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NACK的下调对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖、凋亡的影响
编辑人员丨2天前
目的:探讨 NACK基因表达下调对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。 方法:通过慢病毒转染技术感染Jurkat细胞，使 NACK基因表达下调，应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot检测 NACK基因的沉默效率；CCK-8法、流式细胞术检测 NACK下调后对Jurkat细胞增殖、凋亡的影响；Western blot检测Notch1信号传导通路下游相关蛋白Hes1、c-Myc的表达情况。 结果:NACK-短发夹RNA(shRNA)通过慢病毒载体成功转染Jurkat细胞后， NACK mRNA及蛋白表达量明显降低( P<0.05)；与阴性对照组和空白对照组比较，CCK-8法显示实验组细胞增殖受到明显抑制[实验组、阴性对照组和空白对照组细胞抑制率分别为(37.27±4.48)%、(4.25±2.10)%和(2.43±1.40)%]( F＝132.640， P<0.05)，流式细胞术检测实验组细胞凋亡明显增加[实验组、阴性对照组和空白对照组细胞凋亡率分别为(26.38±3.03)%、(6.07±2.61)%和(3.40±1.98)%]( F＝90.534， P<0.05)；Western blot结果证实Notch1通路相关蛋白Hes1、c-Myc的表达量较阴性对照组及空白对照组下调，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:靶向沉默 NACK可下调Notch1信号通路相关蛋白的表达，导致Jurkat细胞增殖抑制、细胞凋亡增多，从而发挥其抗T淋巴细胞白血病的作用。
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编辑人员丨2天前
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靶向沉默Notch活化复合酶NACK对神经母细胞瘤SK-N-BE(2)细胞增殖、凋亡的影响
编辑人员丨2023/8/5
目的 探讨靶向沉默Notch活化复合酶NACK对神经母细胞瘤SK-N-BE(2)细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 通过脂质体介导siRNA转染SK-N-BE(2)细胞,qRT-PCR、Western blot方法检测转染后NACK基因的沉默效率;CCK-8法检测各组细胞增殖抑制率;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;qRT-PCR、Western blot方法检测靶向抑制NACK表达后Notch1信号传导通路下游靶基因Hes1、c-Myc和n-Myc的表达情况.结果 成功转染NACK siRNA的实验组细胞的NACKmRNA基因及其蛋白表达水平明显降低(P＜0.05).CCK-8法检测到实验组细胞增殖率较阴性和空白对照组相比明显下降(P＜0.01),流式细胞术检测到实验组细胞凋亡率较阴性和空白对照组明显增加(P＜0.01).Western blot、qRT-PCR方法检测到实验组Notch1信号通路下游相关靶基因Hes1、c-Myc和n-Myc的蛋白水平和mRNA表达水平较阴性对照组及空白对照组均明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 靶向沉默NACK基因可以抑制神经母细胞瘤SK-N-BE(2)细胞增殖,促进凋亡,有望成为神经母细胞瘤基因治疗的潜在靶点.
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编辑人员丨2023/8/5
