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miR-5188在肝癌细胞中的作用及网络调控机制研究
编辑人员丨2024/2/3
目的 探究miR-5188 在肝癌细胞中的作用及网络调控机制.方法 过表达或敲低miR-5188 表达后,检测肝癌细胞HepG2 的增殖能力.利用miRNA靶基因预测数据库miRDB获取miR-5188潜在的靶基因,使用小干扰RNA(siRNA)敲低HepG2 细胞中的上述靶基因后检测细胞增殖能力.采用实时荧光定量PCR法检测正常肝细胞LO2 和HepG2 细胞中miR-5188、pre-miR-5188 和pri-miR-5188的表达水平,并分析长链非编码RNA NEAT1(下文简称NEAT1)、NONO/PSF复合体对pri-miR-5188 的影响.结果 过表达miR-5188 后,HepG2 细胞的增殖能力增强;敲低miR-5188 表达后,HepG2 细胞的增殖能力减弱,差异均有统计学意义(P均＜0.05).敲低DIDO1 表达后,HepG2 细胞的增殖能力增强;过表达DIDO1 后,HepG2 细胞的增殖能力减弱,差异均有统计学意义(P均＜0.05).过表达miR-5188 后,HepG2 细胞中DIDO1 的表达水平降低;敲低miR-5188 表达后,HepG2 细胞中DIDO1 的表达水平升高,差异均有统计学意义(P均＜0.05).双荧光素酶报告基因实验检测结果显示,miR-5188 靶向DIDO1 mRNA的 3'非翻译区(3'-UTR).与LO2 细胞相比,HepG2 细胞中miR-5188 和pre-miR-5188 的表达水平均显著升高,而pri-miR-5188 的表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05).与LO2 细胞相比,HepG2 细胞中NEAT1 的表达水平显著升高(P＜0.05),而NONO和PSF的表达水平差异均无统计学意义(P均＞0.05).敲低NEAT1、NONO或PSF表达后,HepG2 细胞中pri-miR-5188 的表达水平均显著升高(P均＜0.05).敲除NEAT1后,HepG2 细胞中pri-miR-5188的表达水平升高,NONO与PSF的相互作用减弱,并且NONO/PSF与pri-miR-5188 的结合减少.结论 HepG2 细胞中NEAT1 的表达水平升高,提高了NONO/PSF复合体对pri-miR-5188 的加工水平,增强了miR-5188/DIDO1 轴对HepG2 细胞增殖能力的正向作用.
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编辑人员丨2024/2/3
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芯片技术分析卵巢子宫内膜异位症外泌体microRNA表达差异
编辑人员丨2023/8/6
目的:探讨卵巢子宫内膜异位症(ovarian endometriosis,OEM)外泌体微小RNA(microRNA,miRNA)的表达谱.方法:采用芯片技术对3例OEM患者及3例健康对照者的在位内膜间质细胞外泌体miRNA进行分析,筛选出组间差异miRNA.结果:获得存在差异表达miRNA共12条,其中hsa-miR-6829-5p、hsa-miR-5188、hsa-miR-4430、hsa-miR-584-5p、hsa-miR-4485-5p、hsa-miR-4257在实验组表达上调,hsa-miR-188-5p、hsa-miR-4741、hsa-miR-4516、hsa-miR-1229-5p、hsa-miR-7150、hsa-miR-5787表达下调.对表达差异较大的外泌体miRNA进行靶基因预测及其基因功能(gene ontology,GO)分析和信号通路(pathway)分析,发现靶基因聚集的生物学功能多数参与生物进展过程的调控.结论:OEM患者与健康对照者的在位内膜间质细胞外泌体miRNA存在着差异性表达.差异性表达的miRNA特异性很高,对进一步阐明该疾病的发病机制和寻找新的诊断标记物具有重要意义.
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编辑人员丨2023/8/6
