目的:构筑具有良好靶向性和生物相容性的新型磁性复合纳米颗粒，验证其对海拉(HeLa)细胞的磁热和放疗增敏协同作用效果。方法:使用牛血清白蛋白(BSA)修饰四氧化三铁(Fe 3O 4)纳米颗粒作为载体，利用碳二亚胺法将L-硒代胱氨酸(SeCyc2)和叶酸(FA)在BSA表面进行偶联，合成磁性复合纳米颗粒Fe 3O 4@BSA@SeCyc2@FA，并对其进行表征。通过评估颗粒的磁热特性，分析HeLa细胞对颗粒的内化作用及使用CellTiter和活性氧(ROS)试剂盒分别对不同实验组的细胞活力和ROS产生量进行检测，以此来评价在磁热联合高能X射线作用下，Fe 3O 4@BSA@SeCyc2@FA纳米颗粒对HeLa细胞的抑制或杀伤效果。 结果:Fe 3O 4@BSA@SeCyc2@FA纳米颗粒的平均粒径为(19.31±4.84)nm，Zeta电位为－25.4 mV(pH＝7)，其具备良好的分散性和稳定性，为后续生物实验奠定基础。通过BSA和FA特征吸收峰并结合纳米颗粒Se元素的含量为10.89 μM，证实L-硒代胱氨酸和叶酸已经成功修饰在复合纳米颗粒表面。所制备颗粒的饱和磁化强度为47.2 emu/g，在518 kHz/16 kAm －1交变磁场作用下，其比吸收率(SAR)为125.4 W/g，可在15 min内升温可达7 ℃，这表明该颗粒具有良好的发热特性。在0～200 μg/ml浓度范围内，颗粒对HUVECs无明显毒性，但HeLa细胞对颗粒内化作用明显，并表现出一定的活力抑制敏感性。在磁热疗联合高能X射线后，HeLa细胞活力明显降低至54.7%，细胞内ROS的生成量较对照组增加了108.2%，实验结果表明，复合纳米颗粒明显增强了HeLa细胞的放射敏感性，磁热联合放疗协同作用对其抑制和杀伤更为有效。 结论:构筑的新型功能化磁性复合纳米颗粒具有作为一种协同磁热和放疗增敏作用纳米系统的潜力，其能够克服单一治疗模式的诸多不足，将为今后体内肿瘤综合治疗提供新的研究思路和基础。

目的 制备叶酸受体靶向诊疗一体化纳米探针,观察其体外主动靶向肝癌细胞的能力,探讨其体外增强US/MRI双模态显像效果和对高强度聚焦超声(HIFU)杀伤肝癌细胞的增效作用.材料与方法 采用双乳化法和碳二亚胺法制备载磁性颗粒和相变材料全氟己烷的靶向叶酸受体的纳米探针,检测其平均粒径、形态结构和液气相变能力.体外观察该纳米探针对肝癌细胞 BEL-7402的主动靶向能力.以 HIFU 体外辐照观察纳米探针的超声成像效果;并对不同含量磁性颗粒 Fe3O4纳米探针进行MRI检查.体外细胞凋亡实验检测该纳米探针联合HIFU对肝癌细胞的增效杀伤能力.结果 成功制备载磁性颗粒和全氟己烷的叶酸受体靶向纳米探针,其平均粒径为(402.50±66.43)nm,形态呈规则球形,其内散在分布磁性颗粒Fe3O4,且HIFU辐照能使其发生液气相变.体外靶向实验显示 BEL-7402细胞周围有大量纳米探针环绕.体外双模态成像显示 HIFU 辐照纳米探针后,超声回声强度明显增强;该纳米探针的MR负性显像能力也随纳米粒中Fe3O4浓度增加而增强.体外细胞凋亡实验显示该纳米探针具有显著提高HIFU杀伤肝癌细胞效果的能力.结论 成功制备的靶向诊疗一体化纳米探针具有良好的体外寻靶能力,不仅能作为多模态显像剂用于超声和MRI,还可协同HIFU增强对肝癌细胞的杀伤效果,从而有望实现肿瘤早期诊断和靶向精准治疗.

目的 制备间氨基苯硼酸修饰磁性多壁碳纳米管复合纳米粒子,建立环境水样中9种微囊藻毒素的磁性固相萃取-HPLC-MS/MS检测方法.方法 通过水热合成方法制备磁性多壁碳纳米管(Fe3O4/MWCNTs)复合纳米粒子,再利用化学氧化法将间氨基苯硼酸修饰在磁性碳纳米管表面形成功能化纳米材料(APBA@Fe3O4/MWCNTs),合成的纳米粒子在水中具有很好的磁响应度和分散能力.应用透射电子显微镜及红外光谱对材料进行表征.对影响萃取效率的一些因素如材料用量、水样pH值、萃取时间和解析条件等进行优化.结果 9种微囊藻毒素的质量浓度为5 ng/ml～200 ng/ml时,线性关系良好,相关系数(r)均＞0.998,在优化后的条件下,3种加标水平下9种微囊藻毒素回收率为79.5％～88.4％,相对标准偏差(RSD)为4.1％ ～7.9％,检出限(LOD)为0.34 ng/L ～4.88 ng/L.结论 间氨基苯硼酸修饰磁性碳纳米管材料对微囊藻毒素具有良好的吸附性能,结合HPLC-MS/MS,可用于富集、分离和测定环境水样中的9种微囊藻毒素.

