目的:桃红四物汤调控核因子E2相关因子(Nrf2)/Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路介导的铁死亡在膝骨关节炎(KOA)中的作用机制.方法:40只SD大鼠随机分为假手术对照组、模型对照组、桃红四物汤9 g/kg组、双醋瑞因胶囊0.0045 g/kg组,每组各10只;各组均采用内侧半月板失稳手术造模,造模成功1 w后各组灌胃给予相应的药物或无菌水,1次/d,连续8 w.干预完成后,检测各组大鼠血清白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-18含量及关节软骨组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、活性氧(ROS)含量;透射电镜观察大鼠软骨线粒体数量、形态、结构及分布情况;Western Blot法检测大鼠关节软骨组织Keap1、Nrf2、HO-1、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、肿瘤抑制蛋白53(P53)、溶质载体家族7成员11重组蛋白(SLC7A11)的表达.结果:与假手术对照组比较,模型对照组Mankin和OARSI病理评分增加,IL-1β、TNF-α、IL-18、MDA、ROS含量显著升高,Keap1、P53蛋白表达显著上调,SOD活力显著降低,Nrf2、HO-1、GPX4、SLC7A11蛋白表达显著下调(P＜0.01);与模型对照组比较,桃红四物汤组Mankin和OARSI病理评分降低,IL-1β、TNF-α、IL-18、MDA、ROS含量降低,Keap1、P53蛋白表达显著下调,SOD活力显著升高,Nrf2、HO-1、GPX4、SLC7A11蛋白表达显著上调(P＜0.01).结论:桃红四物汤可能通过激活Nrf2/Keap1/HO-1信号通路抑制大鼠关节软骨铁死亡.

肝纤维化常发生于大多数慢性肝病，其直接病因是细胞外基质蛋白过度积累。铁死亡(ferroptosis)是一种铁依赖性脂质过氧化驱动的程序性细胞死亡，区别于细胞凋亡、细胞坏死、细胞焦亡的新型细胞程序性死亡方式。活性氧异常产生和铁代谢失衡是铁死亡的发生的中心环节。二价铁或酯氧合酶催化细胞膜上不饱和脂肪酸发生脂质过氧化，从而诱导细胞死亡。此外，抗氧化体系(谷胱甘肽系统)的调控核心酶谷胱甘肽过氧化物酶-4(GPX4)的降低也与铁死亡发生密切相关。近年来，多项研究表明铁死亡参与肝纤维化进程，包括p62、Keap1/NRF2、p53等信号通路。本文将围绕铁死亡相关信号通路，以及铁死亡介导的肝脏纤维化发生的机制和相应治疗策略展开综述，以期为铁死亡介导的抗肝脏纤维化治疗提供新思路。

Background::Gallbladder cancer (GBC) is the most common malignant tumor of biliary tract. Isoliquiritigenin (ISL) is a natural compound with chalcone structure extracted from the roots of licorice and other plants. Relevant studies have shown that ISL has a strong anti-tumor ability in various types of tumors. However, the research of ISL against GBC has not been reported, which needs to be further investigated.Methods::The effects of ISL against GBC cells in vitro and in vivo were characterized by cytotoxicity test, RNA-sequencing, quantitative real-time polymerase chain reaction, reactive oxygen species (ROS) detection, lipid peroxidation detection, ferrous ion detection, glutathione disulphide/glutathione (GSSG/GSH) detection, lentivirus transfection, nude mice tumorigenesis experiment and immunohistochemistry. Results::ISL significantly inhibited the proliferation of GBC cells in vitro. The results of transcriptome sequencing and bioinformatics analysis showed that ferroptosis was the main pathway of ISL inhibiting the proliferation of GBC, and HMOX1 and GPX4 were the key molecules of ISL-induced ferroptosis. Knockdown of HMOX1 or overexpression of GPX4 can reduce the sensitivity of GBC cells to ISL-induced ferroptosis and significantly restore the viability of GBC cells. Moreover, ISL significantly reversed the iron content, ROS level, lipid peroxidation level and GSSG/GSH ratio of GBC cells. Finally, ISL significantly inhibited the growth of GBC in vivo and regulated the ferroptosis of GBC by mediating HMOX1 and GPX4. Conclusion::ISL induced ferroptosis in GBC mainly by activating p62-Keap1-Nrf2-HMOX1 signaling pathway and downregulating GPX4 in vitro and in vivo. This evidence may provide a new direction for the treatment of GBC.

