目的 通过灌胃和喷雾两种不同给药方式,比较研究乌梅合剂对放射性口干症Wistar大鼠的唾液腺影响作用.方法 使用直线加速器照射麻醉后大鼠唾液腺区,建立放射性口干大鼠模型,随机分为喷雾及灌胃两种不同给药方式组,组内各设阳性对照组(匹罗卡品组)、模型组与正常组.连续给药14 d,并在7 d与14 d两个时间点收集大鼠唾液及摘取颌下腺腺体.随后对各组唾液量、腺体指数、成份分析及颌下腺病理变化(HE染色)进行分析比较.结果 放射后第7天,喷雾组内乌梅组与匹罗卡品组、模型组比较,唾液量增加、颌下腺指数升高,差异有显著性( P ＜ 0. 05).乌梅喷雾组与乌梅灌胃组比较,唾液量增加、颌下腺指数升高,唾液淀粉酶( salivary alpha-amylase,SAA)活性增高,差异有显著性(P＜ 0. 05).在放射后第14天,乌梅喷雾组较乌梅灌胃组比较,唾液量增加,颌下腺指数升高,均较乌梅灌胃组高,差异有显著性(P＜ 0. 05).颌下腺病理观察显示,放射后第7天,乌梅喷雾组与乌梅灌胃组相比,颌下腺腺小叶间隙较小,腺体周围炎性细胞浸润程度较低,照射后第14天,乌梅喷雾组导管结构破坏及腺体核固缩数量减少.而乌梅灌胃组第7 天及14 天均显示部分腺体细胞持续发生空泡性坏死,腺体细胞核固缩明显.结论 乌梅合剂通过喷雾给药法直接接触大鼠口腔,对大鼠唾液分泌及唾液淀粉酶活性的作用比灌胃给药强,且能促进颌下腺放射性损伤细胞病理形态修复,提示对于放射性口干症,喷雾给药比灌胃给药效果更显著.

目的 探讨骨转移瘤患者放疗前后唾液α-唾液淀粉酶(SAA)水平和癌痛程度的变化,并分析其相关性.方法 选择92例确诊为恶性肿瘤骨转移并接受放疗的患者.放疗前(d0)、放疗5次后(d5)和放疗10次后(d10)采用便携式唾液淀粉酶分析仪检测唾液SAA水平,采用VAS评分法评价患者疼痛程度.采用Pearson法分析唾液SAA水平和VAS评分的相关性.结果 d0、d5、d10本组患者唾液SAA水平分别为(109.1±12.0)、(66.0±13.2)、(34.5±15.3)U/mL.与d0相比,d5和d10本组患者唾液SAA水平降低(P均<0.05),且d10本组患者唾液SAA水平低于d5(P均<0.05).d0、d5、d10本组患者VAS评分分别为(8.1±0.8)、(6.3±0.8)、(3.5±1.5)分.与d0相比,d5和d10本组患者VAS评分降低(P均<0.05),且d10本组患者VAS评分低于d5(P均<0.05).放疗10次后,92例患者中14例疼痛完全缓解(VAS评分≤1分),65例部分缓解7(VAS评分≤5分),13例患者疼痛减轻程度不明显(VAS评分>5分).Pearson相关性分析显示,骨转移瘤患者癌痛程度(VAS评分)与SAA水平呈正相关(r=0.856,P<0.001).结论 放疗后骨转移瘤患者癌痛程度(VAS评分)和唾液SAA水平均显著降低.骨转移瘤患者血清SAA水平与VAS评分呈正相关.

