碳青霉烯类耐药已经逐渐成为中国新生儿重症监护室面临的严峻问题。耐碳青霉烯类肠杆菌(carbapenem-resistant enterobacteriaceae，CRE)通过产生碳青霉烯酶，水解包括碳青霉烯类在内的绝大部分β-内酰胺类抗生素，具有高度的耐药性。碳青霉烯酶根据Amber分类可分为A、B、D三类，不同碳青霉烯酶对特定β-内酰胺类抗生素的水解活性不同。目前，CRE在中国NICU住院新生儿中检出率高、病死率高、具有高度的传播性。CRE在新生儿的治疗非常困难，可选药物极其有限、药代/药效动力学数据匮乏、最佳剂量/用药间隔不确定、缺少联合用药研究等因素均给有效抗菌药物治疗带来巨大挑战。成人和儿童中针对CRE主要的抗菌药物包括碳青霉烯类、头孢他定/阿维巴坦、磷霉素、多黏菌素类、氨曲南等，但在新生儿中的使用鲜有研究。CRE一旦定植和感染，清除和治疗极其困难，因此在新生儿病房严格执行医院感染防控措施和抗菌药物使用管理，减少CRE产生、遏制传播、降低感染率是应对CRE流行的最重要措施。

目的:研究耐药铜绿假单胞菌临床分离株β-内酰胺酶基因的携带状况，及其对β-内酰胺类抗菌药物耐药性的作用。方法:收集2018年3月至2019年5月浙江省杭州市和宁波市两个地区6所医院住院患者首次发现感染时临床分离的98株耐药铜绿假单胞菌，其中宁波地区39株，杭州地区59株。所有菌株采用琼脂稀释法对14种抗菌药物进行敏感性试验，采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析A、B、C、D四类共39种β-内酰胺酶基因携带情况，阳性基因测序后作BLAST比对。采用SPSS 24.0软件对数据进行分析。结果:98株耐药铜绿假单胞菌中，多重耐药(MDR)菌占81.63%，广泛耐药(XDR)菌占12.25%。所有菌株对多黏菌素B敏感，对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为94.90%和82.65%，宁波地区分离株对阿米卡星、妥布霉素和庆大霉素的耐药率高于杭州地区分离株( χ2＝31.962、22.440和29.671， P<0.01)，杭州地区分离株对氨曲南和亚胺培南的耐药率均高于宁波地区分离株( χ2＝4.181和5.543， P<0.05)。共检出7种β-内酰胺酶基因，其中 PDC和 OXA-50群的检出率最高，均为100.00%， TEM、GES和 OXA-10群只在宁波地区分离株中检出， KPC只在杭州地区分离株中检出。β-内酰胺酶基因阳性模式有7种，所有菌株均携带 PDC和 OXA-50群，55株(56.12%)只检出 PDC和 OXA-50群。检出 PDC、OXA-50群基因为国内首次报道。 结论:携带 PDC和 OXA-50群基因是导致铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药的重要原因。

目的:监测2018年中国院内革兰阴性杆菌对常用抗菌药物的敏感性。方法:前瞻性收集2018年1至12月全国13家教学医院革兰阴性杆菌。采用琼脂稀释法及微量肉汤稀释法测定美罗培南等抗菌药物的最低抑菌浓度（MICs）。采用美国临床和实验室标准协会（CLSI）2019年M100S（第29版）标准进行药敏结果判断。数据分析采用WHONET-5.6软件。结果:共收集1 214株非重复革兰阴性杆菌，血和无菌体液标本来源占96.7%（1 174/1 214）。主要抗菌药物对871株肠杆菌科细菌的敏感率依次为阿米卡星（93.2%，812/871）、美罗培南（92.0%，801/871）、厄他培南（88.9%，774/871）、亚胺培南（88.4%，770/871）、哌拉西林/他唑巴坦（84.0%，732/871）、头孢哌酮/舒巴坦（83.1%，724/871）、头孢吡肟（71.4%，622/871）、米诺环素（68.9%，600/871）、头孢他啶（66.9%，583/871）及左氧氟沙星（54.4%，474/871）。