目的:筛选与大鼠膝骨关节炎相关的差异代谢物及其代谢通路，为深入研究骨关节炎生物标志物提供线索。方法:60只雄性SPF级SD大鼠按体质量（300 ~ 350 g）采用随机数字表法分为模型组和对照组，每组30只。实验周期分别为4、8和12周，每个周期每组10只大鼠。模型组大鼠左侧膝关节采用改良Hulth法行造模手术，5 d后，驱赶大鼠使之活动，每天30 min。实验期间，两组大鼠均饲喂普通固体饲料、自由饮用自来水。实验期满，采集大鼠膝关节和血液样本。采用苏木素-伊红（HE）染色观察膝关节组织病理学变化，超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱仪（UPLC-Q-TOF-MS）检测血清中小分子代谢物，并通过多元统计分析和数据库比对，筛选与骨关节炎相关的差异代谢物及其相关代谢通路。结果:模型组大鼠膝关节软骨变薄，表层粗糙、缺损或剥脱，软骨细胞变性、坏死、缺失，病变随实验周期延长而加重。筛选出11个与骨关节炎相关的血清差异代谢物，分别为硒代半胱氨酸、6-羟褪黑素、γ-谷氨酰半胱氨酸、花生四烯酸、二氢神经鞘氨醇、白三烯A4、白三烯B4、11，12-环氧-二十碳三烯酸（11，12-EpETrE）、溶血磷脂酰胆碱、神经酰胺和N-花生四烯酰甘氨酸。其中，实验4周时筛选出9个，与对照组比较，模型组5个高表达，4个低表达；实验8周时筛选出8个，与对照组比较，模型组2个高表达，6个低表达；实验12周时筛选出8个，与对照组比较，模型组5个高表达，3个低表达。筛选出2条与骨关节炎密切相关的代谢通路，分别为鞘脂代谢通路和花生四烯酸代谢通路，其中，二氢神经鞘氨醇和神经酰胺归属到鞘脂代谢通路，花生四烯酸、白三烯A4和白三烯B4归属到花生四烯酸代谢通路。结论:骨关节炎疾病进程可以影响血清代谢物谱的构成和水平。11个血清差异代谢物涉及鞘脂代谢通路和花生四烯酸代谢通路，与骨关节炎的发生发展相关。

硒作为人体必需微量元素之一，在人体内可以硒代半胱氨酸酶的特殊形式编码并合成含硒蛋白以发挥活性作用，缺硒可能与体内多种免疫性疾病的发生有关，机体硒营养状态可能与一些病毒感染性疾病的发生相关，硒蛋白缺乏也能影响机体含硒酶类的代谢合成，硒及含硒蛋白可以调节机体正常免疫生物化学反应及发挥机体抗氧化生理作用，缺硒时可导致机体氧化还原失衡和免疫失调而处于氧化应激状态，此状态可促进病毒复制及病毒变异，加重病情。病毒的复制过程也需通过消耗大量硒以合成硒蛋白，硒蛋白反过来能抑制病毒的复制过程；宿主的抗氧化作用及细胞启动自身免疫功能过程等均需消耗体内大量硒，因此适量摄入硒对于疾病控制具有重要意义。

硫氧还蛋白（Trx）系统由Trx、硫氧还蛋白还原酶（TR）和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸组成。Trx是一种重要的抗氧化分子，可抵抗多种应激引起的细胞死亡，在氧化还原反应中发挥着突出作用。TR是含硒（硒代半胱氨酸）的蛋白质，主要有3种形式：TR1（主要分布在胞质）、TR2（主要分布在线粒体）和TR3（主要分布在睾丸）。TR能调节细胞生长和凋亡，细胞癌变后，TR表达增加，促进细胞生长和转移。Trx系统与神经退行性疾病、寄生虫感染、获得性免疫缺陷综合征、类风湿性关节炎、高血压病、心肌炎等密切相关。Trx系统能清除体内活性氧，使细胞内外处于平衡状态，且其与硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）相互作用，对于糖代谢调节和肿瘤治疗具有重要作用。Trx系统是许多疾病进行药物治疗的一个重要靶点。