目的 探讨甲磺酸伊马替尼调控Telocytes(TCs)对下颌下腺唾液分泌功能的影响.方法 采用免疫荧光染色技术对TCs免疫标记物(C-kit/CD 117、CD34)进行双标记染色,进而对小鼠下颌下腺内TCs进行定位.采用透射电子显微镜(TEM)显示小鼠下颌下腺内TCs的超微结构及其与周围细胞之间的关系.建立甲磺酸伊马替尼干预模型,实验小鼠分5组:正常组(共24只),用药1周、2周、3周、4周组(共24只),药物以80 mg/(kg·d)每日灌胃,免疫荧光显示,用药前后下颌下腺内TCs的变化;免疫印迹法(Western blotting)观察用药前后CD117、CD34及下颌下腺内α唾液淀粉酶(α-Amy)蛋白表达水平的变化.结果 免疫荧光染色显示,TCs广泛分布于下颌下腺结缔组织内,胞体较小有突起(Tps),Tps相互连接成网络样结构,包绕着腺泡及导管,随甲磺酸伊马替尼干预时间延长,用药组Tps构成的网络样结构变稀疏.超微结构显示,Tps呈念珠状,与邻近组织紧密相连,周围可见胞外囊泡.随用药时间的增加Tps减少,TCs胞内囊泡增多,胞内细胞器减少.免疫印迹法显示,用药后CD117、CD34、α-Amy蛋白表达水平相应减少且互为正相关.结论 小鼠下颌下腺内存在TCs,甲磺酸伊马替尼对TCs的干预可能会通过影响TCs的结构、免疫表型和细胞间通讯降低下颌下腺唾液分泌功能.

背景:胆碱能受体激动剂可促进放射性唾液腺损伤患者残存唾液细胞的分泌,但长期用药存在严重的不良反应且对严重放射性唾液腺损伤的治疗效果有限.骨髓间充质干细胞是一种具有多向分化潜能和几乎无限增殖能力的细胞,具备治疗放射性唾液腺损伤的潜力.目的:探索骨髓间充质干细胞修复放射性唾液腺损伤的效果和机制.方法:①从小鼠骨髓中提取骨髓间充质干细胞,采用3D共培养系统,将其与第2代唾液腺腺泡细胞共培养24 h;②取150只C57小鼠,随机等分为正常对照组、放射性唾液腺损伤组以及骨髓间充质干细胞组,后2组通过电子直线加速器以15 Gy照射剂量建立放射性唾液腺损伤小鼠模型.照射后1周,骨髓间充质干细胞组于唾液腺局部多点皮下注射2×109 L-1骨髓间充质干细胞悬液,另2组注射等量生理盐水.结果与结论:经共培养24 h后,骨髓间充质干细胞可以向唾液腺腺泡细胞分化,类似多角形,并表达α-淀粉酶.与正常对照组相比,放射性唾液腺损伤组小鼠唾液流量、唾液腺质量以及唾液淀粉酶水平明显减少,腺泡细胞结构出现明显损伤,唾液腺中Notch的表达水平降低;而与放射性唾液腺损伤组相比,骨髓间充质干细胞组小鼠唾液流量、唾液腺质量以及唾液淀粉酶水平明显恢复,腺泡细胞结构损伤减轻,唾液腺中Notch的表达水平恢复.说明骨髓间充质干细胞移植可有效治疗放射性唾液腺损伤,且其作用可能是通过调节Notch的表达水平实现的.