大肠埃希菌对三代头孢菌素的耐药率分别为61.5%（155/252）（头孢曲松）和60.7%（153/252）（头孢噻肟）。肺炎克雷伯菌对三代头孢菌素的耐药率分别为56.3%（125/222）（头孢曲松）和57.7%（128/222）（头孢噻肟）。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶（ESBLs）检测阳性率分别为50.4%（127/252）和18.0%（40/222），且全部ESBLs阳性菌株对亚胺培南和美罗培南的敏感率均>95%。碳青霉烯耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的发生率分别为2.8%（7/252）和20.3%（45/222）。对阴沟肠杆菌、产气克雷伯菌和弗劳地柠檬酸杆菌，抗菌活性最高的药物依次为替加环素（96.3%~100%）、阿米卡星（94.9%~97.1%）、美罗培南（89.8%~96.6%）及亚胺培南（89.8%~94.9%）。奇异变形杆菌、摩根摩根菌和黏质沙雷菌对美罗培南、阿米卡星的敏感率均大于90%。对67株碳青霉烯耐药的肠杆菌科细菌（CRE）进行改良碳青霉烯灭活试验（mCIM）显示，45株为丝氨酸型碳青霉烯酶，20株为金属酶。铜绿假单胞菌对美罗培南和亚胺培南的敏感率分别为73.2%（112/153）和66.0%（101/153）。鲍曼不动杆菌对黏菌素的敏感率最高（100%，163/163），其次是替加环素（87.1%，142/163）。血标本与其他感染来源的标本相比较，肺炎克雷伯菌[17.6%（27/153）比21.7%（15/69）]和鲍曼不动杆菌[68.3%（71/104）比71.2%（42/59）]碳青霉烯耐药比例低，而大肠埃希菌[2.5%（4/198）比0%（0/54）]和铜绿假单胞菌[37.0%（33/89）比18.8%（12/64）]碳青霉烯耐药比例高。结论:碳青霉烯类对肠杆菌科细菌仍保持较高的抗菌活性，尤其是仅产ESBLs的菌株。碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌应引起足够重视。产碳青霉烯酶是当前我国碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌最重要的耐药机制。

沙门菌是一种重要的食源性传染病菌，可引起胃肠炎、肠热症、血液感染及肠外局灶性感染等多种沙门菌病，是全球主要公共卫生问题。抗生素对沙门菌病防治发挥了重要作用。随着治疗沙门菌病传统一线药物耐药的发生，阿奇霉素已成为常用抗菌药物之一。但已有研究报道耐阿奇霉素沙门菌菌株，且沙门菌对阿奇霉素耐药日益普遍并逐年呈上升趋势。主动外排泵活性增强、内酯环结构被破坏、核糖体甲基化、携带ICE_erm42基因可能是耐药相关机制。沙门菌对阿奇霉素耐药的发现、监测及深入研究，对临床合理使用抗生素并延缓其耐药趋势有重要作用。该文将沙门菌对阿奇霉素的耐药流行病学及相关机制研究进展进行综述。

