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miR-592靶向Cep135调控小鼠胚胎干细胞自我更新及分化
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨miR-592在小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)自我更新及分化过程中的作用.方法 通过转染试剂将miR-592表达质粒转入mESCs,以过表达miR-592.利用qRT-PCR及Western印迹法分析miR-592对mESCs分化的影响.利用TargetScan数据库预测miR-592作用的靶基因,并通过双荧光素酶报告实验验证靶基因.利用Western印迹法探究miR-592及其靶基因对mESCs自我更新的影响.结果 qRT-PCR及Western印迹法实验结果表明miR-592促进mESCs向外胚层方向分化.生物信息学分析及双荧光素酶报告实验的结果表明Cep135是miR-592作用的靶基因,而Western印迹法实验发现Cep135能够促进mESCs的自我更新.结论 miR-592通过靶向下调Cep135的表达,以抑制mESCs的自我更新,进而促使mESCs向外胚层方向分化.
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编辑人员丨2023/8/6
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lncRNA-135调控miR-592维持小鼠胚胎干细胞多能性
编辑人员丨2023/8/5
目的 筛选并确定调控miR-592作用的关键lncRNA,探讨其对miR-592沉默靶基因cep135的调控作用.方法 利用lncRNA基因芯片筛选小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)及KO miR-592 mESCs中差异的lncRNA从而找出关键调控分子1ncRNA-135.利用转染试剂干扰lncRNA-135的表达,使用Western印迹法、双荧光素酶报告系统及免疫细胞化学染色等技术检测lncRNA-135对miR-592及其靶基因cep135的表达影响,进而阐明lncRNA-135对mESCs多能性的调控作用.结果 lncRNA基因芯片分离确定了527条差异表达的lncRNA,经过生物信息学分析及qRT-PCR验证,确定了评分最高的lncRNA-135为关键作用分子.双荧光素酶报告系统证实了1ncRNA-135能够结合miR-592以干扰其沉默靶基因cep135.而Western印迹法和免疫细胞化学染色结果则证实lncRNA-135通过作用于miR-592,阻止其对cep135的抑制作用,进而促进mESCs的多能性.结论 lncRNA-135可以通过充当miR-592的“分子海绵”从而调节与mESCs多能性维持有关的多个基因的表达,这将可能帮助建立调控性miRNA网络与mESCs多能性之间的联系.
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编辑人员丨2023/8/5
