目的:观察氧化苦参碱(OM)对过氧化氢(H 2O 2)处理的大鼠胰腺腺泡AR42J细胞株高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达和释放的影响。 方法:应用MTT法检测不同浓度H 2O 2处理对AR42J细胞生存率的影响。将体外培养的AR42J细胞分为对照组、H 2O 2组、H 2O 2＋OM组。H 2O 2组及H 2O 2＋OM组加入等容积的H 2O 2(终浓度0.16 mmol/L)，对照组加入等容积三蒸水，H 2O 2＋OM组在加入H 2O 2前0.5 h加入OM(终浓度0.5 g/L)，培养24 h后收取细胞及细胞上清液。采用蛋白免疫印迹法检测细胞HMGB1蛋白表达，酶联免疫吸附试验检测细胞上清液HMGB1蛋白水平，免疫荧光法检测HMGB1蛋白在细胞内的定位分布。 结果:H 2O 2组细胞HMGB1蛋白表达量、分泌到细胞上清液中HMGB1蛋白量、细胞质HMGB1蛋白占细胞总HMGB1蛋白的比例均显著高于对照组[1.04±0.04比0.69±0.02，(4.84±0.13)μg/L比(2.68±0.07)μg/L，(35.7±2.5)%比(10.7±1.9)%]，差异均有统计学意义( P值均<0.05)；应用OM干预后，细胞HMGB1蛋白表达及分泌量、细胞质中HMGB1蛋白占比分别为0.82±0.02、(3.97±0.10)μg/L、(27.3±1.7)%，均显著低于H 2O 2组，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。 结论:H 2O 2能够诱导大鼠胰腺腺泡细胞HMGB1的表达和释放，OM干预可减轻H 2O 2致AR42J细胞氧化应激损伤的程度。

目的:应用网络药理学及分子对接技术探讨苦参碱注射液治疗结直肠癌的作用机制。方法:从Swiss Target Prediction数据库、SuperPred数据库和中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）数据库获得苦参碱的潜在靶点。从基因表达综合（GEO）数据库得到的差异基因结合GeneCards、OMIM、DrugBank和CTD数据库收集结直肠癌相关靶点。建立蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络来筛选核心靶点。利用R语言的Bioconductor进行基因本体（GO）富集分析及京都基因和基因组百科全书（KEGG）信号通路分析。并通过分子对接技术评估苦参碱和核心靶点之间的相互作用。结果:确定了63个苦参碱靶点，获取14 198个结直肠癌疾病靶点。PPI网络的拓扑分析揭示了5个核心靶点分别为髓细胞增生蛋白（MYC）、白细胞介素-6（IL-6）、胱天蛋白酶3（CASP3）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和双调蛋白（AR）。GO富集分析显示，生物过程（BP）主要包括过氧化氢的反应、细胞对过氧化氢的反应和细胞对化学应激的反应等；细胞组分（CC）主要包括脂筏、膜微区和突触膜等；分子功能（MF）主要包括转录协同调节因子结合、突触后神经递质受体活性和核心启动子序列特异度DNA结合等。KEGG通路富集分析表明，苦参碱的作用是由化学致癌-受体激活、肿瘤坏死因子（TNF）信号通路和Toll样受体信号通路介导的。分子对接显示苦参碱与筛选的核心靶点之间具有良好的结合能力。结论:苦参碱作用MYC、IL-6、CASP3、mTOR和AR等靶点，通过调节化学致癌-受体激活、TNF信号通路和Toll样受体等信号通路发挥抗结直肠作用。