脓毒症是感染导致机体宿主反应失调引起的危及生命的器官功能障碍，在全球有较高的发病率与病死率。脓毒症的重要特征是炎症反应，剧烈炎症反应产生的细胞因子会激活中性粒细胞，引起活性氧（ROS）的过量生成，从而造成组织器官损伤，并进一步发展为器官功能障碍和衰竭。铁死亡是近些年发现的一种铁依赖性的全新的细胞死亡方式，其主要机制为二价铁诱导的细胞内脂质过氧化与抗氧化体系〔谷胱甘肽（GSH）和谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）〕表达量降低。最近众多研究表明，Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1/核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件（Keap1/Nrf2/ARE）信号通路可通过改善氧化应激来缓解脓毒症过程中的细胞铁死亡。本文对Nrf2抑制脓毒症过程中细胞铁死亡的有关分子机制研究进行综述，以期为干预脓毒症进展提供预防和治疗思路。

目的 观察延龄草总皂苷(total saponins from Trillium tschonoskii maxim,TST)对大鼠脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)的神经保护作用,并探讨铁死亡相关机制.方法 建立CIRI模型后,将雄性SD大鼠分为 TST(0.1 g·kg-1)组、盐酸多奈哌齐(0.45 mg·kg-1)组、模型组以及假手术组.通过Morris水迷宫实验评估大鼠的学习记忆能力,利用Zea-Longa法评估神经功能变化,同时,使用TTC染色观察脑梗死面积,利用HE和Nissl染色检查脑组织的病理变化;为了进一步阐明其作用机制,我们利用透射电子显微镜观察线粒体结构的变化,并测定GSH-PX、SOD、MDA的含量.最后,通过免疫组化、免疫荧光法检测GPX4、Nrf2蛋白的表达.并采用Western blot检测大鼠Keap1/Nrf2/HO-1、Nrf2/SLC7A11/GPX4 通路蛋白的表达.结果 与假手术组大鼠相比,模型组表现出学习记忆能力下降,脑梗死面积明显增大,神经功能评分较高(P＜0.01),神经元排列松散紊乱,尼氏小体减少.同时,线粒体呈现铁死亡状态.铁死亡相关:SOD、GSH-PX活力降低(P＜0.01),MDA升高(P＜0.01).GPX4、Nrf2阳性细胞的表达明显减少,GPX4荧光强度降低.此外,海马的Keap1、Nrf2、HO-1、SLC7A11、GPX4 的蛋白表达降低(P＜0.05,P＜0.01).给予TST后得到改善.结论 TST具有神经保护作用,提升了学习记忆能力,降低了氧化应激水平,其机制可能与抑制Keap-1/Nrf2/HO-1、Nrf2/SLC7A11/GPX4 通路介导的铁死亡有关.

