目的:比较系统糖皮质激素治疗敏感与治疗抵抗的进展期非节段型白癜风患者的临床资料及外周血CXC趋化因子配体（CXCL）9及CXCL10水平，寻找影响系统糖皮质激素治疗敏感性的临床因素。方法:2021年5月至2023年5月于复旦大学附属华山医院建立系统糖皮质激素治疗的进展期非节段型白癜风患者队列，前瞻性收集队列中所有患者的临床资料和外周血样本，给予入组患者标准治疗：复方倍他米松注射液1 ml肌内注射每月1次。治疗3个月后，观察患者皮损改善情况，同时采用白癜风面积及严重程度（VASI）评分和白癜风欧洲工作组评估工具（VETFa）评估疗效。VASI评分变化≥ 0且VETFa进展期评分≤ 0分为激素敏感组（即病情稳定或好转），而VASI评分变化< 0且VETFa进展期评分为1分则为激素抵抗组。分析皮损部位、特殊临床标记（三色征、碎屑样改变、同形反应）、既往用药史、白癜风家族史等与系统糖皮质激素治疗应答的关联。基线及治疗3个月后，采集患者外周血样本，采用酶联免疫吸附试验检测血浆中CXCL9及CXCL10含量。统计分析采用 χ2检验、Fisher确切概率法、二分类logistic回归、Mann-Whitney U检验和Wilcoxon配对符号秩和检验。 结果:共入组142例，127例完成3个月的治疗随访，其中男77例，女50例，就诊年龄18 ~ 65（36.6 ± 11.4）岁，病程2个月至58（13.5 ± 10.7）年；有白癜风家族史25例（19.7%）；治疗前皮损面积（BSA）1% ~ 70%（11.5% ± 12.7%），VASI评分1% ~ 70%（10.8% ± 11.6%）。多因素logistic回归分析显示，无特殊临床标记[比值比（ OR）= 6.900，95%可信区间（ CI）：1.228，38.757， P = 0.028]、单一特殊临床标记（ OR = 2.579，95% CI：1.012，6.574， P = 0.047）、外用糖皮质激素治疗史（ OR = 2.643，95% CI：1.019，6.850， P = 0.041）、无白癜风家族史（ OR = 5.090，95% CI：1.070，24.215， P = 0.030）、发病部位为四肢近端（ OR = 3.767，95% CI：1.315，10.793， P = 0.037）是白癜风患者对糖皮质激素治疗抵抗的危险因素。治疗3个月后，激素敏感组CXCL10水平显著低于治疗前（ W = 571.00， P < 0.001），而激素抵抗组治疗前后差异无统计学意义（ W = 48.00， P = 0.524）。两组间治疗前后CXCL9水平差值比较差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:无或单一特殊临床标记、外用糖皮质激素治疗史、无白癜风家族史、发病部位为四肢近端可能是进展期非节段型白癜风患者对系统糖皮质激素治疗抵抗的危险因素。治疗后CXCL10水平改变可能作为判断进展期白癜风患者是否发生糖皮质激素治疗抵抗的重要评估指标。

