目的 建立门冬氨酸鸟氨酸原料药的生物安全性检验标准方法.方法 根据2020年版《中国药典》中通则方法进行异常毒性、降压物质、升压物质的生物安全性检验标准研究,设定检查限值,对3批门冬氨酸鸟氨酸原料药进行相关项目的检查验证.结果 3批门冬氨酸鸟氨酸原料药样品的半数致死量可信限下限的1/4分别为754.7、752.0、747.7 mg·kg-1,按25 mL·kg-来设置,门冬氨酸鸟氨酸的试验浓度限值为30 mg·mL-1;3批原料药给药333、267 mg·kg-1时,均未超过0.1μg·kg-1磷酸组胺对照品所致降压水平的1/2,符合结果判定规定的反应值范围,建议设定上限267 mg·kg-1为门冬氨酸鸟氨酸降压物质检查的限值;67 mg·kg-1给药剂量所致的反应值均小于0.45 IU·kg-1对照品,约为1/2,建议将临床用药剂量的1/5即67 mg·kg-1作为升压物质检查的上限值.3批原料药生物安全性检查的结果均符合规定.结论 所用方法可用于门冬氨酸鸟氨酸原料药异常毒性、降压物质和升压物质的检查.

目的:探讨经赤芝菌发酵不同时间钩吻（赤芝钩吻）的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱与毒性的关系。方法:用赤芝菌对钩吻进行双向固体发酵炮制，取发酵9、11、13、15、17、19、21、23、25、27 d（第27天取样2次）共10批次（批号S1~S10）赤芝钩吻，采用自行建立的HPLC法测定指纹图谱。将100只无特定病原体级ICR小鼠随机分为10组（每组10只，雌雄各半），以发酵11 d赤芝钩吻对小鼠的半数致死剂量为毒性测定给药浓度配制S1~S10赤芝钩吻溶液，分别给10组小鼠灌胃，观察各组小鼠的死亡情况。根据灰色关联度计算公式计算S1~S10赤芝钩吻指纹图谱共有色谱峰与毒性（对小鼠的致死率）的关联度系数，分析赤芝钩吻毒性的主要贡献成分。结果:S1~S10赤芝钩吻指纹图谱共标定17个共有色谱峰；S1~S10赤芝钩吻对小鼠的致死率分别为1.00、1.00、0.80、0.70、0.60、0.60、0.50、0.40、0、0。灰色关联度分析显示，7、3、6、9、1、8、17、12号共有色谱峰与毒性的关联度系数分别为0.868、0.838、0.830、0.828、0.824、0.820、0.818和0.802，这8个色谱峰所代表的化学成分为赤芝钩吻毒性的主要贡献成分。结论:赤芝钩吻随发酵时间延长毒性逐渐降低，发酵27 d时毒性最低。发酵后钩吻的毒性是多成分共同作用的结果，毒性主要贡献成分的辨识可为发酵钩吻的质量控制和发酵工艺优化提供参考。

目的:探讨磷酸三（2-氯丙基）酯（TCIPP）和磷酸三正丁酯（TnBP）对斑马鱼胚胎的生长发育毒性及潜在分子机制。方法:以斑马鱼为模型，采用半静态法，将受精后2 h（hpf）斑马鱼胚胎暴露于TCIPP和TnBP（0.1、1、10、100、500和1 000 μmol/L）水溶液120 h，测定其生存率和孵化率，以及环境相关浓度（0.1和1 μmol/L）下120 hpf斑马鱼转录组的变化。结果:TCIPP和TnBP对斑马鱼胚胎的半数致死浓度分别是155.30和27.62 μmol/L（96 hpf）、156.50和26.05 μmol/L（120 hpf）。暴露于100 μmol/L的TCIPP和10 μmol/L的TnBP后斑马鱼72 hpf孵化率分别为（23.33±7.72）%和（91.67±2.97）%，与对照组相比均降低，差异有统计学意义（均 P<0.05）。转录组结果显示，TnBP暴露导致的差异基因数多于TCIPP，并呈现“剂量-效应”关系。IPA通路富集分析提示共富集32条通路，涉及氧化应激、能量代谢、脂质代谢和核受体相关通路等。TCIPP和TnBP共同富集到3条通路，分别为甲状腺激素受体/视黄酮X受体和组成型雄烷受体/视黄酮X受体通路等。TnBP单独富集到肝脏X受体/视黄酮X受体和氧化应激相关通路等。 结论:TCIPP和TnBP对斑马鱼均具有生长发育毒性，TnBP毒性效应更强，TCIPP和TnBP诱导斑马鱼生长发育毒性的作用机制有所不同。