目的:构筑具有良好靶向性和生物相容性的新型磁性复合纳米颗粒，验证其对海拉(HeLa)细胞的磁热和放疗增敏协同作用效果。方法:使用牛血清白蛋白(BSA)修饰四氧化三铁(Fe 3O 4)纳米颗粒作为载体，利用碳二亚胺法将L-硒代胱氨酸(SeCyc2)和叶酸(FA)在BSA表面进行偶联，合成磁性复合纳米颗粒Fe 3O 4@BSA@SeCyc2@FA，并对其进行表征。通过评估颗粒的磁热特性，分析HeLa细胞对颗粒的内化作用及使用CellTiter和活性氧(ROS)试剂盒分别对不同实验组的细胞活力和ROS产生量进行检测，以此来评价在磁热联合高能X射线作用下，Fe 3O 4@BSA@SeCyc2@FA纳米颗粒对HeLa细胞的抑制或杀伤效果。 结果:Fe 3O 4@BSA@SeCyc2@FA纳米颗粒的平均粒径为(19.31±4.84)nm，Zeta电位为－25.4 mV(pH＝7)，其具备良好的分散性和稳定性，为后续生物实验奠定基础。通过BSA和FA特征吸收峰并结合纳米颗粒Se元素的含量为10.89 μM，证实L-硒代胱氨酸和叶酸已经成功修饰在复合纳米颗粒表面。所制备颗粒的饱和磁化强度为47.2 emu/g，在518 kHz/16 kAm －1交变磁场作用下，其比吸收率(SAR)为125.4 W/g，可在15 min内升温可达7 ℃，这表明该颗粒具有良好的发热特性。在0～200 μg/ml浓度范围内，颗粒对HUVECs无明显毒性，但HeLa细胞对颗粒内化作用明显，并表现出一定的活力抑制敏感性。在磁热疗联合高能X射线后，HeLa细胞活力明显降低至54.7%，细胞内ROS的生成量较对照组增加了108.2%，实验结果表明，复合纳米颗粒明显增强了HeLa细胞的放射敏感性，磁热联合放疗协同作用对其抑制和杀伤更为有效。 结论:构筑的新型功能化磁性复合纳米颗粒具有作为一种协同磁热和放疗增敏作用纳米系统的潜力，其能够克服单一治疗模式的诸多不足，将为今后体内肿瘤综合治疗提供新的研究思路和基础。

我们报道国内首例由硒半胱氨酸插入序列结合蛋白2(SECISBP2)基因复合杂合变异致甲状腺激素代谢缺陷男童的病例并复习文献，以提高临床医生对甲状腺激素代谢缺陷的认识。临床上对生长迟缓、运动发育落后的患儿，如甲状腺功能检测示TSH正常或轻度升高、T 4升高而T 3下降，应考虑甲状腺激素代谢缺陷。

目的:探讨富硒茶叶中有机硒的高效提取方法及其赋存形态。方法:采用持续透析法和差减法进行有机硒提取方法优选，同时根据Osborne溶解性蛋白质的分类及性质，顺序浸提水溶、盐溶、醇溶及碱溶蛋白4种蛋白质。利用体外模拟技术模拟富硒茶叶中硒在胃肠液的消化过程，采用原子荧光光度计-液相色谱联用法进一步分析人体摄入硒的生物可利用度及有机硒在茶叶中的赋存形态。结果:富硒茶叶总硒含量为（303.12 ± 1.19）μg/kg，持续透析法、差减法测得有机硒含量分别为（154.76 ± 9.47）、（265.02 ± 6.55）μg/kg，二者比较差异有统计学意义（ t=- 2.56， P < 0.05）。4种蛋白质含量由大到小依次为碱溶蛋白（29.79 g/100 g）、水溶蛋白（2.52 g/100 g）、盐溶蛋白（2.15 g/100 g）、醇溶蛋白（1.04 g/100 g）。经胃肠液消化模拟，茶叶样品的硒含量为（203.01 ± 3.16）μg/kg，硒的生物可利用度为66.97%；醇溶蛋白中硒代蛋氨酸（SeMet）含量为（13.87 ± 3.21）μg/kg，硒代半胱氨酸（SeCys）含量为（0.82 ± 0.38）μg/kg；碱溶蛋白中SeMet含量为（2.59 ± 2.16）μg/kg。 结论:富硒茶叶的有机硒提取方法中，差减法优于持续透析法。富硒茶叶中SeMet在醇溶、碱溶蛋白中均可检出，SeCys在醇溶蛋白中可检出。