目的:探讨鼻咽癌患者放疗前血浆中炎性细胞因子水平与急性放疗不良反应的关系，初步建立放疗期间重度急性不良反应发生风险的预测模型。方法:横断面研究。回顾性选取2016年5月至2019年3月就诊于中国医学科学院肿瘤医院接受根治性放疗的85例鼻咽癌患者。按照美国肿瘤放疗协作组（RTOG）急性放射性损伤评价标准评估放疗期间放射性口腔黏膜炎、放射性皮炎和口干发生的最高等级不良反应，以其≥3级为重度。采用Olink蛋白质组学技术，检测患者首次放疗前血浆中92种炎性细胞因子水平（标准化的蛋白表达值）。采用单因素方差分析和独立样本 t检验分析炎性细胞因子与临床因素及与放疗期间3种急性不良反应的关系。基于炎性细胞因子和（或）临床因素，采用二元logistic回归构建重度急性放疗不良反应发生风险的预测模型。以美国RTOG急性放射性损伤评价标准评定的放疗期间最严重等级的不良反应是否重度为金标准，采用受试者工作特征（ROC）曲线分析依据构建的各模型判断重度急性放疗不良反应发生的效能。 结果:85例患者中，男性68例，女性17例；中位年龄[ M（ Q1， Q3）]49岁（43岁，60岁）；所有患者均接受根治性放疗，其中64例联合化疗或靶向治疗。19例（22.1%）出现重度急性放疗不良反应。1、2、3级急性放射性口腔黏膜炎患者放疗前血浆白细胞介素22受体A1（IL-22RA1）、白细胞介素18受体1（IL-18R1）、嗜酸性粒细胞趋化因子（CCL11）、肿瘤坏死因子超家族成员14（TNFSF14）、酪氨酸激酶受体3配体（Flt3L）和单核细胞趋化蛋白2（MCP-2）水平差异均有统计学意义（均 P<0.05）；1、2、3级急性放射性皮炎患者放疗前血浆CD244、CC趋化因子配体20（CCL20）、白血病抑制因子受体（LIF-R）和白细胞介素（IL）-4水平差异均有统计学意义（均 P<0.05）；1级和2级口干患者放疗前血浆IL-12B、CXC型趋化因子配体11（CXCL11）、LIF-R和IL-33水平差异均有统计学意义（均 P<0.05）。单因素方差分析中，各临床因素与严重急性放疗不良反应均不相关（均 P>0.05），根据文献选取年龄、T分期、N分期、临床分期、是否接受化疗、是否患有糖尿病6个临床因素建立二元logistic回归模型M1。根据细胞因子功能和既往文献，在差异细胞因子中选取IL-22RA1、IL-18R1、MCP-2、CCL11、CD244、CCL20和IL-33建立二元logistic回归模型M2。结合上述临床因素和细胞因子建立二元logistic回归模型M3。ROC曲线分析显示，预测模型M1、M2和M3判断重度急性放疗不良反应发生的曲线下面积分别为0.787、0.841、0.868。 结论:不同等级急性放疗不良反应鼻咽癌患者间放疗前血浆中多种炎性细胞因子表达水平有差异，基于患者首次放疗前血浆炎性细胞因子水平结合临床因素构建模型能较好地预测重度急性放疗不良反应发生风险。

目的:研究黄柏酮的分子特性，筛选并鉴定黄柏酮抗脓毒症的潜在靶点。方法:通过中药系统药理学数据库分析平台（TCMSP）分析黄柏酮的药理参数和分子特性；通过化合物靶标预测平台工具SwissTargetPrediction服务器和化学成分靶向蛋白服务器（DRAR-CPI），以Z'值<-0.5筛选黄柏酮抗脓毒症的潜在靶点；通过人类孟德尔遗传在线（OMIM）数据库、毒性与基因比较数据库（CTD）和药物靶标数据库（TTD）中已报道的蛋白信息与脓毒症相关疾病靶标进行匹配，筛选黄柏酮抗脓毒症的靶点；进一步通过分子对接软件鉴定黄柏酮抗脓毒症的潜在靶点。结果:黄柏酮口服生物利用度（OB）为81.58%，药物相似度（DL）为0.57，表明其口服吸收较好，具有很好的成药性。通过SwissTargetPrediction和DRAR-CPI服务器共筛选到242个黄柏酮抗脓毒症的潜在靶点，其中有13个靶点与脓毒症直接相关。