临床观察补肾促卵冲剂治疗多囊卵巢综合征(PCOS)导致不孕症的有效性及安全性,并运用代谢组学探讨其作用机制.选取94例肾虚血瘀型PCOS不孕患者,试验组和对照组各47例.观测基础体温(BBT),B超监测卵泡、卵巢体积、子宫内膜及排卵和妊娠情况,血清性激素水平[促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)、游离睾酮(FT)、雄烯二酮(A2)、抑制素B(INHB)、抗缪勒管激素(AMH)],凝血功能,中医证候积分,血常规,尿常规,肝、肾功能等,并运用代谢组学对26例患者(试验组与对照组各13例)血清代谢物进行比较.结果显示,试验组总有效率和妊娠率明显高于对照组(P＜0.001),提示补肾促卵冲剂能明显调节性激素和卵巢功能,可显著降低LH、T、FT、A2及INHB水平(P＜0.05或P＜0.01)和LH/FSH比值(P＜0.05),提高P水平(P＜0.05),促进排卵,增加内膜厚度,改善中医证候积分,无不良反应.代谢组学共筛选出24个差异代谢物,且肾虚血瘀型PCOS不孕患者的性激素与差异代谢物之间存在相关性.结果表明,补肾促卵冲剂可能通过脂质、氨基酸代谢等途径调节激素水平.

研究补肾促卵冲剂治疗高泌乳素血症导致不孕症的治疗作用及安全性.选择60例肾虚血瘀型高泌乳素血症导致不孕症患者,分为试验组(补肾促卵冲剂+甲磺酸溴隐亭片安慰剂)和对照组(甲磺酸溴隐亭片+补肾促卵冲剂安慰剂),观察排卵率、妊娠率、血清性激素、基础体温(BBT)及中医证候积分.结果显示,试验组临床有效率90.00％,对照组临床有效率80.00％;试验组能够显著降低泌乳素(PRL)水平、增加妊娠率,在增加BBT双相比例、改善中医证候积分、提高排卵率方面优于对照组.结果表明,补肾促卵冲剂治疗高泌乳素血症导致排卵障碍性不孕症疗效确切,安全可靠.

采用转录组学探究补肾促卵冲剂治疗高泌乳素血症导致不孕的作用机制,并进行动物实验验证.建立高泌乳素血症导致不孕症的小鼠模型后分组:正常组,模型组,补肾促卵冲剂高、中、低剂量组,溴隐亭组,观察动情周期,性腺指数,血清性激素,卵巢、乳腺组织形态,卵泡计数及生育力.结果显示,补肾促卵冲剂可有效恢复小鼠动情周期,下调泌乳素(prolactin,PRL)、促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH),上调雌二醇(estradiol,E2)水平,有效增加始基卵泡及窦状卵泡数量,提高排卵率及生育力.通过RNA测序结合GO功能和KEGG通路富集分析,补肾促卵冲剂可能通过cAMP-PKA、Kiss-1/GPR54、Hippo等信号通路调节卵巢、垂体等细胞中脂质与抗氧化酶的代谢,发挥治疗作用.动物实验结果表明,补肾促卵冲剂能上调血清多巴胺(DA)水平和垂体DRD2表达,下调下丘脑与卵巢cAMP水平,及垂体、卵巢PKA、CREB、p-CREB蛋白表达,通过调节cAMP-PKA信号通路达到治疗高泌乳素血症导致不孕的作用.

肾虚血瘀是排卵障碍性不孕的主要原因,肾虚是主要病理机制,血瘀是主要病理表现,是一直贯穿始终的重要因素.“补肾促卵冲剂”在中医理论指导下,继承前辈多年临床经验,结合排卵障碍性不孕的病因病机特点和现代药理研究成果,精选成方,既保持了中医辨证施治和“异病同治”的特色,又体现了“病证结合”的优越性.在“补肾促卵冲剂”治疗排卵障碍性不孕系统研究中,该方无急性毒性反应,未测出LD50.其高、中、低剂量组在生殖遗传毒性和致畸及围产期实验中,均未发现不良反应和毒副作用.在药效学实验中发现,其对大鼠卵泡发育与成熟、黄体形成起到明显促进作用.以“肾虚血瘀”为切入点,对无排卵型异常子宫出血、多囊卵巢综合征、高催乳素血症、未破裂卵泡黄素化综合征、黄体功能不足、卵巢早衰/卵巢储备功能下降6种排卵障碍性不孕的有效性和安全性进行临床观察,验证了其贡献度,体现了“辨病与辨证相结合”的特色,诠释了“异病同治”的治疗原则,为临床提供科学依据.

目的 基于TLRs/NF-κB信号通路探究补肾益气化瘀冲剂对骨质疏松大鼠血管形成的作用.方法 取60只SPF级雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、冲剂组和阳性对照组,每组15只,除假手术组外其余3组大鼠行双侧卵巢摘除术制备骨质疏松模型,假手术组仅进行手术,不摘除卵巢作为对照.冲剂组大鼠灌胃给药5 g/kg补肾益气化瘀冲剂,阳性对照组大鼠给予0.5 mg/kg阿仑磷酸钠灌胃处理,模型组大鼠和假手术组大鼠进行等量生理盐水灌胃.连续给药12周后处死大鼠,对大鼠股骨组织进行骨密度检测、HE染色观察、Micro-CT三维重建分析、CD31荧光免疫分析和血液灌注成像分析;ELISA检测血清中VEGF和HIF-1α浓度;Western blot检测p50/p-p50和p65/p-p65蛋白的表达.结果 与假手术组比较,模型组大鼠骨密度低(P<0.05),骨小梁生长稀疏,血管形成较慢,数目较少,血清中VEGF和HIF-1α浓度明显下降(P<0.05),股骨组织中p50/p-p50、p65/p-p65蛋白表达明显升高;与模型组比较,冲剂组和阳性对照组大鼠骨小梁生长良好,血管形成数目较多,骨密度明显增加,血清中VEGF和HIF-1α浓度明显上升(P<0.05),p50/p-p50、p65/p-p65蛋白表达水平明显降低(P<0.05).结论 补肾益气化瘀冲剂可能通过调控TLRs/NF-κB信号通路,促进骨质疏松大鼠血管形成,对缓解骨质疏松有重要作用.