目的 建立α-唾液淀粉酶(salivary alpha-amylase,sAA)胶体金免疫渗滤法,制备胶体金免疫渗滤试纸,并将该试纸用于中药白术及葛根的酶学作用研究.方法 采用胶体金标记技术,筛选最佳标记pH值和抗体标记量,制备金标抗体复合物,再利用纸基免疫渗滤技术,设计单因素试验,优化包被液种类、包被条件、封闭液种类、封闭条件、洗涤液种类、抗原抗体最佳工作浓度、包被抗原与金标抗体反应条件、待测样品与金标抗体反应条件共8个影响因素,建立胶体金免疫渗滤检测法,同时对免疫试纸的灵敏度和初步稳定性进行验证,并利用该试纸检测不同浓度中药白术和葛根提取液对sAA与其抗体特异性结合活性的促进或抑制作用.结果 胶体金标记抗体的最佳pH值为8.5,最佳抗体稀释比例为1 ∶ 125,在此条件下制备的金标抗体复合物稳定性良好,活性效价为1 ∶ 384.sAA胶体金免疫渗滤法的最适反应条件为:以含8％甲醇的PBS缓冲液(0.01 mol/L,pH 7.4)为包被液稀释sAA至10 μg/mL,37℃包被 15 min;以含2％BSA 的 PBS 缓冲液(0.01 mol/L,pH 7.4)为封闭液,37℃封闭 15 min;以含0.4％Tween-20的PBS缓冲液(0.01 mol/L,pH 7.4)为洗涤液对NC膜进行洗涤;待测样品与稀释比例为1 ∶ 1的金标抗体于37℃下提前反应15 min,加入NC膜后25℃条件下再反应20 min,洗涤后根据斑点显色情况判断实验结果.制备的胶体金免疫渗滤试纸灵敏度为5 μg/mL,稳定性良好.中药酶学作用研究结果显示,白术可促进sAA与其抗体的特异性结合,而葛根具有抑制作用,且两者作用程度与中药提取液的浓度呈正相关.结论 建立的sAA胶体金免疫渗滤法操作简便、快速,成本低,灵敏度和稳定性良好,可为sAA的快速检测提供新方法.

目的:探讨雌激素对下颌下腺中VIP及其受体表达的影响,并观察功能指标α-唾液淀粉酶的变化.方法:雌性SD大鼠设置假手术组(SHAM),去卵巢组(OVX),去卵巢后雌激素干预组(OVX+E),实施假手术和卵巢切除术,构建围绝经期动物模型.手术后两周,SHAM组和OVX组腹腔注射芝麻油,OVX+E组腹腔注射17β-雌二醇,持续4周.应用放射免疫法检测大鼠血清雌二醇含量,免疫组化和免疫印迹法观察下颌下腺VIP和VPAC1的表达,活性检测试剂盒微量法测定下颌下腺α-唾液淀粉酶活性.结果:OVX组血清17β-雌二醇含量较SHAM组显著降低(P＜0.05),OVX+E组血清17β-雌二醇含量与SHAM组无明显差异(P＞0.05),证实围绝经期动物模型构建成功.免疫组化和免疫印迹结果显示,OVX组VIP和VPAC1表达较SHAM组明显减少(P＜0.05),OVX+E组表达恢复至SHAM组水平(P＞0.05).微量法活性检测显示OVX组α-唾液淀粉酶活性较SHAM组显著降低(P＜0.05),OVX+E组活性升高至SHAM组水平(P＞0.05).结论:雌激素水平与下颌下腺中VIP、VPAC1的表达呈正相关,可能通过对VIP及VPAC1的调控影响功能指标α-唾液淀粉酶活性.

目的:观察小柴胡汤加减治疗慢性结肠炎的临床疗效.方法:选择2019 年1 月至2021 年5 月在上饶市广丰区人民医院治疗的慢性结肠炎患者126 例,随机分为对照组和治疗组,每组各63 例.对照组采用常规西医治疗,治疗组在对照组治疗的基础上采用小柴胡汤加减治疗,两组均以10 d 为1 个疗程,连续治疗4 个疗程.比较两组患者临床疗效、中医证候积分、血清炎性因子、代谢功能及免疫功能指标变化情况.结果:对照组有效率为82.54％,治疗组有效率为95.24％,两组有效率比较,差异有统计学意义(P＜0.05);两组患者治疗后各中医证候积分均降低,与治疗前比较,差异有统计学意义(P＜0.05),且组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05);两组患者治疗后血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、超敏C 反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)水平降低,IL-10 升高,与治疗前比较,差异有统计学意义(P＜0.05),且组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05);两组患者治疗后D-木糖排泄率、唾液淀粉酶活性均较前升高,与治疗前比较,差异有统计学意义(P＜0.05),且组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05);两组患者治疗后CD3+、CD8+降低,CD4+升高,与治疗前比较,差异有统计学意义(P＜0.05),且组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05);两组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:小柴胡汤加减治疗慢性结肠炎可明显改善患者症状,提高机体免疫功能,且无明显不良反应.