目的:探讨FK1706对神经吻合后神经源性膀胱(NB)大鼠膀胱功能恢复的研究。方法:40只健康成年雄性SD大鼠(河南省实验动物中心提供)按照随机数字表法分为FK1706+神经端侧吻合组(FK1706+ECG)15只、神经端侧吻合组(ECG)15只和手术对照组(SCG)10只。FK1706+ECG大鼠先离断左侧腰6(L6)和骶1(S1)脊神经前后根，然后将左侧L6前根端侧吻合到左侧L4前根上，术后连续8周给予皮下注射FK1706溶液(0.32 mg/kg)；ECG大鼠手术方法同FK1706+ECG大鼠，术后连续8周注射相同剂量的30%的二甲基亚砜(DMSO)；SCG大鼠离断左侧L6后根和S1前后根，作为手术对照组，术后连续8周注射相同剂量的30%的DMSO。术后4个月，3组大鼠行尿动力学测定和神经根电刺激膀胱压力测定，比较不同组大鼠的膀胱功能。两组间比较采用 t检验，3组间比较采用单因素方差分析。 结果:电刺激SCG组大鼠左侧L6VR膀胱压力升高为(34.7±3.9) mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)，电刺激FK1706+ECG组和ECG组大鼠吻合口近端L4VR膀胱压力升高值分别为[(22.5±2.8)、(17.9±3.2) mmHg]，电刺激FK1706+ECG组大鼠膀胱压力升高值低于SCG组( t＝9.104， P<0.01)，但是高于ECG组( t＝4.181， P<0.01)。FK1706+ECG组大鼠的充盈期最大膀胱测压容积[(1.64±0.26) ml]、残余尿量[(0.81±0.12) ml]和膀胱顺应性[(0.175±0.089) ml/mmHg]较SCG大鼠明显增加[充盈期最大膀胱测压容积(0.36±0.08) ml、残余尿量(0.08±0.03) ml和膀胱顺应性(0.023±0.013) ml/mmHg， t＝14.990、22.540、6.513， P<0.01]，但较ECG组大鼠小[充盈期最大膀胱测压容积(2.18±0.34) ml、残余尿量(1.21±0.22) ml和膀胱顺应性(0.261±0.106) ml/mmHg， t＝4.875、6.166、2.402，P <0.05]。SCG、FK1706+ECG和ECG 3组大鼠的排尿期最大逼尿肌收缩压[(30.2±2.4)、(28.9±2.3)、(27.9±2.4) mmHg]差异无统计学意义( F＝2.866， P>0.05)。 结论:FK1706能促进神经吻合后NB大鼠膀胱功能的恢复。

目的:探讨FK1706对神经吻合后神经源性膀胱(NB)大鼠膀胱形态恢复的影响。方法:40只健康成年雄性SD大鼠(河南省实验动物中心提供)按照随机数字表法分为FK1706＋神经端侧吻合组(FK1706＋ECG，15只)、神经端侧吻合组(ECG，15只)和手术对照组(SCG，10只)。FK1706＋ECG大鼠先离断左侧腰6(L6)和骶1(S1)脊神经前后根，然后将左侧L6前根端侧吻合到左侧L4前根上，术后连续8周给予皮下注射FK1706溶液(0.32 mg/kg)；ECG大鼠手术方法同FK1706＋ECG大鼠，术后连续8周注射相同剂量的30%的二甲基亚砜(DMSO)；SCG大鼠离断左侧L6后根和S1前后根，作为手术对照组，术后连续8周注射相同剂量的30%的DMSO。术后4个月，麻醉3组大鼠，打开下腹部，暴露膀胱，取出膀胱并称重，剪开膀胱并测量膀胱壁厚度，比较3组大鼠膀胱湿重及膀胱壁厚度。之后将膀胱标本置于10%的福马林中，并放在4 ℃冰箱保存，将膀胱标本制作成石蜡切片，然后行苏木精-伊红(HE)和苦味酸-酸性品红(VG)染色，显微镜下观察并拍照，进行图像分析，计算并比较3组大鼠膀胱纤维化面积。两样本均数比较采用 t检验。 