目的:明确环状RNA-SEC31A(circSEC31A)在胰腺癌中的表达水平，探讨其对胰腺癌细胞侵袭、迁移能力的影响及潜在的分子机制。方法:采用实时荧光定量PCR检测人正常胰腺细胞株HPDE及胰腺癌细胞株BXPC-3、PANC1、CaPan-2、SW1990 circSEC31A的表达水平，选用表达量较高的胰腺癌细胞株进行后续实验。针对circSEC31A设计两条siRNA(#1、#2)，采用脂质体将siRNA转染胰腺癌细胞沉默circSEC31A表达(siR-circSEC31A组)，以不针对circSEC31A设计的siRNA转染胰腺癌细胞为对照组(siR-NC组)，Transwell实验及划痕实验检测circSEC31A对胰腺癌细胞侵袭、迁移能力的影响。采用circSEC31A探针及oligo阴性对照探针进行RNA Pull-down实验，筛选与circSEC31A结合的miRNA，并验证该miRNA对胰腺癌细胞侵袭、迁移的影响。荧光定量PCR检测沉默miR-200c-3p及circSEC31A对胰腺癌细胞PDK1 mRNA表达的影响。蛋白质印迹法检测circSEC31A沉默对PDK1蛋白及下游相关蛋白Akt、磷酸化Akt(p-Akt)表达量的影响。结果:胰腺正常细胞株HPDE circSEC31A表达量(1.000±0.120)显著低于胰腺癌细胞株BXPC-3(1.920±0.130)、SW1990(2.93±0.528)、PANC1(4.557±0.692)和CaPan-2(5.247±0.194)的circSEC31A表达量，差异有统计学意义( P<0.001)。Transwell实验结果显示，与PANC1 siR-NC组穿膜细胞数(1301.3±94.6)个/100倍视野和CaPan-2 siR-NC组穿膜细胞数(1835.0±70.1)个/100倍视野比较，PANC1 siR-circSEC31A#1组、siR-circSEC31A#2组和CaPan-2 siR-circSEC31A#1组、siR-circSEC31A#2组穿膜细胞数显著下降，分别为(727.3±92.9)、(792.0±18.1)、(718.0±90.6)、(692.7±84.8)个/100倍镜视野；划痕实验结果显示，与PANC1 siR-NC组(55.000±4.359)%和CaPan-2 siR-NC组(69.000±3.606)%比较，PANC1 siR-circSEC31A#1组(20.667±3.215)%、siR-circSEC31A#2组(20.000±4.583)%和CaPan-2 siR-circSEC31A#1组(28.000±8.185)%、siR-circSEC31A#2组(29.667±5.686)%的划痕区细胞覆盖率显著降低；RNA Pull-down实验表明，与PANC1 oligo探针组(1.000±0.091)和CaPan-2 oligo探针组(1.000±0.153)比较，PANC1 circSEC31A探针组(2.237±0.175)和CaPan-2 circSEC31A探针组(2.166±0.156)miR-200c-3p富集量显著升高；与siR-NC组穿膜细胞数(939.3±57.0)、(786.7±51.5)个/100倍镜视野比较，PANC1、CaPan-2细胞siR-miR-200c-3p组穿膜细胞数增加到(1206.0±99.1)、(1838.0±105.7)个/100倍视野，而siR-miR-200c-3p+siR-circSEC31A组穿膜细胞数又下降到(932.7±116.4)、(785.3±58.8)个/100倍镜视野；与siR-NC组(1.000±0.103、1.000±0.107)比较，PANC1、CaPan-2细胞siR-miR-200c-3p组PDK1 mRNA表达量(1.898±0.159、2.102±0.337)显著升高，而siR-miR-200c-3p+siR-circSEC31A组PDK1 mRNA表达量又显著下降到(0.980±0.070、1.015±0.079)；蛋白质印迹法结果显示，PANC1 siR-NC组、siR-circSEC31A#1组、siR-circSEC31A#2组PDK1蛋白表达量分别为0.767±0.086、0.281±0.191、0.333±0.062，CaPan-2各组PDK1蛋白表达量分别为0.712±0.038、0.353±0.061、0.308±0.018；PANC1各组p-Akt蛋白表达量分别为0.741±0.050、0.114±0.027、0.139±0.041，CaPan-2各组p-Akt蛋白表达量分别为0.823±0.052、0.141±0.045、0.280±0.089。siR-circSEC31A组PDK1、p-Akt蛋白表达量均显著低于siR-NC组。以上各组间比较差异均有统计学意义( P值均<0.05)。 结论:circSEC31A在胰腺癌细胞中高表达，通过介导miR-200c-3p/PDK1/Akt轴来促进胰腺癌的侵袭转移。circSEC31A可能成为胰腺癌患者早期诊疗潜在的新靶点。

目的 研究环状RNA?SEC31A?(circSEC31A)?在肝癌组织和肝癌细胞HepG2中的表达水平及其对肝癌细胞HepG2的增殖和有氧糖酵解的影响.方法 留取15例肝细胞癌切除术中肿瘤标本.应用实时PCR方法检测circSEC31A在肝癌组织中的内源性表达情况.应用EdU方法检测HepG2细胞的增殖情况.应用葡萄糖摄取实验等检测HepG2细胞有氧糖酵解的相关指标.结果 circSEC31A在肝癌组织和HepG2细胞中高表达,外源敲减circSEC31A的表达能抑制HepG2细胞的增殖和有氧糖酵解.结论 circSEC31A在肝癌组织和HepG2细胞中表达上调,在HepG2细胞中发挥促癌基因的作用,circSEC31A可能成为治疗肝癌的基因新靶点.

目的 探讨环状非编码RNA SEC31A(circSEC31A,又名hsa_circ_0006618)对脂肪干细胞增殖、 凋亡和成骨分化的影响和机制.方法 在脂肪干细胞中分别转染sh-circSEC31A和LV-circSEC31A后,细胞增殖采用CCK8法检测;细胞凋亡采用流式细胞仪检测;circSEC31A和miR-324-5p靶点结合情况采用双荧光素酶测定法检测;成骨分化相关分子RUNX2和OPN的mRNA和蛋白水平分别采用Western blot和RT-qPCR检测.结果 在脂肪干细胞中转染sh-circSEC31A后能够明显抑制细胞的增殖和成骨分化相关分子RUNX2、OPN的表达水平(P<0.05),促进细胞的凋亡(P<0.05).在脂肪干细胞中转染LV-circSEC31A后能够明显促进细胞的增殖和成骨分化相关分子RUNX2、OPN的表达水平(P<0.05),抑制细胞的凋亡(P<0.05).双荧光素酶结果 显示circSEC31A能够靶向结合miR-324-5p(P<0.05).回复实验显示,在脂肪干细胞中共转染LV-circSEC31A和miR-324-5p mimics后能够反转单独转染LV-circSEC31A对脂肪干细胞增殖、凋亡和成骨分化的影响;共转染LV-circSEC31A和miR-324-5p inhibitors后能够进一步加强单独转染LV-circSEC31A对脂肪干细胞增殖、 凋亡和成骨分化的影响.结论 circSEC31A能够通过靶向调控miR-324-5p参与脂肪干细胞增殖、 凋亡和成骨分化,circSEC31A可能成为干预脂肪干细胞生物学功能的靶点.