试验旨在研究高比例的棉粕和菜粕饲料中添加齐墩果酸对草鱼生长、血清生化指标、抗氧化和免疫能力的影响.试验选取均重约为50 g的草鱼480尾,随机分为3组,每组4个重复,每个重复40尾.分别为对照组、高比例的棉粕和菜粕组、高比例的棉粕和菜粕组+500 mg/kg齐墩果酸组,分别记为CON、S1和SQ2.养殖周期为 56d.结果显示:(1)与CON组相比,S1和SQ2组草鱼的末均重(FBW)、增重率(WGR)和特定生长率(SGR)均显著降低(P＜0.05),S1组草鱼的饵料系数(FCR)显著升高(P＜0.05).与S1组相比,SQ2组草鱼的FBW、WGR和SGR均显著升高(P＜0.05),而FCR显著降低(P＜0.05).(2)与CON组相比,S1和SQ2组草鱼的血清谷草转氨酶(GOT)、胆汁酸(TBA)、总胆固醇(T-CHO)和肝脏丙二醛(MDA)水平均显著升高(P＜0.05).而血清酸性磷酸酶(ACP)、免疫球蛋白M(IgM)、肠道淀粉酶和肝脏过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)的水平均显著降低(P＜0.05);S1组草鱼的血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量显著升高(P＜0.05),而血清C3、肠道脂肪酶和肝脏总抗氧化能力(T-AOC)的含量显著降低(P＜0.05).与S1组相比,SQ2组草鱼的血清GOT、T-CHO和肝脏MDA的水平均显著降低(P＜0.05),而血清ACP、IgM、肠道脂肪酶、淀粉酶和肝脏的CAT、SOD、T-AOC的水平均显著升高(P＜0.05).(3)与CON组相比,S1组和SQ2组草鱼肝脏中gpx1、cat、tgf-β1和il-15的表达水平显著下调(P＜0.05);S1组草鱼肝脏中Mnsod和nrf2的表达水平显著下调(P＜0.05),而keap1、tnf-α、nf-κb和il-12β的表达水平显著上调(P＜0.05).与S1组相比,SQ2组草鱼肝脏中Mnsod、gpx1、cat、nrf2、tgf-β1和il-15的表达水平显著上调(P＜0.05),而keap1、tnf-α、nf-κb和il-12β的表达水平显著下调(P＜0.05).综上所述,高比例棉菜粕饲料显著降低了草鱼的生长性能,抗氧化能力和免疫力,并引起草鱼肝脏组织结构的损伤.齐墩果酸的添加可以缓解草鱼肝脏的氧化损伤和炎症反应,并提高草鱼的生长性能,抗氧化能力和免疫力.

目的:探究地黄苷A(ReA)对盲肠结扎穿孔(CLP)诱导的脓毒症大鼠脑功能障碍的影响及机制.方法:将56只CLP诱导的脓毒症 SD 大鼠随机分为 CLP 组(n=12)、CLP+20ReA 组(n=11)、CLP+40ReA 组(n=11)、CLP+80ReA 组(n=11)和 GPX4-IN-3 组(n=11),将只进行假手术的10只SD大鼠作为Sham组.Sham组和CLP组大鼠灌胃1 mL 1％二甲基亚砜.CLP+20ReA组、CLP+40ReA组、CLP+80ReA组大鼠分别灌胃1mL剂量为20、40和80mg/kg/d的地黄苷A.GPX4-IN-3组大鼠同时灌胃0.5 mL剂量为80 mg/kg/d的地黄苷A和0.5 mL剂量为15 mg/kg/d的铁死亡选择性诱导剂GPX4-IN-3.各组大鼠均给药3 d.通过神经功能评分和Morris水迷宫实验评价大鼠脑功能;采用ELISA法检测大鼠神经元特异性烯醇化酶(NSE)和S100β水平;采用称重法检测大鼠脑组织含水量;采用HE染色和尼氏染色评价大鼠脑损伤情况;采用微量法检测大鼠脑组织还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平和Fe2+含量;采用ELISA法检测大鼠脑组织白细胞介素.6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;采用Western blot检测大鼠脑组织核因子E2相关因子2(Nrf2)、Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白水平.结果:与CLP组比较,CLP+20ReA组、CLP+40ReA组和CLP+80ReA组大鼠的神经功能评分和逃避潜伏期降低(P＜0.05),穿越平台次数升高(P＜0.05),神经元损伤减轻,血清NSE和S100β水平降低(P＜0.05),脑组织GSH水平升高(P＜0.05),脑组织含水量、MDA、IL-6和TNF-α水平以及Fe2+含量均降低(P＜0.05),脑组织Nrf2(细胞核)和GPX4的蛋白表达水平升高(P＜0.05),Keap1的蛋白表达水平降低(P＜0.05).与CLP+80ReA组比较,GPX4-IN-3组大鼠的脑功能障碍加重,Nrf2/GPX4通路被抑制(P＜0.05).结论:地黄苷A通过激活Nrf2/GPX4通路抑制铁死亡,从而减轻CLP诱导的脓毒症大鼠脑功能障碍.

