目的:建立紫连油的HPLC指纹图谱和含量测定方法，为紫连油的质量控制与评价提供依据。方法:采用薄层色谱法对紫连油中紫草、黄连、冰片进行定性鉴别；采用HPLC法测定不同批次紫连油的指纹图谱，并测定β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量。结果:薄层色谱法鉴别显示，紫草、黄连、冰片斑点清晰，专属性好；通过HPLC指纹图谱分析，标定了紫连油的13个共有峰，并确认了盐酸小檗碱和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的特征峰，各批次间的指纹图谱相似度≥0.981；β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁在40.48～202.40 μg范围内线性关系良好。结论:本研究建立的薄层色谱鉴别、指纹图谱和含量测定方法简单、可靠，稳定性好，可为紫连油的质量控制提供参考。

目的 建立同时测定安宫降压丸中栀子苷、盐酸黄连碱、表小檗碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素 9 种指标性成分含量的超高效液相色谱法.方法 色谱柱为Waters Acquity UPLC C18 柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为 0.5 mL/min,检测波长为 254 nm,柱温为 35℃,进样量为 1μL.结果 9 种成分在各自质量浓度范围内与峰面积线性关系良好(r≥0.999 5);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于 2.0%;平均加样回收率分别为99.82%,98.91%,99.09%,99.09%,98.77%,99.25%,99.16%,98.17%,99.40%,RSD分别为 0.56%,0.56%,0.81%,0.97%,0.79%,0.81%,0.84%,1.19%,0.83%(n=6).样品中 9种成分的含量分别为 1.82,0.56,0.68,4.52,2.36,0.54,0.85,0.37,0.32 mg/g(n=9).结论 该方法快速高效、准确度高、专属性强,可用于安宫降压丸中 9 种指标性成分的含量测定.

目的 建立不同产地白屈菜Chelidonium majus的HPLC指纹图谱及多指标含量测定方法,综合评价不同产地白屈菜药材质量,为其进一步研究和开发提供依据.方法 采用Agilent Extend C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5 μm),流动相为0.1％磷酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长284 nm,柱温25 ℃,进样量10μL.采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立4个主产地19批次白屈菜药材的HPLC指纹图谱并分析相似度.使用Origin2022软件进行聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、SIMCA-14.1软件进行主成分分析(principal component analysis,PCA)和偏最小二乘法-判别分析(partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA).通过对照品比对指认指标成分并定量测定,结果采用化学模式识别、箱线图以及熵权TOPSIS法进行综合评价.结果 19批次白屈菜HPLC指纹图谱共匹配出16个共有峰,指认出白屈菜碱、盐酸黄连碱、紫堇碱、盐酸血根碱和白屈菜红碱.指纹图谱相似度范围为0.745～0.983.HCA将19批白屈菜分为4类;PCA得到5个主成分的累积方差贡献率为84.758％;PLS-DA表明盐酸血根碱和白屈菜红碱等5个成分是不同产地白屈菜药材质量差异的标志性成分.白屈菜碱、盐酸黄连碱、紫堇碱、盐酸血根碱、白屈菜红碱质量分数分别为0.658～1.547、0.718～2.577、0.029～0.108、0.095～0.527、0.069～0.253mg/g.箱线图与熵权TOPSIS法评价均表明辽宁和陕西产地的白屈菜药材综合质量较优.结论 所建立的白屈菜药材HPLC指纹图谱方法分离度好,操作简单;含量测定方法具有较好的稳定性和重复性,可为白屈菜药材质量控制与进一步研究提供参考依据.

