目的:甘露糖修饰的脂阿拉伯甘露聚糖(mannose-capped lipoarabinomannan，ManLAM)是结核分枝杆菌细胞壁的主要成分之一，本研究拟探究ManLAM对CE蛋白诱导B细胞抗结核免疫应答的作用及潜在机制。方法:磁珠分选活动性肺结核患者B细胞，ManLAM协同CE蛋白离体刺激，CFSE检测增殖，流式检测B细胞凋亡及活化，ELISA检测细胞因子及抗体亚型分泌水平，酶联斑点试验检测B细胞分化抗体分泌细胞的水平。结果:ManLAM抑制CE蛋白诱导的B细胞增殖、活化、促炎因子释放和分化为CE蛋白特异性IgG分泌细胞，但对凋亡和分化为IgM分泌细胞无显著影响。ManLAM可通过TLR2抑制CE蛋白特异性IgG1和IgG3的分泌，诱导IgG4的分泌。结论:本研究证实ManLAM可抑制B细胞抗结核免疫应答，为结核分枝杆菌免疫逃逸提供了新的理论依据。

目的 研究结核分枝杆菌(MTB)甘露糖冠化的脂阿拉伯甘露聚糖(ManLAM)脂糖诱导肥大细胞产生的外泌体招募并影响巨噬细胞极化从而逃避机体免疫的机制.方法 培养H37Rv MTB并提取鉴定ManLAM.将提取的ManLAM处理肥大细胞,并收集其分泌的外泌体,通过蛋白质组学和Western blot法分析鉴定外泌体中蛋白质组分.将收集的外泌体与THP-1细胞诱导分化的巨噬细胞共培养,通过Transwell?实验检测肥大细胞释放的外泌体对巨噬细胞的趋化作用,流式细胞术和实时定量PCR检测ManLAM诱导的巨噬细胞极化.结果 成功提取并纯化了 ManLAM,并通过气相色谱鉴定其甘露糖和阿拉伯糖的比例约为12.6∶9.4;ManLAM通过与肥大细胞的Toll样受体2(TLR2)结合,产生的外泌体中CC趋化因子配体2(CCL2)、白细胞介素4(IL-4)和IL-13水平较高;ManLAM诱导产生的外泌体能够招募巨噬细胞并且促进其高表达M2型标志分子精氨酸酶1(arginase-1)、IL-10和发现于炎症区分子1(FIZZ-1).结论 ManLAM刺激肥大细胞分泌外泌体间接诱导巨噬细胞向M2型极化使MTB逃避免疫清除.

结核病是由结核分枝杆菌复合群引发的人畜共患病,甘露糖帽修饰的脂阿拉伯甘露聚糖(mannose-capped-lipoarabinomannan,ManLAM)是结核分枝杆菌细胞壁上重要的成分,具有免疫调节作用,能够被固有细胞和适应性细胞所识别.作为结核病诊断的生物标记物,存在于体液的ManLAM具有较好的特异性,有区分结核分枝杆菌潜伏感染和活动性结核病的潜力,对于不能获取痰液的结核病患者也具有一定的检测价值.笔者系统介绍ManLAM的结构、生物合成及ManLAM的相关抗体等,并对其在结核病诊断中的研究进展进行总结,以期为结核病诊断技术的研发提供参考.

目的 使用人成纤维样滑膜细胞(FLS细胞)系探究甘露糖修饰的脂阿拉伯甘露聚糖(ManLAM)对人结核性关节炎中白介素-37(IL-37)产生的作用及相关分子机制.方法 从H37RV结核杆菌中提取并纯化ManLAM,提取人FLS细胞中的总RNA,将RNA反转录为cDNA.蛋白质免疫印迹法(Western Blot)对p38丝裂原活化蛋白激酶类/拮抗剂和抑制剂(p38和ERK1/2 MAPKs)进行检测.ELISA法和流式细胞术检测FLS细胞中表达出来的IL-37水平,用以评估ManLAM诱导FLS细胞中IL-37表达的能力以及观察p38和ERK1/2等抑制剂对ManLAM诱导产生的IL-37表达的影响.结果 发现Man-LAM诱导IL-37 mRNA及蛋白表达具有时间和剂量依赖性,然而这种活性几乎可以全部被ERK1/2(U0126)和p38(SB203580)抑制剂所消除.TLR2表达受到干扰后,ERK1/2和p38磷酸化水平也显著下降,同时IL-37的产物也大大减少.但是干扰TLR4对ManLAM诱导IL-37的表达几乎没有影响.结论 ManLAM通过上调TLR2/p38或ERK1/2信号通路来诱导人FLS细胞中IL-37的产生,而且,这为解释ManLAM促进结核杆菌持久性的病理学作用提供了一个重要的依据.