目的 探究右美托咪定(Dexmedetomidine,Dex)调控自噬受体蛋白p62/Kelch样ECH 相关蛋白-1(Kelch-like ECH-associated protein1,Keap1)/核因子 E2 相关因子 2(Nuclear factor E2 related factor 2,Nrf2(p62/Keap1/Nrf2)通路对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠肝脏损伤的保护作用机制.方法 选取SD大鼠50只,随机将大鼠分为5组,分别为空白对照组(Sham组)、LPS诱导肝脏损伤模型组(LPS组)、LPS诱导+Dex干预组(Dex组)、Keap1/Nrf2信号轴抑制剂组(KI696组)、LPS诱导+Dex干预+KI696组(Dex+KI696组).统计各组大鼠干预后血清、肝功能因子,包括总胆固醇(Total cholesterol,TC)、总血脂(Total glyceride,TG)、丙氨酸氨基转移酶(Alanine transaminase,ALT)、天门 冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotrans-ferase,AST),肝组织炎症因子白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α),氧化应激指标丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)水平差异.HE染色分析各组大鼠肝脏组织病理形 态;Western-blot检测各组 大鼠肝脏组织p62/Keap1/Nrf2信号轴关键蛋白p62、Keap1、Nrf2,铁死亡关键蛋白前列腺素内过氧化物合酶(Prostaglandin endoperoxide synthase,PTGS2)、谷胱甘肽过氧化物酶 4(Glutathione peroxidase 4,GPX4)、铁蛋白基因(Recombinant hu-man ferritin heavy chain,FTH1)表达.结果 与 Sham 组相比,LPS 组 p62、TC、TG、ALT、AST、IL-6、IL-8、IL-1 β、TNF-α、MDA、PTGS2 表达升高,Keap1、Nrf2、SOD、GSH、CAT、GPx4、FTH1 表达降低(P＜0.05).与 LPS 组相比,Dex 组 p62、TC、TG、ALT、AST、IL-6、IL-8、IL1β、TNF-α、MDA、PTGS2 表达降低,Keap1、Nrf2、SOD、GSH、CAT、GPx4、FTH1 表达升高(P＜0.05);KI696 组 Keap1、PTGS2、SOD、GSH、CAT、GPx4、FTH1 表达降低,Nrf2、TC、TG、ALT、AST、IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α、MDA 表达升高(P＜0.05).与 KI696 组相比,Dex+KI696 组Keap1、PTGS2、SOD、GSH、CAT、GPx4、FTH1 表达升高(P＜0.05).结论 右美托咪定通过抑制p62活性,激活Keap1/Nrf2通路活性发挥抗氧化应激损伤、抗炎症反应作用,减缓铁死亡程度,达到保护肝组织的作用.

目的 探讨吸嗅冰菖散通过调节Nrf2/HO-1 信号通路来改善阿尔茨海默病(AD)小鼠的铁死亡和认知功能障碍.方法 30 只APP/PS1 小鼠随机分为模型组(APP/PS1 组)、冰菖散低剂量组(BCS-L组)和冰菖散高剂量组(BCS-H组),10 只同窝阴性小鼠作为空白组(WT组).WT组和APP/PS1 组进行纯水雾化给药处理;BCS-L组和BCS-H组每日雾化给药 0.5、1 μL冰菖散吸嗅剂,每日 10 min,持续 2 周.给药 2 周后进行水迷宫实验来判断各组小鼠空间认知能力,水迷宫实验后处死小鼠,取大脑组织进行Aβ1-42 免疫荧光和磷酸化Tau蛋白(P-tau)免疫组化及尼氏染色;提取海马组织进行 Western blot、qPCR检测Keap1、Nrf2、HO-1、GPX4、SCL7A11、TFRC、DMT1、FTL、FTH1 的蛋白和mRNA表达水平;提取大脑组织进行GSH试剂盒检测.结果 BCS各组逃避潜伏期缩短,平台所在象限活动时间和穿越平台次数增加.相对于APP/PS1 组,BCS各组小鼠的海马CA1 区和皮层中的Aβ1-42 和P-tau表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01).尼氏染色显示,BCS各组神经元排列较为紧密,有较多尼氏体.在海马组织中,相比于未处理的APP/PS1 小鼠,BCS各组在Nrf2、HO-1、SLC7A11、GPX4、FTL的蛋白和mRNA表达水平上均有显著提升(P<0.05,P<0.01),BCS-L组FTH1 的蛋白和mRNA水平有提升,但无显著意义,同时TFRC、DMT1、Keap1 的表达水平显著下调(P<0.05,P<0.01).此外,BCS各组能有效恢复其大脑中GSH的含量(P<0.05,P<0.01).结论 吸嗅BCS可以改善APP/PS1 小鼠认知功能障碍.BCS可以激活Nrf2/HO-1 通路,增加GPX4 的表达,并通过抑制Keap1 来增强Nrf2 的转录活性,从而提高SLC7A11 的表达并恢复GSH的含量,有效对抗铁死亡.同时,冰菖散还能有效抑制TFRC和DMT1,上调FTL和FTH1 的表达,进而维持细胞内铁的稳态平衡,有助于减轻铁死亡对APP/PS1 小鼠的影响,可改善AD小鼠的认知功能.