经分子对接软件鉴定，组织蛋白酶G（CTSG）、胱天蛋白酶1（CASP1）、S100钙结合蛋白A9（S100A9）、蛋白C（凝血因子Ⅴa和Ⅷa抑制因子，PROC）、丝裂素活化蛋白激酶1（MAPK1）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）、白细胞介素-10（IL-10）、巨噬细胞移动抑制因子（MIF）、C5a受体1（C5AR1）、胱天蛋白酶3（CASP3）、CXC趋化因子受体2（CXCR2）、凝血酶受体（F2R）和烟酰胺磷酸核糖转移酶（NAMPT）为黄柏酮抗脓毒症的潜在靶点，自由结合能分别为-32.55、1.26、-30.00、300.08、-31.88、-30.29、-21.38、-30.79、16?777.84、-21.80、6?443.36、-20.38、-23.47 kJ/mol。结论:黄柏酮通过调控PROC和F2R抑制凝血并改善炎症反应；调节MIF、S100A9、G6PD和IL-10起到免疫应答作用；调节CTSG、CASP1、MAPK1、C5AR1和CASP3起到保护脓毒症损伤器官的作用；调控CXCR2减少中性粒细胞向炎症部位过度迁移，减轻组织损伤；调控NAMPT改善细胞能量状态，减少氧化应激从而保护细胞不受损害，并通过减轻脓毒症的症状和炎症反应来发挥其抗脓毒症的作用。

目的:探讨冠状病毒感染所致心力衰竭（心衰）的机制，并预测对其可能有效的药物。方法:在基因表达数据库（GEO）检索冠状病毒和心衰，并筛选符合实验要求的组学数据。采用R语言Limma程序包进行差异表达基因分析，筛选差异表达基因。将两组差异基因导入R语言clusterProfiler包进行基因本体学（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析，取两组结果的交集。采用STRING数据库对所有差异表达基因构建蛋白质互作网络并筛选核心基因。最后采用团队自主研发的表观精准治疗预测平台EpiMed预测冠状病毒所致心衰的治疗药物。结果:在GEO数据库检索并筛选得到GSE59185冠状病毒数据集，根据不同的亚型分为wt组、?E组、?3组、?5组、对照组5组样本，差异分析发现各亚组交集上调基因191?个，下调基因18?个。在GEO数据库检索并筛选得到GSE126062心衰数据集，共筛选差异表达基因495?个，其中上调165?个，下调330?个。冠状病毒与心衰差异表达基因富集分析，取交集处理共有GO条目20条，主要富集在病毒反应、病毒防御反应、Ⅰ型干扰素反应、γ干扰素调节、先天免疫反应调节、病毒生命周期负调控、病毒基因组复制调控等；共有5条KEGG通路，主要与肿瘤坏死因子（TNF）信号通路、白细胞介素（IL）-17信号通路、细胞因子与受体相互作用、Toll样受体信号通路、人类巨细胞病毒感染有关。蛋白互作网络分析筛选出信号传导及转录激活蛋白3、IL-10、IL-17、TNF、干扰素调节因子9、2′, 5′-寡腺苷酸合成酶1、丝裂原活化蛋白激酶3、S-腺苷甲硫氨酸基区域蛋白2、CXC趋化因子配体10、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3共10?个核心基因。EpiMed平台预测可能对冠状病毒所致心衰有效的药物为TNF-α抑制剂、白藜醇、利托那韦、白芍、维甲酸、连翘、鱼腥草等。结论:多个炎症通路的异常活化可能是冠状病毒感染所致心衰的原因，白藜芦醇、利托那韦、维甲酸、白芍、连翘、鱼腥草可能对其具有治疗作用。

