目的 探讨溪黄草对circ_0091579/miR-515-5p及肺癌细胞A549 增殖和凋亡的影响.方法 将肺癌A549 细胞分为对照组、溪黄草(20、40、80 mg/L)组、si-circ_0091579 组、si-NC组、pcDNA-circ_0091579 组、pcDNA组、溪黄草+pcDNA-circ_0091579 组.CCK-8、平板克隆实验、流式细胞术检测A549 细胞抑制率、克隆形成数以及凋亡率.qRT-PCR检测circ_0091579 和miR-515-5p表达.双荧光素酶报告实验验证circ_0091579 和miR-515-5p相互作用.结果 溪黄草显著降低A549 细胞的增殖和克隆形成能力,促进细胞凋亡,诱导cleaved-Caspase-3 表达上调及circ_0091579 下调,且呈质量浓度依赖性.下调circ_0091579 可降低A549 细胞的增殖和克隆形成能力,促进细胞凋亡,诱导cleaved-Caspase-3表达上调.上调circ_0091579 可逆转溪黄草对A549 细胞的增殖抑制和凋亡促进功能.circ_0091579 和miR-515-5p直接特异性结合.结论 溪黄草可抑制肺癌细胞A549 增殖,诱导其凋亡,其机制与下调circ_0091579/miR-515-5p途径有关.

目的 探究环状RNA(circRNA)hsa_circ_0091579在肝细胞癌(HCC)细胞系中的表达及其对HCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 体外培养人肝癌细胞系SMMC-7721、HuH-7、MHCC-97H、HepG2和人正常肝细胞系HL-7702.从细胞中提取RNA,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测hsa_circ_0091579在HCC细胞系及人正常肝细胞系中的表达,并进行对比.针对hsa_circ_0091579的环化拼接位点设计siRNA,在体外HepG2和HuH-7细胞中转染hsa_circ_0091579 siRNA,并用qRT-PCR验证其有效性.实验分为siRNA组(hsa_circ_0091579 siRNA)和NC组(negative control siRNA),并在HepG2和HuH-7细胞中用CCK8实验、流式细胞术、划痕实验以及Transwell实验分别研究hsa_circ_0091579对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响.使用双荧光素酶报告基因实验对预测的靶点进行验证.计量资料两组间比较采用t检验.结果 与hsa_circ_0091579在人正常肝细胞系HL-7702中的表达水平相比,其在HCC细胞系SMMC-7721、HuH-7、MHCC-97H、HepG2中的表达水平均明显升高(t值分别为14.27、36.34、26.70、36.16,P值均<0.001).与NC组相比,hsa_circ_0091579 siRNA可在HepG2和HuH-7细胞中有效沉默hsa_circ_0091579(t值分别为14.22、27.20,P值分别为0.005、0.001).CCK8实验和流式细胞术结果显示,与NC组相比,siRNA组HepG2和HuH-7细胞的增殖活性明显降低,凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(P值均<0.05);划痕实验和Transwell实验显示,与NC组相比,siRNA组HepG2和HuH-7细胞的迁移和侵袭能力明显减弱(t值分别为19.63、13.61、20.75、18.45,P值分别为0.003、0.005、0.002、0.003).荧光素酶报告基因实验结果显示,与NC组相比,miR-149、miR-490-5p和miR-502-5p均能明显降低野生型荧光素酶质粒的活性(t值分别为10.01、9.13、61.49,P值分别为0.010、0.012、<0.001).结论 hsa_circ_0091579在HCC细胞系中高表达,可能通过抑制miR-149、miR-490-5p和miR-502-5p发挥其癌基因的作用.

目的:探讨环状RNA circ_0091579作为分子海绵吸附miR-330-3p介导环指蛋白126(ring finger protein 126,RNF126)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞增殖、凋亡、侵袭的影响.方法:选取2019年2月至2020年5月在大理大学第一附属医院行手术治疗的60例CRC患者的癌组织和癌旁组织.构建circ_0091579、miR-330-3p的过表达或敲减的CRC LoVo细胞,qPCR检测CRC组织和细胞中circ_0091579、miR-330-3p和RNF126的表达;MTT、Transwell、流式细胞术分别检测细胞的增殖、侵袭、凋亡情况;生物信息学方法预测circ_0091579和miR-330-3p、miR-330-3p和RNF126的靶向关系并用双荧光素酶报告实验和RNA免疫沉淀实验验证.结果:CRC组织和多种细胞(HCT116、SW620、CW-2、LoVo细胞)中,circ_0091579和RNF126均高表达、miR-330-3p均低表达(均P<0.05).敲减circ_0091579可以抑制LoVo细胞的增殖、侵袭而促进其凋亡(均P<0.05),但该影响在加入miR-330-3p-inhibitor后被逆转;过表达miR-330-3p使LoVo细胞增殖和侵袭能力减弱但凋亡程度加强(均P<0.05),该影响在加入RNF126后被抵消.circ_0091579、miR-330-3p和RNF126之间存在靶向作用关系.结论:circ_0091579通过miR-330-3p/RNF126轴促进LoVo细胞增殖、侵袭而抑制其凋亡.