目的 用Z-score归一化法整合观察性恐惧习得(OFL)模型小鼠的多项行为指标,探讨小鼠OFL的性别差异.方法 ①将雌性和雄性C57BL/6J小鼠分别分为对照组和模型组.在OFL训练阶段,令小鼠目睹同类小鼠遭受足底电击(模型组)或不遭受足底电击(对照组)以建立OFL模型,24 h后进行观察性恐惧回忆测试.分别记录训练阶段和24h后恐惧回忆阶段雌、雄小鼠的僵住行为、旷场回避行为和社会交互行为,比较各行为的性别差异.应用Z-score归一化整合3种行为参数,以综合情绪Z值比较小鼠OFL反应的性别差异.②雌性小鼠行双侧卵巢切除术制备去势小鼠,检测OFL实验中3种恐惧行为,以综合情绪Z值比较去势模型组、假手术模型组与各自对照组以及假手术模型组与去势模型组之间的差异.结果 ①在训练阶段,雌、雄模型组小鼠的僵住时间和旷场回避时间均较同性别对照组显著增加(P<0.05),雌性模型组的社会交互次数较同性别对照组显著降低(P<0.01),但雌、雄模型组之间的僵住行为、旷场回避行为和社会交互行为均无显著差异.24 h后恐惧回忆阶段,雄性模型组的僵住时间较同性别对照组仍显著升高(P<0.01),雌性模型组与同性别对照组之间已无明显差异,雌、雄模型组的旷场回避和社会交互行为与同性别对照组相比均无显著差异,但与雌性模型组相比,雄性模型组的僵住时间显著增加(P<0.01)、旷场回避无差异、社会交互次数显著降低(P<0.01);根据整合后的综合情绪Z值,雌、雄模型组在训练阶段的恐惧情绪反应较同性别对照组强烈(P<0.01),雌雄之间无明显差异;在24h后恐惧回忆阶段,雄性模型组的恐惧情绪反应仍较同性别对照组强烈(P<0.05),且明显强于雌性模型组(P<0.01).②去势雌性模型组小鼠在训练阶段较去势对照组恐惧情绪反应明显增强(P<0.05),但与假手术模型组之间无差异;在24h后恐惧回忆阶段,去势模型组恐惧情绪反应仍强于去势对照组,较假手术模型组也显著增强(P<0.01).结论 在OFL中,雌雄小鼠均能通过目睹同类遭受痛苦而获得恐惧,基于多种行为指标整合后的综合情绪Z值证明,雄鼠习得性恐惧比雌鼠更强.通过双侧卵巢切除消除雌激素的影响后,去势雌鼠的OFL反应与雄鼠相似.

目的 探究朱砂安神丸拮抗大鼠条件性恐惧及其睡眠障碍的作用.方法 通过条件性恐惧实验监测系统观察各组实验动物的僵直反应时间,考察朱砂安神丸对条件性恐惧记忆习得、条件性恐惧记忆消退,以及在此过程中觉醒-睡眠时间及睡眠时相变化的影响.结果 条件性恐惧记忆习得测试结果显示,在第1～5个周期,模型组僵直反应时间比空白组明显增加(P<0.01),给药组僵直反应时间较模型组无明显差异;脑电描记结果显示,在第1～2个周期,与模型组相比,给药组Wake时间缩短,百分比降低(P<0.05);第1～3个周期睡眠总时间延长,百分比增加(P<0.05);REMS时间延长(P<0.05);NREM时间差异无统计学意义;REMS与NREM的睡眠时间百分比无明显变化.条件性恐惧记忆消退测试结果显示,与模型组相比,给药组在第4、5天僵直反应时间减少(P<0.05);脑电描记结果显示,与模型组相比,给药组在第4、5天Wake时间缩短,百分比降低(P<0.05);睡眠总时间延长,百分比增加(P<0.05);NREM时间增加(P<0.05).第4天REM时间增加(P<0.05);REMS与NREM的睡眠时间百分比无明显变化.结论 朱砂安神丸能够促进条件性恐惧消退,并能拮抗由条件性恐惧引起的睡眠障碍.

目的 探讨朱砂安神丸对条件性恐惧大鼠恐惧记忆的影响及作用机制.方法 将90只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、给药组,每组30只;给药组大鼠灌胃给予朱砂安神丸混悬液(给药体积为每100 g大鼠体质量0.9 mL),空白组、模型组大鼠给予等量的双蒸水,各组大鼠均连续干预7d.末次给药后复制条件性恐惧模型.通过条件性恐惧实验监测系统观察各组大鼠的僵直反应时间,考察朱砂安神丸对恐惧记忆的影响;通过电生理实验和透射电镜技术,考察朱砂安神丸对海马功能结构可塑性的影响.结果 与模型组比较,给药组(朱砂安神丸)能有效促进条件性恐惧大鼠恐惧记忆消退,恐惧记忆习得阶段及消退阶段僵直反应时间明显减少,运动时间、运动距离明显增加,诱发海马部位LTP其PS幅值明显减少(P＜0.05,P＜0.01);海马神经元突触数目较多,突触各部分结构完好、界限清晰,海马突触活性区长度及PSD厚度明显增大,突触间隙宽度明显减小(P＜0.05,P＜0.01);海马神经元细胞各结构完整清晰,细胞核大,细胞浆内细胞器较多、形态较好.结论 朱砂安神丸具有促进恐惧记忆消退的作用,其作用机制与保护海马神经元、调节海马突触结构和功能可塑性有关.

目的 建立小鼠观察性恐惧习得模型,探讨先前厌恶经历对小鼠观察性恐惧行为的影响,为深入研究恐惧发生的神经生物学机制提供可靠的动物模型建立方法.方法 ①电击刺激诱导建立观察性恐惧习得模型.实验动物:观察小鼠和演示小鼠.观察小鼠接受一次足底电击,24 h后观看演示小鼠接受条件恐惧训练(30 s声音结束前给予2 s、1 mA电击,共10次),通过评价观察小鼠对声音信号反应的僵直不动时间,判断其恐惧获得程度.②观察去除先前电击经历对小鼠观察性恐惧习得行为的影响;③观察去除先前电击经历同时增加造模时间(由1d延长至7d)对小鼠观察性恐惧习得的影响.④更换观察场景,利用社会交互实验测定观察小鼠直接连续10 d观看演示小鼠被CD-1鼠攻击后在交互区域停留时间,评价其观察性恐惧获得程度.结果 ①在电击致观察性恐惧习得实验中,有电击经历的观察小鼠和对照组相比僵直不动时间显著增加(P<0.05);②去除电击经历后,观察小鼠的僵直不动时间与对照组相比无显著改变;③去除电击经历同时增加造模时间,观察小鼠的僵直不动时间同样无显著增加;④在社会打斗致观察性恐惧实验中,无先前经历的观察小鼠在交互区停留时间减少(P<0.01),在角落停留时间增加(P<0.05).结论 在电击刺激诱导的观察性恐惧习得模型中,具有先前厌恶经历的观察小鼠更易于诱发观察性恐惧;在打斗刺激诱导的观察性恐惧习得模型中,观察性恐惧行为的产生不需要观察小鼠有先前类似厌恶经历.