目的:探讨氧化苦参碱(Oxy)对结肠癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力的影响及机制。方法:对结肠癌HIC/S和人结肠癌细胞(LOVO细胞)系进行复苏，以3×10 5/孔的密度进行培养，用浓度为0、3.0、6.0、12.0 μmol/L的2 ml Oxy处理，在处理后24、48、72 h，细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞的增殖率，用相位差显微镜观察各组细胞处理后24 h的形态变化；经0、3.0、6.0、12.0 μmol/L的2 ml Oxy处理LOVO细胞系48 h后，Transwell法分析各组细胞系的迁移和侵袭能力，采用原位缺口末端标记法(TUNEL)法和免疫荧光法检测各组细胞中TUNEL阳性细胞数和裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)的表达，采用蛋白质免疫印迹和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞系中血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)的蛋白水平和mRNA水平。 结果:Oxy处理24、48、72 h以后，结肠癌细胞LOVO和HIC/S的活力随着Oxy浓度的升高而下降( F＝4.983， P<0.01)，各时间点均在Oxy浓度为12.0 μmol/L时活力抑制最显著( F＝4.074， P<0.05)，且经过浓度为6.0 μmol/L的Oxy处理24 h以后，细胞形态开始改变并收缩呈圆形。同时，Oxy在浓度为6.0 μmol/L( t＝1.386， P<0.01； t＝2.984， P<0.01)及12.0 μmol/L( t＝9.852， P<0.001； t＝10.371， P<0.001)干预组的细胞侵袭和迁移能力均显著低于空白对照组，而随着Oxy浓度的增加，显著增加TUNEL阳性细胞的数量( F＝4.376， P<0.05)和cleaved Caspase-3的表达( F＝6.268， P<0.01)；LOVO细胞中VEGF( F＝5.768， P<0.05)，VEGFR2( F＝6.432， P<0.05)，p-PI3K( F＝4.845， P<0.05)，p-Akt( F＝5.436， P<0.05)的mRNA及蛋白表达水平随着Oxy浓度的增加逐渐降低。 结论:Oxy通过抑制VEGF/PI3K/Akt信号通路活性来抑制结肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力，并诱导其凋亡。

中医药治疗结肠癌在基础研究方面取得一定成果，中药有效成分如姜黄素、藤黄酸、新藤黄酸、苦参碱、氧化苦参碱、华蟾酥等，复方如四君子汤、加味乌梅丸、黄芩汤等，可通过多途径、多靶点抑制肿瘤细胞增殖、侵袭，诱导肿瘤细胞凋亡，还可增强机体免疫功能、提高化疗药物疗效。

目的:探讨氧化苦参碱(Oxy)通过调控肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(TWEAK)蛋白表达对大鼠继发性甲状旁腺功能亢进症发展进程的影响作用及其作用机制。方法:将20只6周龄雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠根据随机数目表分配法随机分为5组，每组4只：正常对照组(Con)、造模对照组(VC)、低浓度氧化苦参碱干预组(VC+Oxy-L)、中浓度氧化苦参碱干预组(VC+Oxy-M)、高浓度氧化苦参碱干预组(VC+Oxy-H)。采用高腺嘌呤、高磷饮食制备大鼠慢性肾脏病模型。VC+Oxy组自造模第5周开始按照分组以25、50、100 mg/(kg·d)的剂量向大鼠腹腔注射4 ml的氧化苦参碱溶液，Con组及VC组给予同剂量生理盐水腹腔注射。检测造模8周后大鼠血清中肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、碱性磷酸酶(ALP)、钙、磷及甲状旁腺素(iPTH)的浓度。采用蛋白质印迹法(Western blot)、荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测大鼠肾脏肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(TWEAK)表达水平。两组间均数比较采用独立样本 t检验，多组间均数比较采用单因素方差分析。 结果:VC组大鼠SCr、BUN、ALP、iPTH水平高于Con组[(190.25±88.96) μmol/L比(24.00±2.94) μmol/L、(18.60±12.01) mmol/L比(5.10±1.02) mmol/L、(199.00±23.62) mmol/L比(113.5±33.36) mmol/L、(56.70±4.64) ng/L比(8.65±0.94) ng/L， t＝4.828、2.871、4.350、10.630， P<0.05]。各VC+Oxy组大鼠SCr、BUN、ALP、iPTH均较VC组明显下降，其中以VC+Oxy-M组大鼠SCr、ALP水平和VC+Oxy-L组iPTH水平较VC组降低最明显[(84.00±41.66) μmol/L比(190.25±88.96) μmol/L、(129.00±19.57) mmol/L比(199.00±23.62) mmol/L、(30.58±8.28) ng/L比(56.70±4.64) ng/L， t＝3.806、3.562、5.783， P<0.05]。VC组大鼠肾脏中TWEAK基因及蛋白相对表达量高于Con组(3.76±1.61、1.17±0.14比1.01±0.19、0.49±0.02， t＝4.457、6.857， P<0.05)；VC+Oxy组大鼠TWEAK基因及蛋白相对表达量低于VC组，其中以VC+Oxy-H组较VC组降低最为明显(0.56±0.42、0.71±0.15比3.76±1.61、1.17±0.14， t＝5.189、4.657， P<0.05)。 结论:氧化苦参碱可以通过抑制炎性因子表达，减轻大鼠肾脏损伤，从而延缓继发性甲状旁腺功能亢进症进程。