幽门螺杆菌（ Helicobacter pylori， H. pylori）耐药在中国是一个愈发严重的问题，严重影响了 H. pylori感染的治疗。为了克服这一问题，需要根据当地或个体的抗生素耐药表型和基因型数据以指导个体化的治疗。中国幽门螺杆菌分子医学中心（CCHpMM）郜恒骏教授团队牵头进行了这项大规模的多中心研究，调查中国 H. pylori的耐药表型和基因型。研究从中国5个地区（9个CCHpMM分中心）的 H. pylori感染者的胃活检样本中分离培养 H. pylori菌株进行抗生素耐药表型和基因型检测，并评价了两者的一致性。该研究成功分离和培养了4 242株 H. pylori，成功率为84.43%。耐药表型结果显示 H. pylori对克拉霉素、左氧氟沙星、阿莫西林、呋喃唑酮、四环素、甲硝唑的原发和继发耐药率分别为37.00%和76.93%、34.21%和61.58%、2.20%和6.12%、1.61%和3.11%、1.18%和3.31%、87.87%和93.48%。甲硝唑/克拉霉素、甲硝唑/左氧氟沙星和克拉霉素/左氧氟沙星的双重耐药率分别为43.6%、38.4%和26.1%。 H. pylori克拉霉素和左氧氟沙星耐药基因型主要是23S rRNA第2 143和2 143位碱基、gyrA基因第87和91位氨基酸的突变，与耐药表型的Kappa一致性系数分别为0.810和0.782。

目的:分析湖南省人源和水产动物源环丙沙星-头孢噻肟-阿奇霉素共耐药汤卜逊沙门菌的分子流行特征。方法:对湖南省食源性疾病散发病例粪便样本和水产品样本中分离的汤卜逊沙门菌进行环丙沙星-头孢噻肟-阿奇霉素共耐药菌株的筛选与鉴定，使用肉汤稀释法对11种抗菌药进行体外药敏试验，并利用全基因组测序技术分析菌株的耐药机制以及进化关系。结果:从粪便样本和水产品样本中共分离到19株汤卜逊沙门菌，其中9株菌对环丙沙星-头孢噻肟-阿奇霉素共耐药。进一步分析发现8株菌检出IncC质粒，携带质粒介导的喹诺酮类药物耐药基因 qepA- qnrS1、β-内酰胺酶耐药基因 blaCMY-2和大环内酯类耐药基因 mph（A）；1株检出IncR质粒，携带 qnrB4- aac（6 ′） -Ib-cr、 blaOXA-10和 mph（A）耐药基因。遗传环境分析发现 qnrS1、 qepA、 mph（A）和 blaCMY-2基因可能分别通过插入序列IS Kra4、IS91、IS6100和IS Ecp1整合到耐药菌的基因组上。基于核心基因组生成的系统发生树表明，人源和水产动物源环丙沙星-头孢噻肟-阿奇霉素共耐药汤卜逊沙门菌属于同一进化分支，具有较近的遗传进化关系。 结论:湖南省人源和水产动物源样本中检出对环丙沙星-头孢噻肟-阿奇霉素共耐药汤卜逊沙门菌，提示此类多重耐药菌已在人和水产动物之间传播。

目的:探讨不同术前胆道引流方式对恶性梗阻性黄疸胆汁细菌培养及耐药性的影响。方法:采用回顾性描述性研究方法。收集2015年1月至2018年12月解放军总医院第一医学中心收治的317例恶性梗阻性黄疸病人的临床资料；男216例，女101例；年龄为（62±10）岁。317例病人中，158例术前无胆道引流，115例术前胆道引流方式为经皮经肝穿刺胆道引流（PTCD），44例术前胆道引流方式为经内镜逆行胆道引流（ERBD）。观察指标：（1）不同术前胆道引流方式胆汁细菌培养情况。（2）胆汁细菌培养阳性病人临床病理特征。（3）不同术前胆道引流方式胆汁细菌耐药性情况。正态分布的计量资料以 x±s表示，计数资料以绝对数或百分比表示，组间比较采用 χ2检验，两两比较进行Bonferroni校正，多重比较中检验水准为0.016 7。 结果:（1）不同术前胆道引流方式胆汁细菌培养情况：317例病人中，116例细菌培养阳性，包括43个菌种共168株菌株，其中术前无胆道引流36例（46株），行PTCD 39例（49株），行ERBD 41例（73株）。①317例病人细菌培养阳性率为36.59%（116/317），术前无胆道引流、行PTCD、行ERBD病人细菌培养阳性率分别为22.78%（36/158）、33.91%（39/115）、93.18%（41/44），3者细菌培养阳性率比较，差异有统计学意义（ χ2=74.066， P<0.05），其中术前行PTCD与术前无胆道引流病人比较，差异无统计学意义（ χ2=4.137， P>0.016 7），术前行ERBD与术前无胆道引流和行PTCD病人比较，差异均有统计学意义（ χ2=72.305，44.718， P<0.016 7）。