目的 研究调脾安肠方对伊立替康致迟发性腹泻小鼠肠道菌群结构及其毒性代谢产物活性的影响.方法 将32只健康BALB/c雌性小鼠随机分为空白组、模型组、调脾安肠方组、黄连素组,每组8只.除空白组外,其余3组小鼠制备CT26皮下荷瘤模型后再建立伊立替康致迟发性腹泻模型,从伊立替康腹腔注射当天开始,调脾安肠方组每天于化疗前2 h给予调脾安肠方浓缩制剂0.4 mL(28 g/kg)灌胃,模型组每天于化疗前2 h给予生理盐水0.4 mL灌胃,黄连素组每天于化疗前2 h给予盐酸小檗碱片水溶液0.4 mL灌胃(100 mg/kg),空白组与造模组相同时间段给予生理盐水0.4 mL灌胃,均连续灌胃10d.于实验结束后当天留取各组小鼠粪便,分光光度法检测粪便样本中β-葡萄糖醛酸苷酶活性,16S rRNA高通量测序技术检测样本中肠道菌群结构及分布情况.结果 模型组β-葡萄糖醛酸苷酶活性明显高于空白组(P＜0.05);调脾安肠方组及黄连素组β-葡萄糖醛酸苷酶活性均明显低于模型组(P均＜0.05),且调脾安肠方组明显低于黄连素组(P＜0.05).粪便样本测序显示,模型组小鼠肠道菌群物种丰度、均匀度及多样性下降,而调脾安肠方组小鼠肠道菌群物种丰度、均匀度及多样性均得到逆转,趋近于正常小鼠,且在菌群物种组成上与空白组相似,黄连素组与模型组相似;空白组及调脾安肠方组OTUs数量较多,其次为黄连素组,模型组数量最少;肠道菌群物种门水平分析,各组样本中厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)丰度均较高,其中疣微菌门(Verrucomicrobia)、变形 菌门(Proteobacteria)在模型组样本中具有较高丰度;肠道菌群物种属水平分析,乳杆菌属(Lactobacillus)在各组均有较高丰度,模型组样本中阿克曼菌属(Akkermansia)、拟杆菌属(Bacteroides)丰度降低,调脾安肠方组丰度上调至接近正常水平;各组OTUs相比,模型组小鼠肠道菌群中丹毒丝菌目、梭菌目、疣微菌目、伯克菌目、红蝽菌目数量上调,调脾安肠方组小鼠肠道菌群中厚壁菌门、双歧杆菌目、拟杆菌目和乳杆菌目菌群数量增加;模型组的标志物种包括肠球菌科、肠球菌属、帕拉普菌科、普雷沃菌属等,调脾安肠方组的标志物种包括双歧杆菌目、双歧杆菌科、双歧杆菌属及拟杆菌目的S24-7科等,黄连素组的标志物种包括颤螺菌属、副拟杆菌属、粪球菌属、瘤胃球菌属和紫单胞菌科等.结论 伊立替康会导致小鼠肠道菌群物种丰度、均匀度及多样性下降,增加β-葡萄糖醛酸苷酶活性,调脾安肠方可调节肠道菌群结构并降低毒性代谢产物活性.

目的:建立加味黄连膏HPLC指纹图谱,结合化学模式识别方法筛选差异标志物,进行定量检测,并研究其对皮肤的保护作用.方法:采用高效液相色谱法考察21批加味黄连膏的相似度并建立指纹图谱,结合化学模式识别,以变量重要性投影(VIP)值＞1为标准筛选影响加味黄连膏质量的差异标志物,通过含量测定对其质量进行评价,并以加味黄连膏对B16F10细胞酪氨酸酶抑制活性及黑色素生成的抑制活性为指标评价其皮肤保护作用.结果:加味黄连膏的HPLC指纹图谱中21批样品(S1～S21)的相似度＞0.950,共标定17个共有峰,并指认出8个峰,盐酸黄柏碱、芝麻酚、阿魏酸、盐酸黄连碱、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、姜黄素和芝麻素.OPLS-DA结果显示,3号峰(盐酸黄柏碱),5号峰(阿魏酸),15号峰(姜黄素),16号峰(芝麻素)为影响加味黄连膏质量的差异标志物,其含量分别为0.021 0～0.028 7、0.006 7～0.010 0、0.021 5～0.025 8、0.209 5～0.235 5mg·g-1,且加味黄连膏对B16F10细胞酪氨酸酶抑制率为100.33％,黑色素抑制率为59.80％.结论:建立的指纹图谱及含量测定方法为加味黄连膏的质量评价提供了可靠的理论依据,为工业化生产提供了科学的质控依据;加味黄连膏具有一定的皮肤保护作用,可为其临床应用提供参考.

目的 建立高效液相色谱(HPLC)法测定古、今千金黄连丸中生物碱(表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱)和梓醇的含量,并比较其含量差异,初步评价不同制备工艺不同配比下千金黄连丸治疗糖尿病药效差异.方法 生物碱溶剂为甲醇盐酸(100:1),检测条件为色谱柱C18柱,乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(50:50),检测波长345 nm,柱温30℃,流速1 mL·min-1,进样量10 μL;梓醇溶液为甲醇:水(20:80),检测条件为色谱柱C18柱,甲醇-0.1％磷酸溶液(1:99),检测波长210 nm,柱温30℃,流速1 mL·min-1,进样量10 μL.结果 所建立的方法专属性强,5 种成分的分离效果好,在各自的线性范围内均具有良好的线性关系(R2>0.999),重复性、精密度、稳定性及加样回收率考察均符合要求.古法1:1 中4 种生物碱含量都最高,梓醇含量最低;古法1:10 中4 种生物碱含量最低;今法1:1 各含量均高于古法1:10,今法1:10 中仅小檗碱含量略低于今法1:1,其余均高与今法1:1.主成分分析(PCA)结果表明4 种千金黄连丸的化学成分含量有很大差异.结论 该方法简便、准确、重复性好,可用于千金黄连丸的质量控制,并为探究千金黄连丸药效差异提供理论基础.