目的:探讨桃叶珊瑚苷(AU)对冠心病(CHD)大鼠的治疗作用及其对核因子红系2相关因子2(Nrf2)介导的铁死亡途径的影响.方法:将大鼠分为NC组、CHD组、L-AU组、M-AU组、H-AU组和ML385组,每组12只大鼠.NC组为正常饲料喂养的对照大鼠,其他组均为高脂饮食联合腹腔注射垂体后叶素诱导的CHD模型大鼠.NC组和CHD组大鼠灌胃0.3％羧甲基纤维素钠(CMC),L-AU组、M-AU组和H-AU组大鼠灌胃20、40和80 mg/kg/d的桃叶珊瑚苷,ML385组大鼠灌胃80 mg/kg/d的桃叶珊瑚苷并腹腔注射30 mg/kg/dNrf2抑制剂ML385,共给药4周.分别检测各组大鼠的心功能指标[射血分数(EF)和短轴缩短率(FS)]、血清指标[肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和游离脂肪酸(FFA)]、心肌组织氧化应激指标[还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)]和心肌组织Fe2+含量.通过苏木素伊红(HE)染色观察大鼠心肌形态.通过Western blot检测大鼠心肌组织中Nrf2、Kelch样ECH相关蛋白1(Keapl)、血红素加氧酶-1(HO-1)、NADPH:醌氧化还原酶-1(NQO-1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁蛋白重链1(FTH1)和膜铁转运蛋白1(FPN1)的蛋白水平.结果:与NC组比较,CHD组大鼠的EF和FS水平降低,CK-MB和LDH水平升高,心肌出现明显损伤;TC、TG、LDL-C、FFA 和 MDA 水平升高,HDL-C 和 GSH 水平降低;Nrf2、HO-1、NQO-1、GPX4、FTH1 和 FPN1 蛋白水平降低,Keapl蛋白水平升高,Fe2+含量升高(P＜0.05).与CHD组比较,L-AU组、M-AU组和H-AU组大鼠的EF和FS升高,CK-MB和LDH水平降低,心肌形态明显改善;TC、TG、LDL-C、FFA和MDA水平降低,HDL-C和GSH水平升高;Nrf2、HO-1、NQO-1、GPX4、FTH1和FPN1蛋白水平升高,Keap1蛋白水平降低,Fe2+含量降低(P＜0.05).与H-AU组比较,ML385组大鼠的EF和FS降低,CK-MB和LDH水平升高,心肌损伤加重,TC、TG、LDL-C、FFA和MDA水平升高,HDL-C和GSH水平降低;Nrf2、HO-1、NQO-1、GPX4、FTH 1和FPN1蛋白水平降低,Keap1蛋白水平升高,Fe2+含量升高(P＜0.05).结论:桃叶珊瑚苷表现出了良好的抗冠心病作用,其机制与抑制Nrf2介导的铁死亡途径有关.