目的:探讨过量碘诱导绒毛膜滋养层细胞凋亡与早期妊娠稽留流产的相关机制。方法:选择2019年9月至2022年9月于天津市中心妇产科医院就诊的孕周≤12周的不明原因早期妊娠稽留流产患者（MA组， n = 43）和正常孕妇（对照组， n = 64）作为研究对象，采集绒毛组织，进行增殖细胞核抗原Ki67免疫组织化学检测和细胞凋亡检测；采集尿样，进行尿碘含量检测。另用不同剂量碘刺激培养人绒毛膜滋养层细胞株（HTR8/SVneo细胞）24 h，采用细胞计数试剂盒8（CCK8）检测细胞增殖活力，流式细胞术检测细胞凋亡情况。 结果:（1）对照组尿碘为159.70（114.21，218.73）μg/L，MA组为210.80（143.10，336.70）μg/L，二者比较差异有统计学意义（ Z = 2.26， P = 0.024）。（2）MA组绒毛组织Ki67免疫组织化学染色阳性和强阳性比例明显低于对照组（χ 2 = 37.00， P < 0.001）。（3）MA组绒毛组织细胞凋亡率明显高于对照组[（26.24 ± 1.06）%比（2.96 ± 1.97）%， t = 92.23， P < 0.001]。（4）50、100、300、500 μg碘组HTR8/SVneo细胞增殖率均明显低于0 μg碘组（均 P < 0.05），其中500 μg碘组低于半数致死量。（5）0、50、500 μg碘组细胞凋亡率分别为（8.79 ± 0.12）%、（9.56 ± 0.08）%、（19.86 ± 0.05）%，3组间比较差异有统计学意义（ F = 7.32， P = 0.007）；其中，50、500 μg碘组均高于0 μg碘组，且500 μg碘组高于50 μg碘组（均 P < 0.05）。 结论:早期妊娠稽留流产患者尿碘含量明显增高，过量碘摄入可能导致绒毛膜滋养层细胞的增殖活力下降，细胞凋亡增多。

目的:探讨OX40L作为H7N9全病毒灭活疫苗(whole-virion inactivated vaccine，WIV)免疫佐剂的保护效果。方法:将50只BALB/c小鼠随机分为5组进行肌肉免疫：未免疫组(对照组)、单独疫苗组(1.5 μg WIV)、佐剂疫苗组(1.5 μg WIV＋0.6/1.8/3.0 μg OX40L/Fc)。免疫后21 d，通过ELISA和血凝抑制(hemagglutination inhibition，HI)试验检测免疫小鼠血清中各类抗体水平，并使用50×半数致死量(median lethal dose，LD 50)的H7N9流感病毒适应株攻击小鼠，记录小鼠体重变化及存活率，以评价OX40L/Fc与H7N9 WIV共免疫后的保护效果。免疫后7 d，通过流式细胞术探究OX40L佐剂效应的机制。 结果:与单独疫苗组相比较，共免疫OX40L/Fc可使小鼠血清中的特异性IgG抗体水平显著升高，3组佐剂疫苗组(1.5 μg WIV＋0.6/1.8/3.0 μg OX40L/Fc)的抗体几何平均滴度(lgGMT)分别为3.79、4.40和4.20。共免疫显著增加了IgG1和IgG2a抗体的滴度，但对Th1/Th2免疫应答平衡没有显著影响。与单独疫苗组相比较，共免疫1.8 μg和3.0 μg OX40L/Fc小鼠的HI抗体水平分别为6.25±0.50和5.70±0.97，差异有统计学意义( P<0.05)。共免疫1.8 μg和3.0 μg OX40L/Fc能够有效保护80%和75%的小鼠抵抗致死剂量病毒的攻击，损失的体重少于单独疫苗组，1.8 μg OX40L/Fc为最佳浓度。流式细胞术显示，与单独疫苗组相比，OX40L(0.6/1.8/3.0 μg)能够促进趋化因子受体CXCR5和程序性细胞死亡蛋白PD-1高效表达，增强H7N9 WIV免疫后淋巴结中滤泡辅助性T(Tfh)细胞的增殖( P均<0.05)。 结论:OX40L能够通过增殖Tfh细胞以增强H7N9 WIV诱导的抗体反应。

[目的]了解2023年重庆市大足区致倦库蚊成蚊和家蝇成蝇对常见杀虫剂的抗药性情况,为合理使用卫生杀虫剂提供科学依据.[方法]分别采用成蚊接触筒法和成蝇点滴法进行抗药性测定.[结果]2023年重庆市大足区致倦库蚊成蚊对0.25%氯菊酯、0.025%高效氯氰菊酯、0.025%溴氰菊酯、5%马拉硫磷、0.1%残杀威24 h死亡率分别为37.35%、21.92%、28.33%、96.43%、95.38%.家蝇成蝇对95.8%高效氯氰菊酯、97%毒死蜱、90%溴氰菊酯、95%敌敌畏4种杀虫剂测定的半数致死剂量(LD50)值分别为雌性2.572、0.329、0.406、0.492 μg,抗性倍数分别为829.68、7.65、53.42、46.42.[结论]大足区致倦库蚊成蚊及家蝇成蝇对常用杀虫剂均产生了不同程度的抗药性,因此对已产生较高抗药性的杀虫剂应暂停使用,对可能抗性和低抗水平的杀虫剂可采取药物混配、轮换施药等方式使用.同时应继续做好抗药性变化情况的监测,指导杀虫剂的合理使用.