目的 对天王补心丸质量分析中发现的异常成分进行研究,建立薄层色谱(TLC)、超高效液相色谱—三重四极杆质谱(UPLC-QQQ-MS)同时测定天王补心丸中盐酸小檗碱、表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀等4种外源性污染成分的分析方法.方法 采用TLC法,通过优化展开系统,对158批样品进行定性鉴别;针对异常斑点,采用HPLC-Q/TOF-MS进行成分鉴定确认;采用UPLC-QQQ-MS进行定量分析.结果 158批天王补心丸样品中有9批检出盐酸小檗碱、表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀等4种外源性污染成分,分别在0.97～483.34、0.98～98.49、1.00～100.50、0.88～87.75 ng·mL-1内呈线性,回收率为99.30％～103.99％,平均标准偏差(RSD)为0.90％～2.62％(n=6),9批样品中上述4种成分的含量分别为20.3～104.1、1.0～17.6、0.4～30.6、3.2～24.8μg·g-1.结论 该方法简便、准确、专属性强,可为天王补心丸的质量控制提供参考.

目的:基于传质模型探索乙醇溶液环境中黄连生物碱的纳滤分离机制.方法:采用纳滤传质模型结合Box-Behnken设计方法,分析黄连生物碱树脂洗脱液的纳滤分离规律,探索乙醇溶液环境下 3 种生物碱类成分的纳滤分离机制.结果:根据构建的纳滤分离数学模型,用于考察分离因素与成分分离行为的内在关系,乙醇溶液浓度对盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、盐酸黄连碱截留率均具有显著性影响,与溶质的油水分配系数存在相关性.拟合方程并分析黄连生物碱截留率对考察因素的敏感系数,3 种生物碱对纳滤膜相对截留分子质量的敏感系数均大于 50、溶液pH的敏感系数均大于 30,孔径筛分、电荷效应占据纳滤分离的主导地位.黄连生物碱传质系数随着乙醇浓度升高而下降,对乙醇浓度的敏感系数表现为盐酸巴马汀>盐酸小檗碱>盐酸黄连碱.结论:根据 3 种生物碱传质系数与乙醇浓度的幂函数曲线差异,为中药复杂溶液体系下多成分的有序分离提供了理论支撑.

目的:建立一测多评法(QAMS)同时测定岩黄连及其制剂中脱氢甲卡维丁、脱氢异阿朴卡维丁、脱氢卡维丁、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的含量.方法:采用 Waters X-Select? CSHTM C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱;以乙腈-0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相,梯度洗脱;流速为 1.0 mL/min;柱温为 30℃;检测波长为 345 nm.结果:上述成分在各自的浓度范围内线性关系良好(r≥0.9994).以脱氢卡维丁为内标,脱氢甲卡维丁、脱氢异阿朴卡维丁、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的相对校正因子分别为1.4779、2.1411、0.7296、0.7642;外标法与QAMS法测得这5 个成分的含量结果没有明显差异.结论:该研究建立了岩黄连及其制剂中脱氢甲卡维丁、脱氢异阿朴卡维丁、脱氢卡维丁、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱 5 个成分的QAMS法,可用于岩黄连及其制剂的质量控制.

1 病例资料患者,男性,37 岁,入院前一周自觉扁桃体炎前往社区医院就诊,血常规显示:白细胞(white blood cell,WBC)2.2×109/L、血红蛋白(hemoglobin,Hb)70 g/L、血小板(platelets,PLT) 39×109/L,社区医院建议转上级医院治疗.2022 年 2 月 21 日为进一步诊治来我院,入院主诉发现血常规异常 1 周,检查血常规:WBC 3.65×109/L、Hb 66 g/L、PLT 32 ×109/L、分类不明细胞 18％、晚幼粒细胞 1％.体格检查:体温 36.4 ℃、呼吸 21 次/分、脉搏 114次/分、血压 109/78 mmHg(1 mmHg≈0.133 kPa)、心率 114 次/分,律齐.发现空腹血糖升高 1 年,1 年间未规律检测血糖,未进一步诊治,入院第 1 天查空腹血糖 18.54 mmol/L,予以二甲双胍口服及胰岛素注射治疗.进一步完善骨髓细胞学检查,发现骨髓增生极度活跃,粒红比 0.17,原始细胞 89.5％.流式细胞术发现CD19+、CD33+、CD34+、CD117+、MPO+、sKappa+.入院诊断为急性混合性白血病(急性B细胞白血病、急性髓系白血病).患者于 2 月 25 日开始接受VDLP(硫酸长春新碱、盐酸柔红霉素、左旋门冬酰胺酶、醋酸泼尼松)和阿糖胞苷化疗,化疗后 1 周出现重度骨髓抑制、三系减少,加用复方黄连素以及诺氟沙星清洁肠道,预防肠道感染,使用伊曲康唑胶囊预防真菌感染、磺胺预防卡氏肺孢子虫感染,并予以人粒细胞刺激因子升白细胞治疗.