②多重细菌感染占比为36.21%（42/116），术前无胆道引流、行PTCD、行ERBD病人多重细菌感染占比分别为19.44%（7/36）、23.08%（9/39）、63.41%（26/41），3者多重细菌感染占比比较，差异有统计学意义（ χ2=20.431， P<0.05），其中术前行PTCD与术前无胆道引流病人比较，差异无统计学意义（ χ2=0.147， P>0.016 7），术前行ERBD与术前无胆道引流和行PTCD病人比较，差异均有统计学意义（ χ2=15.133，13.215， P<0.016 7）。③多重耐药菌占比为30.95%（52/168），术前无胆道引流、行PTCD、行ERBD病人多重耐药菌占比分别为15.22%（7/46）、26.53%（13/49）、43.84%（32/73），3者多重耐药菌占比比较，差异有统计学意义（ χ2=11.447， P<0.05），其中术前行PTCD与术前无胆道引流病人比较，差异无统计学意义（ χ2=1.827， P>0.016 7），术前行ERBD与术前无胆道引流病人比较，差异有统计学意义（ χ2=10.490， P<0.016 7），术前行ERBD与术前行PTCD病人比较，差异无统计学意义 χ2=3.772， P>0.016 7）。（2）胆汁细菌培养阳性病人临床病理特征：病人年龄、腹部手术史、黄疸程度、胆道梗阻位置均与细菌培养阳性无关（ χ2=4.865，1.423，4.922，0.030， P>0.05）。（3）不同术前胆道引流方式胆汁细菌耐药性情况：术前无胆道引流病人中革兰氏阳性菌对呋喃妥因、利奈唑烷、替加环素耐药率均为0，革兰氏阴性菌对哌拉西林他唑巴坦、庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星、亚胺培南耐药率均为0。行PTCD病人中革兰氏阳性菌对利奈唑烷、替加环素耐药率均为0。行ERBD病人中革兰氏阳性菌对利奈唑烷、替加环素耐药率均为0。革兰氏阳性菌耐药率最低的前4种抗菌药物分别为利奈唑烷、替加环素、万古霉素和呋喃妥因。革兰氏阴性菌耐药率最低的前4种抗菌药物分别为亚胺培南、哌拉西林他唑巴坦、阿米卡星和妥布霉素。7株真菌菌株对抗真菌药物耐药率为0。 结论:术前行ERBD的病人更易发生感染性并发症，且耐药菌及多重耐药菌比例高。革兰氏阳性菌感染可选用利奈唑胺、替加环素、万古霉素。革兰氏阴性菌感染可选用亚胺培南、哌拉西林他唑巴坦、阿米卡星、妥布霉素。

目的:探讨骨肉瘤阿霉素耐药细胞外泌体与 MDR1、miRNAs的相关性及作用机制。 方法:选取骨肉瘤MG63和U2OS细胞株构建阿霉素耐药株，通过MTT法检测耐药和敏感株的50%抑制浓度（half maximal inhibitory concentration，IC 50），于15~120 min中间隔15 min观察一次荧光染色检测荧光强度的变化，RT-PCR和Western Blot检测 MDR1的mRNA和P-gp蛋白表达水平等验证骨肉瘤细胞耐药性；通过粒径分析及Western Bolt检测鉴定外泌体。观察PKH26标记的阿霉素耐药细胞外泌体的胞吞作用，并采用MTT法和细胞划痕实验检测阿霉素耐药细胞外泌体与骨肉瘤细胞共培养后细胞的增殖水平、迁移能力及耐药性的变化。通过骨肉瘤源性外泌体测序及生物信息分析、RT-PCR验证miRNAs在骨肉瘤敏感和耐药细胞中的mRNA差异表达水平。观察MG63和U2OS中正常骨肉瘤细胞组与耐药细胞组、耐药细胞+正常外泌体组、耐药细胞+耐药外泌体组成瘤裸鼠肿瘤生长情况，血清外泌体鉴定及其miR-21-5p的mRNA表达水平，RT-PCR、Western Blot和免疫组化检测肿瘤组织中 MDR1的mRNA和miR-21-5p蛋白的表达水平。 