背景:近来年,分子成像结合医学影像技术和靶向分子探针逐渐成为研究的热点,其相互结合能够在分子水平对靶组织进行观察,从而实现对疾病的发生、发展实时无创成像.目的:制备载磁性颗粒靶向纳米粒探针,探讨其体外超声/CT/MRI成像效果,观察其体外对大鼠肝星状细胞的靶向能力.方法:以高分子材料聚乳酸/羟基乙酸作为外壳、含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列环八肽作为配体,通过双步乳化法制备包载磁性颗粒和全氟辛溴烷的载磁性颗粒靶向纳米粒cRGD-PLGA-Fe3O4-PFOB,检测其理化性质.将载磁性颗粒靶向纳米粒以双蒸水稀释为不同质量浓度的混悬液,体外观察其超声、CT、MRI显影效果.通过碳二亚胺法连接精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列肽与载磁性颗粒靶向纳米粒,验证载磁性颗粒靶向纳米粒的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列连接情况和体外靶向能力.细胞毒性实验测定不同质量浓度载磁性颗粒靶向纳米粒对大鼠肝细胞BRL-3A的毒性作用.结果与结论:①载磁性颗粒靶向纳米粒分散度好,大小较均匀,单个纳米粒呈球形,数个黑色的铁颗粒分布于壳膜上,平均粒径为(221.5±60.3)nm,Fe3O4包封率为38％;②随着载磁性颗粒靶向纳米粒质量浓度的降低,样品的超声回声强度、CT值均逐渐降低;随着纳米粒中Fe3O4颗粒质量浓度的增加,MRI T2加权信号强度逐渐降低;③流式细胞仪检测显示,含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列环八肽与载磁性颗粒靶向纳米粒的连接率为94.13％;体外靶向实验显示,大部分载磁性颗粒靶向纳米粒聚集于大鼠肝星状细胞细胞HSC-T6周围;④不同质量浓度的载磁性颗粒靶向纳米粒对大鼠肝细胞BRL-3A活力无影响;⑤结果表明,载磁性颗粒靶向纳米粒探针不仅能作为多模态显像剂用于超声、CT、MRI,且在体外实验中对大鼠肝星状细胞有较强的靶向能力,对肝纤维化的早期诊断具有重大应用潜力.

目的 建立基于间氨基苯硼酸修饰磁性多壁碳纳米管复合纳米粒子前处理技术的磁性固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定水产品中9种微囊藻毒素.方法 通过水热合成方法制备磁性多壁碳纳米管(Fe304/MWCNTs)复合纳米粒子,利用化学氧化法将间氨基苯硼酸修饰在磁性碳纳米管表面形成功能化纳米材料(APBA@Fe3O4/MWCNTs).应用透射电子显微镜及红外光谱对材料进行表征.通过对萃取效率的影响因素进行优化,建立了乙酸-PBS缓冲溶液-甲醇(2:49:49,V/V)溶液作为提取溶液,使用50 mg的磁性纳米材料萃取15 min,采用5％氨化甲醇作为洗脱溶剂,洗脱时间为10 min的前处理方法.结果 9种微囊藻毒素在5～200 ng/mL范围内,线性关系良好,相关系数(r)均＞0.998,检出限(LOD)为0.15～8.71 μg/kg.3个加标水平的平均回收率为91.8％～103.2％,相对标准偏差(RSD)为3.1％ ～9.5％.结论 该方法可同时测定水产品中9种微囊藻毒素,前处理简单、灵敏度高、相对回收率高,优于国标方法,为水产品中微囊藻毒素的监测提供有力的技术保障.

目的 研究负载人工抗原递呈细胞(aAPC)的四氧化三铁(Fe3O4)磁性碳纳米粒子(aAPC)对滋养细胞凋亡、侵袭及黏附能力的影响.方法 取早孕流产妇女绒毛,分离、鉴定绒毛膜滋养细胞;将磁化aAPC与原因不明复发性流产(URSA)患者血浆混合,采用磁选柱分离与磁化aAPC结合的CD3+T细胞,采用免疫磁珠分选技术分离CD3+T细胞;建立与磁化aAPC结合的CD3+T细胞、滋养细胞,CD3+T细胞、滋养细胞共培养体系,滋养细胞单独培养体系,设置为A、B、C组.AnnexinV-FITC/PI染色法测定各组滋养细胞凋亡情况;细胞迁移(Transwell)小室实验测定各组滋养细胞侵袭能力;黏附实验测定各组滋养细胞黏附能力.结果 与A组比较,B、C组滋养细胞凋亡率均升高,滋养细胞穿过微孔细胞数/视野均减少,光密度值均减小(P<0.05);与B组比较,C组滋养细胞凋亡率升高,滋养细胞穿过微孔细胞数/视野减少,光密度值减小(P<0.05).结论 磁化aAPC可增强滋养细胞侵袭、黏附能力,抑制其凋亡.