)介导的声动力疗法(SDT)辅助治疗大鼠牙周炎的治疗效果,为SDT应用于牙周炎临床治疗提供理论基础及实验依据.方法 通过上颌第一磨牙牙颈部丝线结扎诱导建立54只Wistar大鼠牙周炎模型.6周后,将建模成功的54只大鼠随机分为3组,每组18只.(1)对照组:生理盐水冲洗大鼠上颌第一磨牙牙周袋;(2)单纯龈下刮治和根面平整(SRP)组:大鼠上颌第一磨牙行SRP治疗后,生理盐水冲洗;(3)SRP联合SDT组:大鼠上颌第一磨牙行SRP治疗,生理盐水冲洗,颊侧牙龈局部注射l mL HMME(40 μg/mL)避光孵育90 min后,联合频率1 MHz、强度3 W/cm2的超声治疗10 min.SDT隔天治疗1次,治疗后6、10、14d每组分别处死6只大鼠,取上颌标本,行组织病理学检测及免疫组化分析.结果 SRP联合SDT组较对照组及单纯SRP组炎症细胞显著减少,免疫炎症因子核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达呈弱阳性,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)阳性细胞明显减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论 SDT辅助治疗大鼠牙周炎效果显著.
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编辑人员丨2023/8/6
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血卟啉单甲醚光动力疗法治疗鲜红斑痣的临床观察
编辑人员丨2023/8/6
目的 观察血卟啉单甲醚(hematopophyrin monomethyl ether,HMME)光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)治疗鲜红斑痣的临床疗效和不良反应.方法 鲜红斑痣患者91例,粉红型34例,紫红型53例,增厚型4例,静脉注射HMME 5 mg/kg后,采用波长532 nm激光照射,首次治疗8周后进行第二次治疗.每次治疗后4d、8周随访,进行疗效和安全性评价.结果 PDT治疗1次后,鲜红斑痣患者的基愈率、总显效率、总好转率分别为18.7%、58.2%、85.7%,不同鲜红斑痣分型疗效比较,粉红型优于紫红型和增厚型;不同部位皮损疗效比较,颈部疗效最佳,其次是面外侧区,面正中区疗效最差.二次治疗后的基愈率、总显效率、总好转率分别为44.4%、60.0%、93.3%,与治疗1次的疗效比较,差异具有非常显著意义(P<0.001).所有患者治疗过程中均出现不同程度的灼热、疼痛、肿胀、结痂反应,无需处理,1~2周内自行消退.治疗的主要不良反应为局部出现轻微一过性色素沉着及色素减退,发生率分别为36.3%、6.6%,无需特殊处理,3~9个月时自行恢复.结论 HMME-PDT治疗鲜红斑痣高效、安全,不良反应发生率低.
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编辑人员丨2023/8/6
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载HMME微球对卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨自制载血卟啉单甲醚(HMME)的聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)高分子微球HMME/PLGA对卵巢癌SKOV3细胞的急性细胞毒作用及增殖能力的影响.方法 实验分为5组:(Ⅰ)单纯细胞(对照组),(Ⅱ)超声+细胞,(Ⅲ)超声+ PLGA+细胞,(Ⅳ)超声+HMME+细胞,(Ⅴ)超声+ HMME/PLGA+细胞.超声辐照声强0.50 W/cm2,频率1 MHz,Ⅳ组和Ⅴ组HMME浓度为20μg/ml.以CCK8法检验各组不同超声处理时间(10 s、30 s、60 s、90 s)对卵巢癌SKOV3细胞存活率的影响,并于上述实验基础上检测各组对SKOV3细胞12 h、24 h、36 h、48 h增殖能力的影响.结果 急性细胞毒实验及抑制增殖实验显示:Ⅴ组(US+ HMME/PLGA+ cell)较其余各组能明显降低SKOV3细胞的存活率(P<0.05),抑制肿瘤细胞的增殖活性(P<0.05).结论 自制的HMME/PLGA高分子微球,对卵巢癌SKOV3细胞有明显的杀伤、抑制功能,有望应用于体内的卵巢癌治疗.
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编辑人员丨2023/8/6
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HMME介导的荧光光谱法在早期口腔癌诊断中的应用价值
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨血卟啉单甲醚(HMME)介导的荧光光谱法对早期口腔癌的诊断价值.方法 选取30只雄性金黄地鼠,随机分为A、B和C三组,每组10只,A组动物颊囊仅涂抹100%丙酮,B组和C组动物颊囊分别涂抹0.5%DMBA溶液5周和9周,最终A组选用正常组织位点,B组选用异常增生位点,C组选用早期癌组织位点,进行光谱诊断,检测各位点的K值和S值.结果 早期癌组织位点K和S分别为(68.28±9.11)和(173.01±14.33),明显高于正常组织和异常增生组织位点(P<0.05);异常增生组织位点K和S分别为(14.72±2.65)和(57.28±8.3),明显高于正常组织位点(P<0.05);参数K和S判断早期口腔癌的ROC曲线下面积分别为0.979和0.976,P<0.05;K和S截断值分别为18.49和71.51时,灵敏度分别为90.60%和87.50%,特异度分别为100.00%和98.70%.结论 HMME介导的荧光光谱法对早期口腔癌具有较高的诊断价值,值得进一步研究.
