本研究报道一组在我院行系统产前检查的家系病例资料，包括父亲、母亲、胎儿及同胞姐姐的头颅MRI、基因检测（人全外显子组高通量测序及变异位点Sanger测序）资料。母亲、姐姐及胎儿均携带ZIC2基因c.386_387insGGCGCCG（p.Gly133AlafsTer236）杂合突变。姐姐MRI表现为典型的半脑叶型前脑无裂畸形影像特征；母亲及胎儿头颅MRI均表现为四叠体池呈囊状增宽、胼胝体部分缺失。同一基因突变位点，其临床表型可截然不同。当胎儿头颅MRI提示胼胝体发育不全时不能除外与ZIC2基因突变相关的前脑无裂畸形，有必要进一步基因检测。

目的 探讨锌指转录因子3 (ZIC3)和GATA4突变与先天性心脏病(CHD)的关系.方法 选取2016年1月-2018年1月该院住院部收治的188例CHD患者作为研究组,180例体检健康者作为对照组,收集受试者外周血,提取DNA,进行PCR扩增及DNA测序分析.结果 ZIC3测序显示,8例房间隔缺损患者发生杂合错义突变c.1341A＞G,位于外显子3;4例房间隔缺损患者发生杂合错义突变c.1154C＞G,位于外显子1,2例室间隔缺损患者发生杂合错义突变c.890G＞T,位于外显子2;GATA4测序显示,25例室间隔缺损患者发生杂合同义突变c.744C＞T,位于外显子3,13例发生杂合错义突变c.1220C＞A,位于外显子4;7例房间隔缺损发生杂合同义突变c.839C＞T,位于外显子3;3例家族三代房间隔缺损出现错义突变c.899A＞C,位于外显子4;2例房间隔缺损患者发生杂合错义突变c.1138G＞A,位于外显子4;1例动脉导管未闭患者发生新的杂合同义突变c.685C＞T,位于外显子2.结论 CHD患者中ZIC3外显子发现3个突变位点,GATA4发现6个突变位点,ZIC3和GATA4突变基因可能与部分CHD致病相关.

目的 探究锌指转录因子3(zic3)基因对斑马鱼早期脑血管发育的影响及其机制.方法 利用CRISPR/Cas9技术获得zic3基因突变体,以野生型斑马鱼(AB品系)为对照,统计各个基因型72 hpf(hour post fertilization)胚胎脑出血比例.利用血管标记转基因鱼AB(Tg flk1∶gfp)与zic3突变体杂交,将得到的zic3+/-(Tg flk1∶gfp)进行自交得到同窝对照,使用激光共聚焦显微镜观察72 hpf胚胎血管发育表型(n=30),利用RT-PCR检测相关基因表达.结果 成功获得了zic3纯合突变体并经基因测序验证.与对照组相比,zic3纯合突变体存在明显的出血表型,且质膜膜泡关联蛋白(plasmalemma vesicle associated protein,Plvap)基因与zic2基因的表达量明显升高(P＜0.05),但杂合突变体未观察到此表型.在杂合突变体中,后脑血管发育出现明显抑制,血管数量相比野生型降低60％(P＜0.05),存在明显发育缺陷.同时非经典Wnt信号通路基因(wnt5a、wnt7ba、wnt9b)以及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)通路基因(kdrl、vegfab、ephrlnB2)表达量均明显上升(P＜0.05).结论 在斑马鱼中zic3功能可被zic2进行代偿,zic3通过抑制plvap的表达降低胚胎脑血管通透性,通过抑制非经典Wnt信号和VEGF信号通路调控胚胎脑血管发育.

目的:心脏发育异常可导致先天性心脏病(congenital heart disease,CHD),是国内外最常见的先天性畸形,已知NKX2-5、GATA4和ZIC3基因突变可引起CHD.本实验探讨了海南省NKX2-5、GATA4、ZIC3基因突变和散发性先天性单纯性心脏病之间的关系.方法:收集210例散发性CHD患者,提取患者血液DNA,扩增目的基因片段,利用高分辨熔解曲线(high-resolution melting,HRM)技术和DNA测序技术,分析NKX2-5、GATA4和ZIC3基因的序列.结果:对210例CHD患者NKX2-5、GATA4、ZIC3基因测序,发现7个基因突变,包括1个NKX2-5杂合错义突变(c.178G>T),GATA4的3个杂合突变(c.677C>T,c.928A>G,c.1123G>A),ZIC3的3个杂合突变(c.19G>C,c.1255C>G,c.1348C>T).其中NKX2-5(c.178G>T)、GATA4(c.1123G>A)、ZIC3(c.19G>C,c.1255C>G,c.1348C>T)为新突变位点.通过生物信息学软件预测这些基因突变为致病性突变.结论:在210例患者中发现了7个基因突变,首次报道海南省NKX2-5、GATA4和ZIC3的基因突变与CHD发病相关.