目的:探讨硒代胱氨酸(SeC)对小鼠短暂局灶性脑缺血再灌注(transient focal cerebral ischemia/reperfusion，tFCI/R)损伤的神经保护作用及机制。方法:线栓阻塞昆明小鼠大脑中动脉1 h后拔除，制作tFCI/R模型。通过多普勒血流监测和神经功能缺损评分筛选手术合格小鼠40只，按照随机数字表法分为SeC治疗组和tFCI/R模型对照组；另选20只作为假手术组(Sham组，小鼠经历手术全程而不阻塞大脑中动脉)。SeC治疗组小鼠给予术后0 h、24 h、48 h各1次腹腔注射SeC溶液(2 mg/30 g)；模型组和Sham组小鼠给予同样方式注射等量生理盐水。于术后24 h、48 h、72 h每组各随机抽取6只小鼠进行神经功能缺损评分及神经行为学测试；之后所有小鼠麻醉处死取脑，行氯代三苯基四氮唑(TTC)染色测脑梗死体积，湿-干重法测脑水肿程度变化，Tunel-DAPI染色观察神经元凋亡情况，Western blot检测活性caspase-3和PARP表达，并检测小鼠脑组织GSH、GSH-Px表达情况。结果:Sham组小鼠未见神经功能缺损表现，术后24 h、48 h、72 h的tFCI/R组Zea Longa评分[(3.67±0.52)分，(3.33±0.52)分，(2.17±0.41)分]均比Sham组[(0.50±0.55)分，(0.67±0.52)分，(0.33±0.52)分]显著提高( t＝10.26，8.86，6.81，均 P<0.05)，而SeC治疗组评分[(2.50±0.55)分，(1.67±0.82)分，(0.83±0.75)分]则比tFCI/R组显著降低( t＝3.74，4.19，3.84，均 P<0.05)。行为学评测结果与Zea Longa评分一致。术后72 h TTC染色显示：与tFCI/R组[(24.69±2.25)%]比较，SeC治疗组[(11.89±1.64)%]脑梗死体积明显缩小，差异有统计学意义( t＝10.28， P<0.05)；Sham组无梗死灶形成。湿-干重测量显示：与Sham组相比，tFCI/R组左侧脑组织含水量[(85.87±1.36)%]明显增加( t＝8.73， P<0.05)，SeC治疗组左侧脑组织含水量[(81.06±1.07)%]与tFCI/R组比较下降，差异有统计学意义( t＝6.22， P<0.05)。Tunel-DAPI染色、Western blot结果表明，SeC处理显著下调了caspase-3和PARP的裂解，从而抑制了神经元凋亡。脑组织GSH含量检测证实，与tFCI/R组[(64.69±2.15)%]比较，SeC治疗组GSH含量[(85.83±1.46)%]显著提高，差异有统计学意义( t＝18.19， P<0.05)。脑组织GSH-Px活性检测证实，与tFCI/R组[(38.74±1.93)%]比较，SeC治疗组GSH-Px活性[(49.12±1.13)%]显著提高，差异有统计学意义( t＝10.38， P<0.05)。 结论:SeC通过抑制氧化应激和凋亡，对tFCI/R诱导的脑损伤发挥了有效的神经保护作用，据此推测SeC在脑卒中的防治方面具有潜在的应用价值。