目的:考察电子束辐照和 60Co辐照对苦参药材、苦参中间体提取物及痢泻灵片中4种苦参碱类成分含量的影响。 方法:用电子束辐照和 60Co辐照2种辐照方法，分别以0、1.5、3、5、7、10、20、30、40 kGy剂量对苦参、苦参中间体提取物及痢泻灵片进行辐照，采用HPLC法测定其氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱含量，并比较辐照前后成分含量变化。 结果:氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱分别在0.046 9～0.937 4 μg、0.020 5～0.410 4 μg、0.098 9～1.977 9 μg、0.048 7～0.973 1 μg范围内线性关系良好，平均回收率分别为98.1%、100.1%、100.5%、96.6%， RSD分别为1.69%、2.03%、3.14%、1.10%。电子束辐照和 60Co辐照2种辐照方法对苦参药材中氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱含量基本无影响，对苦参中间体提取物和痢泻灵片4个成分含量有影响。 结论:所建立的苦参碱类成分测定方法准确、重复性好、简单实用，可作为痢泻灵片质控方法。辐照对苦参药材苦参碱类成分含量影响不显著，高剂量辐照对苦参中间体及成药有影响，可为企业质量控制及灭菌辐照提供依据。

目的:探讨氧化苦参碱对结直肠癌小鼠肠道菌群的影响及其对小鼠结直肠癌作用的相关微生物机制。方法:将16只5周龄BALB/c雄性小鼠通过氧化偶氮甲烷（AOM）-葡聚糖硫酸钠（DSS）法建立小鼠原位结直肠肿瘤模型，采用分层抽样的方法分为对照组和氧化苦参碱干预组，每组8只；其中氧化苦参碱干预组于造模第5周开始接受10 mg/kg氧化苦参碱溶液隔日腹腔注射，对照组接受等量0.9% NaCl注射液腹腔注射，至造模第81天实验结束。自开始造模，每3 d测量1次小鼠体质量。于处死前收集小鼠粪便，进行微生物及16S核糖体DNA（rDNA）高通量测序。观察结直肠肿瘤数，取肿瘤组织，采用苏木精-伊红（HE）染色判断肿瘤分化程度，计算各分化级别肿瘤组织灶占总肿瘤组织灶的比例；免疫组织化学法检测Ki-67表达情况。结果:实验后期（造模第49天至第81天），对照组小鼠体质量低于氧化苦参碱干预组[造模第81天体质量：（22.9±0.5）g比（24.0±0.5）g， t=2.187， P<0.05]，实验结束时，氧化苦参碱干预组肠道肿瘤数少于对照组[（8.5±1.2）个比（12.0±1.2）个， t=2.824， P<0.05]；氧化苦参碱干预组小鼠肠道高分化肿瘤灶占比高于对照组[（62.5±3.7）%比（25.0±2.6）%]，Ki-67表达评分低于对照组[（3.2±1.0）分比（6.0±1.0）分， t=2.668， P<0.05]。在门水平，氧化苦参碱干预组小鼠肠道中厚壁菌门、变形菌门丰度高于对照组（均 P<0.05），拟杆菌门丰度低于对照组（ P=0.037）。在属水平，氧化苦参碱干预组norank_f__桑科菌丰度高于对照组（ P=0.001），拟杆菌属、臭气杆菌属、副细菌属、异波菌属丰度低于对照组（均 P<0.05）。 结论:氧化苦参碱可能通过调节小鼠肠道菌群维持肠道菌群稳定，从而降低肠道肿瘤的发生率，延缓肿瘤进展。