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编辑人员丨2023/8/6
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声敏型脂质纳米粒联合低功率聚焦超声对HepG2细胞增殖的影响及其体外CT成像的实验研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 制备一种载血卟啉单甲醚(hematoporphyrin monomethyl ether,HMME)包裹全氟溴辛烷(1-Bromoheptadecafluorooctane,PFOB)及阿霉素(doxorubicin,DOX)的声敏型脂质纳米粒(sound sensitive nano-liposomes,SNLs),探究其联合低功率聚焦超声(low intensity focused ultrasound,LIFU)体外释药、产生活性氧的能力以及对HepG2细胞增殖的影响,和其体外CT成像的能力.方法 采用薄膜水化法制备SNL;检测其一般性质;高效液相色谱法检测其体外释药;荧光分光光度计和激光共聚焦显微镜观察其产生活性氧的能力;CCK-8实验检测其对HepG2细胞增殖的影响,CT观察其体外CT成像.结果 成功制备SNL,粒径为(282.53±6.95)nm;LIFU处理8h内SNL释放阿霉素达(83.45±2.97)%,释药速度随LIFU强度提高而加快;以DPBF(1,3-二苯基异苯并呋喃)为活性氧探针,产生活性氧的相对量随SNL中血卟啉单甲醚增加及LIFU强度增高而增多;以DCFH-DA(2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐)为活性氧探针,激光共聚焦观察显示SNL+ LIFU组较SNL组绿色荧光强;CCK-8检测结果显示SNL +LIFU组的细胞存活率明显较DOX组,载血卟啉单甲醚包裹全氟溴辛烷的脂质纳米粒(hematoporphyrin monomethyl ether nano-liposomes,HNL)+LIFU组和SNL组低(P<0.05),可见SNL+LIFU明显增强了对HepG2细胞生长的抑制作用;CT成像结果显示SNL的CT值较对照组和空白组高,且CT值随PFOB浓度增大而增高.结论 成功制备的声敏型脂质纳米粒的声动力效果呈HMME浓度及LIFU强度依赖性,药物释放速度受LIFU控制,可联合化疗及声动力治疗增强HepG2细胞生长的抑制效果,同时具有良好的CT成像效果.
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编辑人员丨2023/8/6
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载血卟啉单甲醚高分子纳米粒用于光声显像引导下声动力治疗:实验研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 制备一种载血卟啉单甲醚(HMME)的多功能分子探针,评估其体外光声成像及声动力治疗(SDT)效果.方法 采用双乳化法制备载HMME的聚乳酸-乙醇酸(PLGA)纳米粒(HMME@PLGA),观察纳米粒的基本表征和体外增强光声显像情况,通过流式细胞仪检测人乳腺癌MDA-MB-231细胞与HMME@PLGA共孵育后在超声辐照下产生活性氧的能力,并在细胞水平验证其SDT效果.结果 所制备的HMME@PLGA纳米粒大小均一,形态规则,平均粒径为(333.67±17.50)nm,表面电位为(-10.57±1.98)mV,包封率为75.62%,载药量为2.90%,浓度为1 mg/ml的纳米粒与人乳腺癌MDA-MB-231细胞共孵育24 h的细胞存活率为87.21%.随浓度增加,纳米粒光声信号逐渐增强.经超声辐照,HMME@PLGA纳米粒能使人乳腺癌MDA-MB-231细胞产生大量活性氧,并产生明显细胞毒性作用,使细胞大量死亡,Calcein-AM/PI染色呈红色荧光;通过吖啶橙染色观测到细胞溶酶体结构消失.结论 本研究成功制备了包裹HMME的高分子纳米粒,可实现体外光声成像引导下的SDT.
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编辑人员丨2023/8/6
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二氧化锰包覆的聚乳酸羟基乙酸共聚物载血卟啉单甲醚纳米粒的药动学检测和抑瘤效果
编辑人员丨2023/8/6
目的:考察二氧化锰包覆的聚乳酸羟基乙酸共聚物载血卟啉单甲醚(HMME)纳米粒(PLGA/HMME@MnO2)的药动学和对肿瘤的抑制作用.方法:对SD大鼠尾静脉注射HMME、PLGA/HMME和PLGA/HMME@MnO2,采用高效液相色谱法考察3种制剂在大鼠体内的药动学特征.S180荷瘤小鼠肿瘤模型建立后,动物分组如下:生理盐水组、生理盐水+激光组、HMME+激光组、PLGA/HMME+激光组、PLGA@MnO2、PLGA/HMME@MnO2+激光组,其中HMME给药剂量为3.0 mg/kg,尾静脉注射给药,2 d给药一次,共5次.给药4 h后在肿瘤部位施加532 nm激光(1.5 W/cm2,1.5 min)照射.记录分析相对肿瘤体积变化和体重变化.结果:与HMME相比,PLGA/HMME和PLGA/HMME@MnO2均延长了药物在血液中的循环时间,半衰期分别为HMME的2.71和9.32倍.治疗结束时,PLGA/HMME@MnO2+激光组相对肿瘤体积最小(1.49±0.44).结论:PLGA/HMME@MnO2延长了HMME的血液循环时间,并提高了其光动力抗肿瘤效果.
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编辑人员丨2023/8/6