[目的]基于非靶向代谢组学技术,分析慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)肝胃气滞证和脾胃虚弱证患者的代谢组学特征,发现与CAG患者中医证型相关的血清代谢差异物,为中医辨证客观化提供参考依据.[方法]纳入60例CAG患者,其中肝胃气滞证及脾胃虚弱证各30例.收集2组患者空腹肘静脉血5 mL,采用超高效液相色谱-质谱技术检测血清代谢物含量,采用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)和聚类分析等多元统计方法筛选CAG肝胃气滞证和脾胃虚弱证患者之间的差异代谢物,最后利用KEGG数据库对筛选的差异代谢物进行代谢物通路分析.[结果]通过比较CAG肝胃气滞证和脾胃虚弱证患者血清代谢物,发现CAG肝胃气滞证和脾胃虚弱证之间N-乙酰基甘氨酸、组胺、O-磷酸丝氨酸、硒甲基硒代半胱氨酸、甲基间酪氨酸等氨基酸衍生物和酪氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸、组氨酸-丙氨酸-谷酰胺-赖氨酸、L-天冬酰胺基-L-脯氨酰-L-丝氨酸、L-异亮氨酸-L-异亮氨酸等小肽类物质代谢具有显著性差异.[结论]CAG肝胃气滞证和脾胃虚弱证患者之间存在氨基酸代谢差异,N-乙酰基甘氨酸、甲基间酪氨酸、O-磷酸丝氨酸等代谢物可能是区别CAG肝胃气滞证和脾胃虚弱证的潜在生物标志物.

目的 分析乙醇代谢物损伤间充质干细胞(MSCs)过程中硒化合物对细胞体外增殖的影响.方法 分别添加不同浓度的乙醇代谢物乙醇、乙醛和乙酸至人脂肪MSCs(hADSCs)和人脐带MSCs(hUMSCs)培养液中,通过CellTiter-Glo?发光法检测细胞活力,计算半数抑制浓度(IC50);通过细胞活力变化分析硒甲基硒代半胱氨酸(Se-c)、依布硒啉(Eb)、硒代蛋氨酸(Se-M)对hADSCs、hUMSCs体外增殖的影响,检测硒化合物对乙醇代谢物损伤的MSCs增殖活力的影响.结果 乙醇、乙醛、乙酸诱导hADSCs损伤的IC50值分别为230.2、1.32 mmol/L和24.21 mmol/L,诱导hUMSCs损伤的IC50值分别为199.9、1.30 mmol/L和18.66 mmol/L.检测1μmol/L和3μmol/L浓度的硒化合物对乙醇代谢物损伤的hADSCs和hUMSCs细胞活力的影响显示,与实验对照组相比,Se-c、Eb、Se-M对乙醇损伤的hADSCs和乙醛损伤的hUMSCs有明显的改善作用,Se-c、Eb对乙醛损伤的hADSCs有明显的改善作用(P<0.05),Se-c、Se-M对乙醇损伤的hUMSCs也有明显的改善作用(P<0.05).结论 硒化合物可用于提高乙醇和乙醛诱导损伤的MSCs活力,Eb对hADSCs以及Se-M对hUMSCs的改善效果更佳.

