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目的 探讨利用细胞指数富集配基的系统进化(SELEX)技术筛选特异性靶向并结合上皮细胞黏附分子(EpCAM)阳性前列腺癌(PCa)细胞的适配体的方法.方法 设计随机 DNA 文库,以表达 EpCAM分子的人 PCa 细胞为靶标,利用细胞 SELEX技术筛选 EpCAM特异性DNA适配体.经过 1 2 轮体外筛选,对 DNA产物进行克隆和测序,用流式细胞术、细胞免疫荧光技术检测适配体对靶细胞特异性结合的能力.结果 从随机单链DNA文库中筛选出的2 条EpCAM适配体Ep1 和Ep2 均能特异性结合人PCa细胞 LNCaP、PCG3 、DU145 和慢病毒表达载体 pCDHGEpCAM转染的 HEK2 9 3T 细胞,而不能结合空载体 pCDH 转染的HEK293T细胞,且Ep1 对各细胞的结合率分别为61.0

作者:仲津漫;黄旭方;文娣娣;康晓伟;宦怡;任静

来源:实用放射学杂志 2019 年 35卷 6期

知识库介绍

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仲津漫;黄旭方;文娣娣;康晓伟;宦怡;任静
来源:
实用放射学杂志 2019 年 35卷 6期
标签:
细胞指数富集配基的统计进化 适配体 前列腺癌 上皮细胞黏附分子 cellGsystematic evolution of ligands by exponential enrichment aptamer prostate cancer epithelial cell adhesion molecule
目的 探讨利用细胞指数富集配基的系统进化(SELEX)技术筛选特异性靶向并结合上皮细胞黏附分子(EpCAM)阳性前列腺癌(PCa)细胞的适配体的方法.方法 设计随机 DNA 文库,以表达 EpCAM分子的人 PCa 细胞为靶标,利用细胞 SELEX技术筛选 EpCAM特异性DNA适配体.经过 1 2 轮体外筛选,对 DNA产物进行克隆和测序,用流式细胞术、细胞免疫荧光技术检测适配体对靶细胞特异性结合的能力.结果 从随机单链DNA文库中筛选出的2 条EpCAM适配体Ep1 和Ep2 均能特异性结合人PCa细胞 LNCaP、PCG3 、DU145 和慢病毒表达载体 pCDHGEpCAM转染的 HEK2 9 3T 细胞,而不能结合空载体 pCDH 转染的HEK293T细胞,且Ep1 对各细胞的结合率分别为61.0

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