目的 了解黄石市2021-2023年蝇类种群密度、分布、季节消长规律及家蝇对常见杀虫剂的抗药性水平,为科学防控提供依据.方法 2021-2023年采用笼诱法对蝇类密度监测;2021年和2023年采用点滴法对家蝇抗药性调查,计算半数致死剂量(LD50)及抗性倍数.结果 2021-2023年全市共捕获蝇类739只,平均密度为4.40只/笼,其中麻蝇、厩腐蝇、家蝇分别占总数的46.55％、13.94％和13.26％.不同生境中,居民区蝇类密度最高,餐饮外环境密度最低.蝇类总体密度高峰出现在每年5-6月.家蝇对氯菊酯、高效氯氰菊酯均表现为敏感;对毒死蜱、溴氰菊酯、高效氯氟氰菊酯则产生了抗药性.结论 初步掌握了黄石市蝇类种群构成及季节消长趋势,黄石城区家蝇种群对5种杀虫剂产生不同程度抗性.建议在今后蝇类防控工作中继续加强日常监测,科学合理用药,以延缓抗药性的发展.

本文根据国标方法系统地分析了云参的营养组分,并开展大鼠急性经口毒性试验和三项遗传毒性试验对云参进行食用安全性评价.结果表明,云参中蛋白质、脂肪和多糖的含量分别为9.190、3.700 mg/100g和12.100％,氨基酸总含量达5.238 g/100g,含有K、Ca等21种矿物元素,含量最高的K为8 120.000 0 mg/kg;含有维生素A、维生素C、维生素E和B族维生素4种维生素,其中B族维生素含量最高且种类丰富;苯醚甲环唑、井岗霉素、四聚乙醛、咪酰胺、噻呋酰胺、吡虫啉和烯酰吗啉7种农药残留以及沙门氏菌和金黄色葡萄球菌在云参中均未检出;云参对雌、雄大鼠的半数致死剂量(LD50)＞60.0 g/kg BW,按急性毒性剂量分级,属实际无毒;三项遗传毒性试验即细菌回复突变试验、哺乳动物红细胞微核试验及小鼠精原细胞染色体畸变试验结果均为阴性.云参富含蛋白质、氨基酸、矿物元素和维生素(特别是B族维生素),农药残留和微生物指标均符合我国食品安全国家标准的规定,且在本实验条件下,未见明显毒性作用.

目的 建立舒更葡糖钠异常毒性及降压物质的检查方法.方法 取SPF级小鼠 40 只,随机分为 5 组,各 8 只,每组小鼠均予舒更葡糖钠尾静脉注射,给药剂量分别为 4 600,4 370,4 152,3 944,3 747 mg/kg,给药后 72h内观察小鼠死亡情况;计算半数致死量(LD50)及其 95%置信区间(CI),以其 95%CI下限的 1/4 剂量进行异常毒性检查.取实验猫 1 只,股静脉注射 40,20,10 mg/kg舒更葡糖钠,以 0.1 μg/kg组胺作对照;记录给药前后实验猫的颈动脉血压,计算下降值,确定药品降压物质检查限值并验证.结果 舒更葡糖钠的LD50 为 4 182.8 mg/kg,95%CI为 3 988.1～4 409.4 mg/kg;1 000 mg/kg剂量下,3 组小鼠(各 5 只)48h内均未死亡.降压物质检查限值为 10 mg/kg,实验猫在此剂量下血压下降值均未超过组胺所致血压下降值的 50%;3 批样品检查结果均符合规定.结论 该方法可用于舒更葡糖钠异常毒性及降压物质的检查.

目的 在体外和体内条件下探究趋磁细菌AMB-1对BALB/c小鼠的生物相容性.方法 透射电镜观察AMB-1形貌特征;显微镜拍摄AMB-1在血清中的运动,Image J计算运动速度;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测AMB-1对小鼠乳腺癌细胞4T1和成纤维细胞L929细胞毒性;流式细胞术评价AMB-1对BALB/c小鼠骨髓来源树突细胞成熟影响;改良寇氏法计算出AMB-1对BALB/c小鼠的半数致死剂量;普鲁士蓝染色BALB/c小鼠心、肝、脾、肺、肾脏器观察AMB-1在小鼠体内的分布情况;流式细胞术检测AMB-1对BALB/c小鼠脾脏树突细胞的影响;检测小鼠BALB/c血生化指标评估其安全性;苏木精-伊红染色BALB/c小鼠心、肝、脾、肺、肾脏器,观察其组织形态变化.结果 37℃条件下,AMB-1在血清中可保持运动至少120 min;AMB-1菌量超过3.3×106 个时,对小鼠乳腺癌细胞4T1和成纤维细胞L929具有毒性,随菌量增加,毒性越大;AMB-1可促进骨髓来源树突细胞CD86+、CD80+双阳细胞的比例增大.AMB-1对BALB/c小鼠半数致死剂量为2.59×1010 个.AMB-1对小鼠脾脏树突细胞成熟的影响随着时间延长逐渐减弱;血生化指标在正常范围内;小鼠主要脏器无明显组织形态学变化.结论 趋磁细菌AMB-1具有良好生物相容性,在体内不会引发严重免疫炎症等不良反应,具有体内应用潜能.