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趋磁细菌AMB-1对小鼠的生物相容性探究
编辑人员丨2024/6/15
目的 在体外和体内条件下探究趋磁细菌AMB-1对BALB/c小鼠的生物相容性.方法 透射电镜观察AMB-1形貌特征;显微镜拍摄AMB-1在血清中的运动,Image J计算运动速度;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测AMB-1对小鼠乳腺癌细胞4T1和成纤维细胞L929细胞毒性;流式细胞术评价AMB-1对BALB/c小鼠骨髓来源树突细胞成熟影响;改良寇氏法计算出AMB-1对BALB/c小鼠的半数致死剂量;普鲁士蓝染色BALB/c小鼠心、肝、脾、肺、肾脏器观察AMB-1在小鼠体内的分布情况;流式细胞术检测AMB-1对BALB/c小鼠脾脏树突细胞的影响;检测小鼠BALB/c血生化指标评估其安全性;苏木精-伊红染色BALB/c小鼠心、肝、脾、肺、肾脏器,观察其组织形态变化.结果 37℃条件下,AMB-1在血清中可保持运动至少120 min;AMB-1菌量超过3.3×106 个时,对小鼠乳腺癌细胞4T1和成纤维细胞L929具有毒性,随菌量增加,毒性越大;AMB-1可促进骨髓来源树突细胞CD86+、CD80+双阳细胞的比例增大.AMB-1对BALB/c小鼠半数致死剂量为2.59×1010 个.AMB-1对小鼠脾脏树突细胞成熟的影响随着时间延长逐渐减弱;血生化指标在正常范围内;小鼠主要脏器无明显组织形态学变化.结论 趋磁细菌AMB-1具有良好生物相容性,在体内不会引发严重免疫炎症等不良反应,具有体内应用潜能.
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编辑人员丨2024/6/15
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磁小体介导的纳米复合物磁小体/Polo样蛋白激酶1基因的干扰质粒/柔红霉素的制备及表征检测
编辑人员丨2023/8/6
目的 将热激启动子(pHSP)调控的Polo样蛋白激酶1(shPLK1)以及柔红霉素(DOX)耦联于载体磁小体(BMs)上,制备复合物磁小体/PLK1基因/柔红霉素(BMs/pHSP-shPLK1/DOX)的干扰质粒并检测其表征.方法 改变趋磁细菌培养液中成分优化趋磁细菌AMB-1的培养条件;分离纯化磁小体,在电镜下观察磁小体的形态;利用聚乙烯亚胺(PEI)将质粒pHSP-shPLK1和DOX耦联至BMs构建复合物BMs/pHSP-shPLK1/DOX,检测复合物的粒径及电荷;观察在交变磁场(AMF)中复合物的产热效应及DOX的释放率;细胞免疫荧光检测复合物处理后U20S细胞中绿色荧光蛋白(GFP)的表达.结果 趋磁细菌AMB-1的最佳生长条件为:以20 μmol/L FeSO4为铁源,以800 mg/L NaNO3为氮源,以200 mg/L的琥珀酸为碳源;电镜显示磁小体大小均匀,分散度好;复合物BMs/pHSP-shPLK1/DOX的粒径为(129.5±9.7) nm,Zeta电位为(-11.7±2.9)mV;在AMF下,复合物可在3 min之内升温至42℃,并维持30 min,该条件下,在24 h及48 h,50％胎牛血清(FBS)组上清液中DOX含量均明显高于磷酸盐缓冲液(PBS)组(t24 h=6.887,P24 h=0.020;t48 h=17.145,P48 h =0.000),50％ FBS中DOX的释放率可达到54％;复合物处理后的细胞可见明显的GFP蛋白表达 .结论 成功制备BMs介导的复合物BMs/pHSP-shPLK1/DOX.
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编辑人员丨2023/8/6