目的:通过单细胞核转录组测序分析面肩肱型肌营养不良症（FSHD）中细胞间通讯模式。方法:选取2例FSHD患者的双侧不对称病变的口轮匝肌组织和2例正常口轮匝肌组织，共6例样本，分为对照组、轻度组和重度组。对照组为2例健康人的正常肌肉组织，轻度组和重度组分别为FSHD患者相对正常和损伤较重的一侧肌肉组织。对3组样本的全部细胞进行单细胞核转录组测序，鉴定差异表达基因和富集通路，并通过细胞通讯分析主要细胞类型间的细胞间通讯模式以及关键信号通路。结果:FSHD患者双侧肌肉样本的差异基因表达分析共鉴定了不同细胞类型中与疾病相关的46个功能性差异表达基因，与细胞凋亡、氧化应激、免疫炎症和肌肉功能等相关。FSHD重度组的细胞间通讯普遍增加。纤维/脂肪祖细胞（FAPs）和巨噬细胞是FSHD异常肌肉微环境中的重要信号来源，与疾病进展密切相关。FSHD组中存在6条独有信号通路：骨形态发生蛋白（BMP）、转化生长因子-β（TGF-β）、CXC基序趋化因子配体（CXCL）、黏附G蛋白偶联受体E5（ADGRE5）、白细胞介素-16（IL-16）和无翅型MMTV整合位点家族（WNT）信号通路，这些信号通路主要涉及巨噬细胞、FAPs和脂肪细胞间的相互作用，可能参与调控病变肌肉的脂肪沉积和纤维化改变。结论:单细胞核转录组测序提供了FSHD关键细胞类型间较为全面的细胞间通讯模式，为理解FSHD肌肉微环境的细胞间调控机制提供参考。

目的 分析CXC类趋化因子配体5(CXCl-5)、可溶性白细胞分化抗原14亚型(sCD14-ST)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子-2(IGF-2)在急性细菌性脑膜炎患儿脑脊液中的表达及意义.方法 选取2020年7月-2021年7月湖州市中心医院收治的55例急性细菌性脑膜炎患儿为观察组,另选取同期在院进行健康体检的健康儿童45例为对照组.检测对照组血液及观察组血液、脑脊液中CXCl-5、sCD14-ST、IGF-1及IGF-2水平.分析CXCl-5、sCD14-ST、IGF-1及IGF-2在急性细菌性脑膜炎患儿脑脊液中表达及对急性细菌性脑膜炎的诊断价值.结果 与对照组相比,观察组血清、脑脊液中 CXCl-5(36.88±11.23 vs.50.27±5.38 vs.67.55±20.37)ng/L、sCD14-ST(2.86±0.23 vs.3.32±0.33 vs.4.01±1.35)pg/ml、IGF-1(70.96±20.78 vs.101.69±31.77 vs.122.36±39.21)mg/L、IGF-2(65.37±18.65 vs.102.33±27.88 vs.121.58± 37.69)mg/L水平较高(P＜0.05);与观察组患儿血清相比,患儿脑脊液中CXCl-5(50.27±5.38vs.67.55±20.37)ng/L、sCD14-ST(3.32±0.33 vs.4.01±1.35)pg/ml、IGF-1(101.69±31.77 vs.122.36±39.21)mg/L、IGF-2(102.33±27.88 vs.121.58±37.69)mg/L水平较高(P＜0.05).logistic回归分析显示CXCl-5、sCD14-ST、IGF-1及IGF-2水平升高是急性细菌性脑膜炎发生的影响因素.ROC曲线显示,4项联合对急性细菌性脑膜炎的诊断价值高于CXCl-5、sCD14-ST、IGF-1及IGF-2单项诊断(AUC=0.843、0.747、0.702、0.660、0.765),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 急性细菌性脑膜炎患儿脑脊液中CXCl-5、sCD14-ST、IGF-1及IGF-2表达较高,CXCl-5、sCD14-ST、IGF-1及IGF-2联合对急性细菌性脑膜炎的诊断价值较高.