结果:MG63和U2OS中阿霉素耐药株IC 50（11.81、9.33 μg/ml）高于正常株（2.21、0.93 μg/ml），荧光强度减弱速度高于正常株， MDR1的mRNA和P-gp的蛋白表达水平（2.15±0.10、2.127±0.12；0.92±0.11、0.73±0.10）均高于正常株（1.12±0.16，1.02±0.11；0.46±0.03、0.30±0.04），差异均有统计学意义（ P<0.05）。耐药外泌体分别与正常株共培养时可通过胞吞作用进入骨肉瘤细胞内集中分布于细胞质。骨肉瘤细胞与耐药外泌体共培养，分别以2、4、6、8 μg/ml的阿霉素浓度处理后，耐药组增殖水平显著上升，耐药组迁移能力（54.20±9.32，19.24±2.88；76.40±5.41，30.26±4.87）较正常组（35.947±3.922，6.72±3.546；51.217±5.546，19.31±1.930）均高，差异有统计学意义（ P<0.05）。选择外泌体测序和生信分析中10种上调明显的miRNAs，进行RT-PCR验证其在正常和耐药株中的mRNA表达差异性，其中耐药株miR-372-3p、miR-21-5p、miR-155-5p表达水平均显著升（MG63：5.89±0.26 vs. 0.99±0.06；U2OS：1.05±0.07 vs. 8.80±0.93），差异有统计学意义（ P<0.05）。MG63和U2OS中正常细胞组与耐药细胞组比较、正常外泌体组与耐药外泌体组比较，后两者裸鼠肿瘤体积呈现不同程度的增速；终末肿瘤重量不同程度地增加。血清外泌体中耐药组miR-21-5p的mRNA表达水平（1.13±0.12、1.14±0.12；0.90±0.07，0.93±0.04）均较正常组（0.86±0.07、0.86±0.05；0.71±0.05，0.75±0.03）增高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:骨肉瘤耐药细胞外泌体通过细胞间传递 MDR1基因、miRNAs使细胞的增殖水平和迁移能力增强；耐药细胞及其成瘤裸鼠血清和肿瘤组织中 MDR1基因、miR-21-5p表达上调，提示其可能参与调节骨肉瘤MG63、U2OS的耐药过程。

目的:对武汉地区呼吸道非结核分枝杆菌(NTM)的分离与耐药情况,以及确诊为NTM肺病患者的临床特征进行分析,为疾病的防治提供参考.方法:采用回顾性研究方法,搜集2021年3月至2023年10月于武汉市肺科医院就诊的疑似肺部分枝杆菌感染住院患者作为研究对象,共计8619例.研究对象年龄均≥15岁,呼吸道样本(包括痰、诱导痰、支气管肺泡灌洗液)分枝杆菌病原学(分枝杆菌培养)阳性和(或)菌种鉴定为NTM.收集所有研究对象的病史、临床特征、影像学表现、临床诊断及治疗等资料.对NTM菌株分离情况、人口学特征及耐药情况进行统计;将确诊为NTM肺病患者,按胞内分枝杆菌(胞内组)、脓肿分枝杆菌(脓肿组)及堪萨斯分枝杆菌感染(堪萨斯组)分为三组,比较各组研究对象的基本情况、临床症状、影像学表现、基础疾病及合并肺部疾病等方面的情况.结果:8619例研究对象中有629例的临床分离菌株鉴定为NTM菌株,NTM分离率为7.30％.共分离653株NTM菌株,主要菌种包括胞内分枝杆菌398株(60.95％)、脓肿分枝杆菌138株(21.13％)、鸟分枝杆菌41株(6.28％)、堪萨斯分枝杆菌41株(6.28％).