背景:人牙周膜干细胞是牙周再生组织工程潜在的功能细胞,然而长期体外培养会导致牙周膜干细胞干性减低并发生复制性衰老,从而影响其治疗效果.目的:探讨氧化苦参碱在体外对牙周膜干细胞干性维持和骨向分化的影响,并寻找潜在的影响机制.方法:采用组织块酶消化法从人牙周膜组织中分离、培养得到牙周膜干细胞,并使用流式细胞仪进行间充质细胞表面标志物鉴定.用0,2.5,5,10 μg/mL氧化苦参碱孵育牙周膜干细胞,通过CCK8实验检测氧化苦参碱对牙周膜干细胞增殖活性的影响,筛选后续实验合适的药物质量浓度,采用Western blot检测牙周膜干细胞中干细胞非特异性蛋白SOX2和OCT4的表达,采用qRT-PCR、Western blot检测牙周膜干细胞中成骨相关基因和蛋白表达水平.结果与结论:①CCK8实验结果显示2.5 μg/mL氧化苦参碱对牙周膜干细胞增殖活性有显著增强作用,后续实验选用2.5 μg/mL氧化苦参碱进行干预;②与空白对照组相比,氧化苦参碱组牙周膜干细胞的干性标志物SOX2蛋白表达水平变化不明显(P>0.05),OCT4蛋白表达明显上调(P<0.05);③与成骨诱导组相比,氧化苦参碱+成骨诱导组牙周膜干细胞成骨相关基因ALP、RUNX2 mRNA表达及成骨相关蛋白ALP蛋白表达明显下调(P<0.05);④氧化苦参碱上调牙周膜干细胞干性标志物表达,抑制牙周膜干细胞骨向分化,高通量测序结果表明可能与WNT2、WNT16、COMP、BMP6有关.

目的:建立苦豆子总黄酮、总生物碱、总多糖配伍后的指纹图谱,研究不同配伍的化学成分与细胞活力以及抗炎之间的关联性,明确不同配伍对细胞活力的影响以及抗炎作用的物质基础.方法:采用高效液相色谱(HPLC)建立苦豆子总黄酮、总生物碱、总多糖配伍后的指纹图谱,以 LPS 刺激 RAW 264.7建立炎症细胞模型,对不同配伍组合对炎症细胞模型肿瘤坏死因子(TNF-α)水平以及以细胞活力进行检测,采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)研究苦豆子化学成分与抗炎作用的谱效关系,筛选苦豆子抗炎作用的物质基础.结果:苦豆子生物碱类成分HPLC 指纹图谱共有峰有8个,指认出5个共有峰,分别是槐果碱、槐定碱、苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱;黄酮类成分HPLC 指纹图谱共有峰有15个,指认出3个共有峰,分别为槲皮素、紫铆因和芹菜素.相关性分析结果表明,槐果碱、槐定碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱与脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞(RAW 264.7)细胞释放的炎症因子TNF-α 水平呈显著负相关,槲皮素与细胞活力呈负相关,紫铆因、芹菜素与细胞活力呈正相关,槐定碱、氧化苦参碱与细胞活力呈负相关,苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱与细胞活力呈正相关.结论:槐果碱、槐定碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱可能是苦豆子抗炎的物质基础,可为挖掘苦豆子的质量标志物以及药材质量控制提供参考.

目的 探讨苦参碱对阿尔茨海默病β-淀粉样蛋白(Aβ)25-35诱导PC12细胞凋亡和氧化损伤的影响,并分析其与AMP活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子(SIRT1)通路的作用机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度苦参碱对PC12细胞生长的影响,最终选择0.5、1.0和1.5 mmol/L苦参碱进行实验.将PC12细胞分为Con组(空白培养细胞),Aβ25-35组(20μmol/L的Aβ25-35处理细胞),Aβ25-35+Matrine-L组、Aβ25-35+Matrine-M组、Aβ25-35+Matrine-H组(20 μmol/L的Aβ25-35和0.5 mmol/L、1.0 mmol/L、2.0 mmol/L苦参碱处理细胞).用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧(ROS)含量,酶联免疫吸附法检测超氧化的物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,Western blotting检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)、AMPK/SIRT1通路相关蛋白表达.结果 与Con组相比,Aβ25-35组24 h、48 h的吸光度(OD)值、Bcl-2蛋白表达、SOD和GSH-Px活性均降低,凋亡率、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达、ROS含量、IL-6、IL-1β、TNF-α表达增加,p-AMPK、SIRT1蛋白表达上调(均P<0.05);与Aβ25-35组相比,Aβ25-35+Matrine-L组、Aβ25-35+Matrine-M组、Aβ25-35+Matrine-H组24 h、48 h的OD值、Bcl-2蛋白表达、SOD和GSH-Px活性增加(P<0.05),凋亡率、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达、ROS含量、IL-6、IL-1β、TNF-α表达降低,p-AMPK、SIRT1蛋白表达下调(P<0.05).结论 苦参碱可能通过抑制AMPK/SIRT1通路激活,减轻Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡和氧化损伤.