目的 探讨丁苯酞(3-n-butylphthalide,NBP)对依托泊苷诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endo-thelial cells,HUVEC)衰老的影响.方法 将HUVEC分为空白对照组(内皮细胞培养液)、依托泊苷组(500 nmol/L依托泊苷+二甲基亚砜)、依托泊苷+NBP低浓度组(500 nmol/L依托泊苷+5 μmol/L NBP)、依托泊苷+NBP中浓度组(500 nmol/L依托泊苷+10 μmol/L NBP)、依托泊苷+NBP高浓度组(500 nmol/L依托泊苷+20μmol/L NBP)组.通过衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色检测衰老细胞比例变化;实时荧光定量聚合酶链反应检测衰老相关分泌表型,如白细胞介素(IL)-8、IL-1β、CXC趋化因子配体1(CXCL1)mRNA水平变化;蛋白质免疫印迹检测衰老相关蛋白P21表达水平变化;免疫荧光染色检测增殖相关蛋白Ki67阳性细胞比例变化.结果 与空白对照组比较,依托泊苷组P21表达、SA-β-gal染色阳性细胞比例、IL-8、IL-1β、CXCL1的mRNA水平均显著升高[1.00±0.00 vs 0.59±0.09、(29.58±4.51)％vs(11.27±1.18)％、2.49±0.11 vs 1.00±0.03、6.32±0.15 vs 1.00±0.03、2.40±0.24 vs 1.00±0.04,P＜0.05],Ki67 阳性细胞比例显著降低[(5.95±1.55)％vs(27.38± 7.00)％,P＜0.05];与依托泊苷组比较,依托泊苷+NBP低浓度组的SA-β-gal染色阳性细胞比例、P21蛋白表达水平、IL-1β的mRNA水平均降低(P＜0.05),Ki67阳性细胞比例增加(P＜0.05).结论 NBP对依托泊苷诱导的血管内皮细胞衰老具有拮抗作用.

目的 探讨在肝移植排斥反应中巨噬细胞亚群分类及变化.方法 建立大鼠肝移植模型分为:免疫耐受组(B-B),将BN大鼠供体的肝脏移植至BN大鼠受体;免疫排斥组(L-B),将Lewis大鼠供体的肝脏移植至BN大鼠受体,使用单细胞RNA测序和高通量RNA测序区分大鼠移植肝巨噬细胞亚群,发现排斥反应高度差异的基因,免疫组化确定蛋白表达和细胞亚群的变化和分布.结果 CD68阳性巨噬细胞在排斥组多于耐受组(P<0.05),巨噬细胞可分为9个亚群,排斥反应中巨噬细胞第8群的CXC趋化因子配体9(CXCL9)明显升高,第5群的白细胞分化抗原74(CD74)基因明显升高(P<0.05).排斥反应中巨噬细胞差异基因综合第1位的是CD74,第2位是CXCL9.与耐受组比较,排斥组肝脏汇管区可见大量CD74阳性巨噬细胞浸润,并且在肝血窦CD74阳性巨噬细胞浸润也明显增加(P<0.05),在排斥肝脏汇管区和肝血窦可见大量CXCL9阳性巨噬细胞浸润以汇管区为著(P<0.05),在排斥肝脏汇管区CD14阳性细胞明显增加(P<0.05).结论 在肝移植排斥反应中CD74阳性巨噬细胞亚群和CXCL9阳性巨噬细胞亚群是促进肝移植排斥反应中的关键亚群,完善了巨噬细胞在肝移植排斥反应中作用机制.