目的:探讨肾阳方治疗骨质疏松症(osteoporosis,OP)肾阳虚证的作用机制.方法:将30 只2 月龄雌性SD大鼠随机分为3 组,每组10 只.对照组大鼠从双侧卵巢附近切除少量脂肪组织,模型组和肾阳方组大鼠摘除双侧卵巢,造模手术1 个月后模型组和肾阳方组大鼠皮下注射氢化可的松注射液进行肾阳虚证造模.造模结束后,肾阳方组以肾阳方药液灌胃,其余2 组均以等量生理盐水灌胃,连续干预60 d.药物干预结束后,观察各组大鼠一般情况,采用ELISA法进行血清指标检测,以Micro-CT检测大鼠L4 骨密度及骨组织微结构,采用超高效液相色谱-质谱法进行血清代谢组学分析.结果:①一般情况观察结果.模型组大鼠出现肾阳虚证表现,肾阳方组大鼠肾阳虚证表现较模型组明显改善.②血清指标检测结果.3 组大鼠雌二醇(estradiol,E2)血清含量、环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)血清含量、cAMP/环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)血清含量、Ⅰ型胶原C末端肽(C-telopeptide of typeⅠcollagen,CTX-Ⅰ)血清含量比较,组间差异均有统计学意义[E2:(99.74±9.53)ng·L-1,(42.84±10.84)ng·L-1,(60.53±13.03)ng·L-1,F =48.850,P =0.000;cAMP:(206.00±13.30)nmol·L-1,(184.70±13.01)nmol·L-1,(198.80±10.64)nmol·L-1,F =7.182,P =0.003;cAMP/cGMP:3.98±0.34,3.11±0.48,3.58±0.35,F =10.374,P =0.001;OCN:(4.62±1.04)ng·L-1,(2.36±0.87)ng·L-1,(4.24±1.63)ng·L-1,F = 6.366,P =0.007;CTX-Ⅰ:(756.16±74.82)ng·L-1,(949.36±86.23)ng·L-1,(856.69±55.44)ng·L-1,F =13.776,P = 0.000];3 组大鼠 cGMP血清含量的差异无统计学意义[(52.28±7.69)nmol·L-1,(61.39±14.26)nmol·L-1,(56.15±8.06)nmol·L-1,F =1.572,P =0.228].对照组和肾阳方组大鼠的E2 血清含量、cAMP血清含量、cAMP/cGMP、OCN血清含量均高于模型组[E2:P =0.000,P =0.002;cAMP:P =0.001,P =0.014;cAMP/cGMP:P =0.000,P =0.012;OCN:P =0.004,P = 0.008],CTX-Ⅰ血清含量均低于模型组(P =0.000,P =0.013).③骨密度和骨组织微结构检测结果.3 组大鼠骨密度、骨体积分数、骨小梁数目、骨小梁厚度、骨小梁分离度比较,组间差异均有统计学意义[骨密度:(385.630±46.664)mg·cm-3,(246.648±21.253)mg·cm-3,(283.183±24.332)mg·cm-3,F =47.533,P =0.000;骨体积分数:(0.441±0.055)%,(0.286±0.022)%,(0.325±0.027)%,F =45.608,P =0.000;骨小梁数目:(4.525±0.497)个·mm-1,(3.206±0.289)个·mm-1,(3.536±0.232)个·mm-1,F =35.684,P =0.000;骨小梁厚度:(0.094±0.005)mm,(0.086±0.007)mm,(0.090±0.005)mm,F =4.596,P =0.019;骨小梁分离度:(0.199±0.028)mm,(0.300±0.039)mm,(0.262±0.021)mm,F =23.218,P =0.000].对照组和肾阳方组的骨密度、骨体积分数、骨小梁数目均高于模型组(骨密度:P =0.000,P =0.007;骨体积分数:P =0.000,P =0.012;骨小梁数目:P =0.000,P =0.023),骨小梁分离度均低于模型组(P =0.000,P =0.006);对照组的骨小梁厚度大于模型组(P =0.006),肾阳方组和模型组骨小梁厚度的差异无统计学意义(P =0.068).④血清代谢组学分析结果.对照组和模型组、肾阳方组和模型组的代谢物均能明显分离.模型组较对照组有21 个代谢物上调、7 个代谢物下调,肾阳方组较模型组有89 个代谢物上调、9 个代谢物下调.这些差异代谢物中13 个为氨基酸或与氨基酸有关,93 个为胆固醇酯、鞘磷脂、甘油二酯、甘油三酯等脂质代谢物.模型组较对照组CE(15∶0)浓度上升、TG(16∶0＿37∶3)浓度下降,肾阳方组较模型组CE(15∶0)浓度下降、TG(16∶0＿37∶3)浓度上升.KEGG通路富集分析结果显示,对照组和模型组差异代谢物的信号通路有氨酰tRNA生物合成、谷胱甘肽代谢、氨基乙酸-丝氨酸-苏氨酸代谢、苯丙氨酸-酪氨酸-色氨酸生物合成、缬氨酸-亮氨酸-异亮氨酸生物合成、泛醌和其它萜类-醌生物合成、苯丙氨酸代谢、组氨酸代谢、β-丙氨酸代谢、卟啉和叶绿素代谢、二羧酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、酪氨酸代谢、初级胆汁酸生物合成,肾阳方组和模型组差异代谢物的信号通路有氨酰tRNA生物合成、生物素代谢、精氨酸生物合成、硒代谢、赖氨酸降解、丙氨酸-天冬氨酸-谷氨酸代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢.结论:OP肾阳虚证的发生可能与氨基酸、脂质代谢紊乱有关,肾阳方治疗可以纠正部分氨基酸、脂质代谢紊乱,从而治疗OP肾阳虚证.