确诊为NTM肺病的510例患者中,女性297例(58.24％),主要临床症状为咳嗽(71.96％,367/510)、咳痰(51.76％,264/510)、咯血(26.67％,136/510);影像学表现主要为斑片影(61.57％,314/510)、结节影(65.49％,334/510)、支气管扩张影(79.02％,403/510)、空洞影(40.98％,209/510);基础疾病主要为贫血(24.12％,123/510)和低蛋白血症(24.90％,127/510);合并肺部疾病主要有肺气肿肺大疱(18.63％,95/510)、慢性阻塞性肺疾病(17.84％,91/510).三组NTM肺病为胞内组332例、脓肿组115例、堪萨斯组35例.胞内组、脓肿组、堪萨斯组女性分别占55.12％(183/332)、75.65％(87/115)、17.14％(6/35),差异有统计学意义(x2=39.534,P＜0.001);胞内组、脓肿组、堪萨斯组平均年龄分别为(63.60±10.67)岁、(60.60±10.26)岁、(53.30±13.20)岁,差异有统计学意义(F=15.724,P＜0.001);胞内组、脓肿组、堪萨斯组吸烟者占比[分别为 23.19％(77/332)、12.17％(14/115)、42.86％(15/35);x2=15.623,P＜0.001]、饮酒者占比[分别为10.54％(35/332)、4.35％(5/115)、22.86％(8/35);x2=10.079,P=0.006]差异均有统计学意义.胞内组、脓肿组、堪萨斯组的支气管扩张影发生率[分别为78.31％(260/332)、90.43％(104/115)、54.29％(19/35);x2=22.345,P＜0.001]、空洞影发生率[分别为 42.77％(142/332)、29.57％(34/115)、68.57％(24/35);x2=17.534,P＜0.001]差异均有统计学意义.胞内组、脓肿组、堪萨斯组慢性阻塞性肺病发病率[分别为18.67％(62/332)、15.65％(18/115)、37.14％(13/35);x2=8.222,P=0.016]、肺曲霉病发病率[分别为 6.93％(23/332)、1.74％(2/115)、11.43％(4/35);x2=7.016,P=0.030]差异均有统计学意义.鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌对克拉霉素、阿米卡星、利奈唑胺耐药率分别为 0、0、23.53％(4/17)和 3.14％(5/159)、6.92％(11/159)、13.21％(21/159);堪萨斯分枝杆菌对克拉霉素、阿米卡星、利奈唑胺、莫西沙星、利福平及利福布汀耐药率均为0,对环丙沙星耐药率为43.75％(7/16);脓肿分枝杆菌对克拉霉素、阿米卡星、利奈唑胺、头孢西丁耐药率分别为7.02％(4/57)、1.75％(1/57)、43.86％(25/57)、8.77％(5/57).结论:武汉地区疑似肺部分枝杆菌感染住院患者呼吸道分离NTM菌种主要以胞内分枝杆菌、脓肿分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌为主;除堪萨斯分枝杆菌外,其他NTM对常用抗结核药物均有较高耐药率;胞内分枝杆菌肺病、脓肿分枝杆菌肺病和堪萨斯分枝杆菌肺病患者性别分布、影像学表现及合并症均存在一定的差异.

铜绿假单胞菌是院内感染常见致病菌。碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌（CRPA）明显增加死亡风险，需高度重视。CRPA耐药机制包括外排系统过表达、膜通透性下降、产碳青霉烯酶与生物膜等，碳青霉烯酶以B类金属-β内酰胺酶中的VIM和IMP为主。ST235是最高危克隆，在我国及世界范围内广泛分布。预防CRPA感染是关键，治疗可选择多黏菌素、头孢他啶/阿维巴坦等药物，期望针对不同耐药机制的新型抗菌药物能早日惠及患者。