目的 应用公共数据库挖掘结直肠癌"炎癌转化"过程的关键基因,结合机器学习和神经网络模型的算法优势进行基因筛选,验证关键基因作为预测指标的可行性及免疫相关性,进而预测潜在防治中药.方法 利用基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)2个GSE66407和GSE166925数据集,筛选由正常结肠到炎症结肠(溃疡性结肠炎),最后进展到肠癌的过程中出现的差异基因;通过构建蛋白质-蛋白质相互作用网络(protein-protein interaction,PPI)进一步筛选核心基因;运用梯度提升机、随机森林和决策树3种分类机器学习算法进行结局的预测学习,将3种机器学习算法筛选出的核心基因取交集,构建深度学习框架下的人工神经网络模型,对模型预测准确性进行内部及外部验证;实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)联合人蛋白质图谱数据库(Human Protein Atlas,HPA)的免疫组化数据分析关键基因在初发结直肠癌患者癌组织及正常组织中的表达;运用单样本基因集富集分析(single sample gene set enrichment analysis,ssGSEA)算法分析核心基因与免疫细胞之间的关联;通过生存分析筛选对结直肠癌具有预后意义的基因;最后通过核心基因进行相关中药的预测分析.结果 在结直肠炎癌转化全过程中,共鉴定出152个共同的差异基因.这些基因参与肿瘤免疫反应、炎症反应等生物过程;经由3种机器学习算法的筛选,最终确定了 8个核心基因,包括组织金属蛋白酶抑制剂 1(tissue inhibitor of metalloproteinases 1,TIMP1)、基质金属蛋白酶 1(matrix metalloproteinase 1,MMP1)、趋化因子 CXC 配体 13(C-X-Cmotifchemokineligand 13,CXCL13)、普列克底物蛋白(Pleckstrin,PLEK)、颗粒酶 B(granzyme B,GZMB)、CXCL5、CXCL3和CXCL8.在深度学习框架下的神经网络模型中,训练集中对正常组和肿瘤组的预测准确率分别为86.3％、92.3％;外部验证集中对正常组和肿瘤组的预测准确率分别为80.0％、80.6％.8个核心基因同时涉及多种免疫浸润过程;RT-PCR结合HPA数据库分析显示TIMP1、MMP1、GZMB、CXCL5、CXCL8、CXCL3在结直肠癌患者癌组织中表达显著升高(P＜0.05),CXCL13在癌组织中表达显著降低(P＜0.05),PLEK在癌组织中表达降低但差异不显著;TIMP1、CXCL13和CXCL8对患者的整体生存具有显著影响.对实验验证有显著差异的7个核心基因进行防治中药预测分析,结果显示预测中药以清热药和补虚药为主,四气以寒、温和平性为主,五味以苦、辛、甘味比例最大.结论 TIMP1、MMP1、CXCL13、GZMB、CXCL5、CXCL3和CXCL8可以作为预测结直肠癌"炎-癌"转化过程的关键分子,对这些分子进行中药的早期干预,可能对结直肠癌的早期诊疗具有重要意义.

目的 研究浆细胞样树突状细胞(pDC)在过敏性紫癜(HSP)患儿外周血和肾脏组织中的表达和分布情况,探讨pDC在紫癜性肾炎发病中的作用.方法 40例HSP患儿,其中急性期28例,缓解期12例,分离患儿外周血单个核细胞,流式细胞术检测pDC的表达;设立正常对照组(15例).同时抽提外周血总RNA并反转录为cDNA,以实时荧光定量PCR法检测患者组和正常对照组趋化因子干扰素γ诱导蛋白10 (CXCL10)、CC类趋化因子配体5(CCL5)及相应受体CXC亚家族趋化因子受体3(CXCR3)、趋化因子受体5(CCR5)mRNA的定量表达水平(以2-△△Ct值表示).应用免疫组织化学技术,观察8例行肾活检患者肾脏组织中pDC的分布;设立正常对照(3例).结果 HSP急性期患者外周血pDC表达的百分数为0.051±0.039,低于缓解期的0.181 ±0.082和正常对照组的0.166±0.079(P＜0.000 1).HSP患者外周血高表达CXCL10、CCL5,而低表达CXCR3、CCR5.正常对照肾脏组织未见pDC浸润,而紫癜性肾炎患者pDC呈局灶节段分布于肾小球系膜区.结论 pDC在HSP患儿中表达异常,紫癜性肾炎的发生可能与外周血中pDCs在趋化因子作用下向肾组织的迁移,引起局部炎性反应有关.