目的:探讨白屈菜碱对乳腺癌MCF-7细胞凋亡调控的作用及机制。方法:分别以白屈菜碱和二甲基亚砜处理MCF-7细胞作为实验组和对照组。以细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测细胞活性；通过蛋白质印迹法(Western blot)检测p65、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)表达；通过流式细胞术检测细胞凋亡。应用GraphPad Prism 9统计分析，组间比较采用Student’s t检验分析。 结果:CCK-8显示实验组A450(0.414±0.023)小于对照组A450(1.042±0.190)，差异有统计学意义( t＝5.683， P<0.01)；流式细胞术结果显示，实验组细胞凋亡率[(20.14±3.25)%]高于对照组[(4.12±0.53)%]，差异有统计学意义( t＝8.426， P<0.01)；Western blot结果显示，总蛋白实验组p65表达量(1.526±0.251)与对照组(1.624±0.208)，差异无统计学意义( t＝0.521， P>0.05)，bcl-2表达量(0.486±0.063)低于对照组(0.785±0.098)，差异有统计学意义( t＝4.445， P<0.05)，bax表达量(1.235±0.251)高于对照组(0.426±0.015)，差异有统计学意义( t＝5.572， P<0.01)；对核蛋白和胞质蛋白进行分别检测，结果提示实验组细胞核内p65表达量(0.565±0.075)低于对照组(0.956±0.065)，差异有统计学意义( t＝6.823， P<0.01)，而实验组胞质中p65表达量(0.725±0.125)高于于对照组(0.327±0.089)，差异有统计学意义( t＝0.492， P<0.05)。 结论:白屈菜碱通过抑制p65核转位抑制核因子-κB信号促进MCF-7细胞凋亡。

目的 建立不同产地白屈菜Chelidonium majus的HPLC指纹图谱及多指标含量测定方法,综合评价不同产地白屈菜药材质量,为其进一步研究和开发提供依据.方法 采用Agilent Extend C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5 μm),流动相为0.1％磷酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长284 nm,柱温25 ℃,进样量10μL.采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立4个主产地19批次白屈菜药材的HPLC指纹图谱并分析相似度.使用Origin2022软件进行聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、SIMCA-14.1软件进行主成分分析(principal component analysis,PCA)和偏最小二乘法-判别分析(partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA).通过对照品比对指认指标成分并定量测定,结果采用化学模式识别、箱线图以及熵权TOPSIS法进行综合评价.结果 19批次白屈菜HPLC指纹图谱共匹配出16个共有峰,指认出白屈菜碱、盐酸黄连碱、紫堇碱、盐酸血根碱和白屈菜红碱.指纹图谱相似度范围为0.745～0.983.HCA将19批白屈菜分为4类;PCA得到5个主成分的累积方差贡献率为84.758％;PLS-DA表明盐酸血根碱和白屈菜红碱等5个成分是不同产地白屈菜药材质量差异的标志性成分.白屈菜碱、盐酸黄连碱、紫堇碱、盐酸血根碱、白屈菜红碱质量分数分别为0.658～1.547、0.718～2.577、0.029～0.108、0.095～0.527、0.069～0.253mg/g.箱线图与熵权TOPSIS法评价均表明辽宁和陕西产地的白屈菜药材综合质量较优.结论 所建立的白屈菜药材HPLC指纹图谱方法分离度好,操作简单;含量测定方法具有较好的稳定性和重复性,可为白屈菜药材质量控制与进一步研究提供参考依据.