结果:FK1706＋ECG组大鼠膀胱湿重[(0.291±0.023) g]和膀胱壁厚度[(1.613±0.051) mm]明显高于SCG组[(0.122±0.017) g和(1.169±0.035) mm， t＝19.463、23.537， P<0.01]，但低于ECG组[(0.415±0.032) g和(2.005±0.075) mm， t＝11.345、15.583， P<0.01]。HE染色显示：SCG组大鼠膀胱组织形态正常，上皮扁平，肌束排列整齐，肌束间结缔组织紧密；FK1706＋ECG组和ECG组大鼠膀胱肌层排列不规则，并且有水肿，但FK1706＋ECG组大鼠的肌层排列不规则和水肿程度较ECG组轻。VG染色显示：FK1706＋ECG大鼠和ECG大鼠膀胱纤维化面积[(16.99±2.45)%比(19.99±2.55)%]明显大于SCG大鼠膀胱纤维化面积[(11.10±1.38)%， t＝6.796、9.928， P<0.01]，但是FK1706＋ECG大鼠膀胱纤维化程度较ECG大鼠轻( t＝3.059， P<0.01)。 结论:FK1706能够促进神经吻合后NB大鼠膀胱形态的恢复。

目的:通过体外培养神经细胞(SH-SY5Y)观察FK1706对神经细胞再生的作用并探讨其机制。方法:体外培养SH-SY5Y细胞，根据不同处理分别分为FK1706组、神经生长因子组(NGF)、FK1706＋NGF组、FK1706＋NGF＋格尔德霉素(Geldanamycin)组和空白对照组。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测不同组细胞增殖活性，测量细胞轴突长度。分子生物学检测不同细胞中磷酸化促分裂原活化蛋白激酶激酶激酶(p-Raf)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、p-Raf/Raf及p-ERK/ERK表达水平。通过免疫共沉淀(IP)检测不同细胞中热休克蛋白90(HSP90)与Raf结合的复合体表达水平。使用方差分析比较各组间数据。结果:CCK-8检测显示FK1706＋NGF组细胞增殖活性最强(1.12±0.08)，高于FK1706组和NGF组(0.61±0.07、0.89±0.04)，差异有统计学意义( t＝6.824， P<0.05)，加入格尔德霉素可以抑制其增殖活性(0.31±0.02)；FK1706＋NGF组细胞轴突最长，轴突长度为(277.40±18.64) μm，高于FK1706组和NGF组[(71.24±6.12)、(144.61±11.20) μm]，差异有统计学意义( t＝14.577， P<0.05)，FK1706＋NGF＋格尔德霉素组轴突长度[(97.06±11.29) μm]低于FK1706＋NGF组；NGF组p-Raf、p-ERK表达水平分别为(0.58±0.02)和(1.24±0.03)，高于对照组(0.25±0.03、0.76±0.02)和FK1706组(0.23±0.02、0.78±0.03， t1＝23.335， t2＝9.163， P<0.05)，差异有统计学意义，加入FK1706可以增强NGF组p-Raf和p-ERK的表达水平( t1＝21.213， t2＝2.191， P<0.05)，差异有统计学意义，加入格尔德霉素可以抑制FK1706和NGF的协同作用，与细胞轴突长度和增殖活性检测结果一致。IP检测显示FK1706＋NGF组HSP90/Raf复合体相对表达水平最高(1.56±0.04)，显著高于其他组( t＝16.398， P<0.05)，差异有统计学意义，FK1706＋NGF＋格尔德霉素组HSP90/Raf的表达水平(0.93±0.05)低于FK1706组和FK1706＋NGF组。 结论:FK1706可以促进HSP90和Raf结合，提高大鼠肉瘤/促分裂原活化蛋白激酶激酶激酶/促分裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(Ras/Raf/MAPK/ERK)信号通路中Raf和ERK磷酸化水平，促进神经细胞增殖和轴突生长。