目的:探讨锌指蛋白580（zinc finger protein 580，ZNF580）在SH-SY5Y细胞系氧糖剥夺（oxygen-glucose deprivation，OGD）模型中的表达情况及其过表达对缺氧缺血神经元凋亡的影响及可能机制。方法:研究分两部分：（1）培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系，分为模型组和对照组，模型组建立OGD模型（95% N 2、5% CO 2、0.1% O 2的三气培养箱37 ℃恒温培养6 h），并于OGD后6、12和24 h提取蛋白，利用蛋白质印迹技术定量检测ZNF580的表达情况。（2）慢病毒转染过表达ZNF580对细胞凋亡及半胱氨酸蛋白酶3的活化形式（cleaved caspase-3）表达的影响：取对照组和模型组OGD后24 h的细胞。过表达组细胞首先通过慢病毒转染技术构建过表达ZNF580细胞，再行OGD处理。采用流式细胞技术检测各组细胞凋亡率，采用蛋白质印迹技术检测cleaved caspase-3的表达。采用两独立样本 t检验、单因素方差分析及LSD- t两两比较进行统计学分析。 结果:（1）与对照组（1.00）相比，模型组OGD后6、12及24 h ZNF580相对表达量分别为1.36±0.05、2.12±0.07和1.69±0.05，均显著升高（LSD- t值分别为9.20、28.26和19.21， P值均<0.001）。（2）对照组、模型组、过表达组细胞凋亡率分别为（1.07±0.56）%、（21.51±1.65）%和（3.42±0.93）%，cleaved caspase-3相对表达量分别为1.00、2.47±0.59和1.70±0.25。与对照组相比，模型组的细胞凋亡率及cleaved caspase-3相对表达量升高（LSD- t值分别为21.98和8.17， P值均为0.001）；与模型组相比，过表达组的细胞凋亡率及cleaved caspase-3相对表达量降低（LSD- t=19.45， P=0.001；LSD- t=4.28， P=0.005）。 结论:缺氧缺血可导致ZNF580过表达，ZNF580过表达可能通过抑制cleaved caspase-3表达从而影响其酶解活化来减轻缺氧缺血神经元的凋亡。

目的 探讨氧化苦参碱(OM)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠胰腺星状细胞LTC-14中细胞外基质(ECM)分泌的影响及其分子机制.方法 取生长良好的LTC-14细胞株,分为对照组(正常培养的LTC-14细胞),TGF-β1组(10μg/L TGF-β1刺激12 h),TGF-β1+OM组(1 g/L OM预处理30 min,再加入10μg/L TGF-β1刺激12 h),TGF-β1+SiZNF850组(LTC-14细胞中瞬时转染ShRNA-ZNF580质粒,24 h后加入10μg/L TGF-β1刺激12 h).实时定量PCR、Western blot检测细胞内Smad2、Smad3、ZNF580、α-肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)的mRNA和蛋白表达情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ECM中胶原蛋白-Ⅰ(Col-Ⅰ)、Col-Ⅲ、纤维连接蛋白(FN)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的分泌情况.结果 TGF-β1诱导的LTC-14细胞中Smad2、Smad3、ZNF580和 α-SMA的mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05),MMP-2/TIMP1比值下降(P<0.05),且Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、FN、TNF-α 和IL-1β 的分泌水平升高(P<0.05);而用OM预处理或沉默ZNF580基因后,LTC-14细胞中TGF-β1/Smads通路Smad2、Smad3、α-SMA和ZNF580的mRNA和蛋白表达水平均下调(P<0.05),MMP-2/TIMP1表达比值升高(P<0.05),细胞外基质Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、FN、TNF-α和IL-1β分泌水平均降低(P<0.05).结论 OM通过抑制胰腺星状细胞LTC-14中TGF-β1/Smads通路激活,下调ZNF580,阻滞胰腺星状细胞的活化,使ECM分泌减少、降解增多,减轻胰腺纤维化.ZNF580可能是OM作用的分子靶点.

缺血性心脏病(IHD)是一种常见的慢性非传染性疾病,可导致心肌缺血,缺氧甚至坏死.IHD的治疗往往通过改善冠状动脉血流或者药物的使用,如抗血小板治疗等.锌指蛋白家族是脊椎动物动物中已知的存在最多的转录因子家族,它通常具有KRΑB盒子和串联的C2H2型结构.这些蛋白涉及到了肿瘤的抑制、转化,细胞增殖、分化、凋亡等方面.目前越来越多与心脏发育和疾病相关的锌指蛋白被发现,如锌指蛋白(ZNF)202、ZNF580、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)诱导的蛋白质(MCPIP)、CΑTΑ-4等,它们通过各种不同的通路在缺血性心肌病中对心肌起到保护作用.本文主要针对锌指蛋白家族在缺血性心脏病的相关研究进展进行综述.

目的 研究锌指蛋白580(ZNF580)mRNA在肝细胞癌中的表达以及临床价值,预测ZNF580 mRNA在肝细胞癌发生发展中的作用.方法 从癌症基因组图集(TCGA)数据库下载肝细胞癌数据集,获得ZNF580 mRNA基因表达谱和临床信息.利用相关生物信息学方法,分析ZNF580 mRNA在肝细胞癌中表达的情况与临床病理指标的相关性以及对预后的影响.用基因富集化分析预测ZNF580 mRNA在肝细胞癌中调控的可能通路.计量资料2组间比较采用t检验,计数资料组间比较采用χ2检验,并运用Cox比例风险回归模型分析影响患者预后的危险因素,计算风险比(HR)及95％可信区间(95％CI).结果 在TCGA数据库中,ZNF580 mRNA的表达水平在肝癌组织中明显高于癌旁组织(8.440±0.705 vs 7.736±0.387,P<0.05),其表达水平在不同肿瘤分级的患者中差异有统计学意义(t=-2.068,P<0.05).ZNF580 mRNA高表达患者的总体生存期明显低于ZNF580 mRNA低表达患者(χ2=5.456,P<0.05).多因素Cox回归分析提示ZNF580 mRNA的表达水平[HR(95％CI):1.600(1.079～2.372)]和TNM分期[HR(95％CI):2.006(1.394～2.888)]是影响肝细胞癌患者总体生存期的独立危险因素(P值均<0.05).ZNF580 mRNA高表达的样本存在核糖体、亨廷顿病两个通路基因集的富集(P值均<0.05,错误发现率分别为0.198、0.243).结论 ZNF580mRNA可能作为促癌基因在肝细胞癌中发挥作用,有望成为判断肝细胞癌预后的指标和潜在的新治疗靶点.