目的 基于体外耐药细胞模型,研究白屈菜-元胡药对(Chelidonii Herba-Corydalis Rhizoma drug pair,CMCR)逆转乳腺癌阿霉素(adriamycin,ADR)耐药药效物质.方法 运用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS)对CMCR不同配伍比例(1∶1、2∶1)95％、80％、70％、60％、50％乙醇提取部位的化学成分进行表征,确定共有成分;以人乳腺癌阿霉素耐药细胞(MCF-7/ADR)为研究对象,采用CCK-8法检测ADR联合CMCR各提取部位对MCF-7/ADR细胞增殖的影响,计算耐药倍数;利用灰色关联度、Pearson相关性分析和偏最小二乘回归分析建立表征图谱中共有成分峰面积与逆转耐药倍数的相关性,筛选出CMCR最佳逆转耐药活性部位及相关药效物质.采用荧光显微镜观察白屈菜碱联合延胡索乙素作用细胞后罗丹明123累积量的影响;Western blotting和qRT-PCR法检测P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistant protein,BCRP)、肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)蛋白和基因表达.结果 CMCR 10个提取部位分析得到30个共有成分.CMCR(1∶1)95％乙醇提取部位对ADR的逆转耐药活性最强,其逆转耐药倍数为11.08.根据相关性分析结果初步确定白屈菜碱、延胡索乙素、小檗碱、二氢血根碱和白屈菜红碱为CMCR逆转乳腺癌ADR耐药的潜在药效物质.选择药效相关性最高的白屈菜碱和延胡索乙素联合进行实验验证,发现白屈菜碱-延胡索乙素能够增加细胞内罗丹明123累积,显著下调MCF-7/ADR细胞P-gp、BCRP和LRP蛋白和基因表达(P＜0.01、0.001).结论 阐明了CMCR逆转乳腺癌阿霉素耐药的药效物质,为其临床应用及后续抗肿瘤辅助用药开发奠定了基础.

目的:探讨白屈菜碱(chelidonine)对人口腔上皮样癌细胞KB细胞株的抗肿瘤作用机制.方法:以不同浓度的白屈菜碱作用于体外培养的KB细胞株24、48、72 h,应用MTT检测细胞生长抑制率;Transwell小室检测肿瘤细胞的侵袭作用;流式细胞仪检测细胞凋亡率;免疫印迹实验分析Caspase-3、Bax、Bcl-2、MMP-2、MMP-9信号通路相关蛋白的表达水平.结果:MTT结果显示白屈菜碱对KB细胞株的增殖具有明显的抑制作用,且呈时间剂量依赖性;侵袭试验结果表明,白屈菜碱能够抑制KB细胞侵袭作用,且随着浓度的增大,抑制侵袭作用增强;流式双染检测白屈菜碱作用KB细胞24 h后细胞的凋亡率,与对照组相比差异有统计学意义;蛋白免疫印迹试验显示白屈菜碱组的Caspase-3、Bax表达明显上调,Bcl-2、MMP-2、MMP-9表达下调,与对照组相比差异有统计学意义.结论:白屈菜碱对KB细胞具有明显的抑制增殖、侵袭和促进凋亡的作用;其抗肿瘤机制可能与下调Bcl-2、MMP-2、MMP-9,上调Caspase-3、Bax的表达有关.

目的 探讨白屈菜碱对胶质瘤母细胞细胞增殖调控的影响及其机制.方法 分别以白屈菜碱和二甲基亚砜(DMSO)处理胶质母细胞瘤细胞株U87作为实验组和对照组,细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测U87细胞增殖能力;通过流式细胞术检测细胞周期;通过蛋白质印迹法(Western blot)检测p53和p21蛋白表达;以小RNA干扰技术抑制p53表达;应用GraphPad Prism 6统计分析,组间比较采用Student's t检验分析.结果 白屈菜碱作用于胶质母细胞瘤细胞株后,与对照组(1.343±0.022)比较,实验组细胞活性[吸光度(4)450值(0.783±0.030)]被抑制,差异有统计学意义(t=14.850,P＜0.05);细胞周期分析,对照组G1期细胞比例[(54.67±1.76)％],实验组G1期细胞数比例[(65.93±1.61)％]增多,差异有统计学意义(t=4.734,P＜0.05),周期阻滞于G1期;Western blot结果显示,与对照组(1.06 ±0.03、1.07 ±0.04)比较,实验组p53、p21表达升高(2.78 ±0.12、4.08 ±0.13),差异均有统计学意义(t=13.620、22.170,P＜0.05).小RNA干扰技术抑制p53表达后,与对照组[(36.13±0.71)％]比较,实验组细胞G1期细胞[(35.43±0.64)％]比例改变差异无统计学意义(t=0.734,P＞ 0.05),Western blot结果显示,实验组p53、p21表达(1.11±0.01、1.16 ±0.05)与对照组(1.04 ±0.03、1.04 ±0.03)差异均无统计学意义(t=2.209、2.171,P＞0.05).结论 白屈菜碱通过促进p53表达抑制胶质母细胞瘤细胞增殖.