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疫情防控专题:新型冠状病毒相关蛋白ACE2和TMPRSS2在眼部组织表达的实验研究
编辑人员丨5天前
本文于2020年4月22日优先发布于中华眼科杂志官网目的:探讨眼部组织新型冠状病毒侵染和激活关键蛋白人血管紧张素转换酶2(ACE2)和跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)的情况,明确新型冠状病毒在眼部的侵染基础。方法:实验研究。选取30只小鼠,按性别、年龄、是否诱导糖尿病模型分为雄性组、雌性组、老年组、糖尿病组及糖尿病对照组,每组6只。使用荧光定量PCR分析小鼠结膜、角膜、泪腺、虹膜、晶状体、视网膜ACE2基因和TMPRSS2基因表达情况,并与肺脏、心脏、肾脏、肝脏中两个基因的表达量进行比较。使用免疫组化染色分析了小鼠各组织中ACE2和TMPRSS2蛋白的分布和表达情况。另取山东省眼科研究所红十字眼库接收的符合捐献条件的志愿者角膜及结膜组织切片,与小鼠眼部ACE2蛋白和TMPRSS2蛋白表达进行验证比较。同时通过分析已发表的人眼部组织转录组数据库,比较人角膜和结膜中ACE2和TMPRSS2基因的表达情况。对不同性别、年龄、及糖尿病条件下小鼠眼表组织的ACE2基因表达变化进行分析,采用独立样本 t检验对数据进行统计学分析。对数据库中人角膜和结膜组织两种基因表达分析,采用Mann-Whitney U检验进行统计学分析。 结果:在小鼠6种眼部组织中,结膜ACE2基因和TMPRSS2基因表达量最高,但均低于肾脏和肺脏;ACE2和TMPRSS2蛋白阳性染色集中于结膜上皮、角膜上皮和泪腺腺泡。ACE2基因的表达具有性别差异,在雌性小鼠结膜和角膜的表达显著低于雄性小鼠,分别为雄性相应组织的43% ( t=3.269, P=0.031)和63% ( t=4.080, P=0.015);糖尿病小鼠结膜和泪腺中的ACE2基因表达略高于非糖尿病小鼠,分别为1.21倍和1.10倍 ( P>0.05);不同年龄小鼠ACE2基因表达差异无统计学意义。与小鼠相似,人结膜ACE2和TMPRSS2基因表达量显著高于角膜( P=0.007),分别约为角膜上皮基因表达量的5.74倍和12.84倍。 结论:结膜中ACE2和TMPRSS2的表达在6种检测的眼部组织中最高,提示结膜是新型冠状病毒眼部感染的主要靶组织。 (中华眼科杂志,2020,56:438-446)
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编辑人员丨5天前
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AMPK/p38 MAPK/Nrf2信号通路在糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用
编辑人员丨5天前
目的:评价一磷酸腺苷依赖的蛋白激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶/核因子E2相关因子2(AMPK/p38 MAPK/Nrf2)信号通路在糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法:清洁级健康SD雄性大鼠,2~3月龄,体重220~280 g,高脂饲料喂养,腹腔注射1%链脲佐菌素50 mg/kg,连续4 d,制备糖尿病模型。取糖尿病模型制备成功的大鼠30只,按随机数字表法分为3组( n=10):假手术组(Sham组)、心肌缺血再灌注组(I/R组)和AMPK抑制剂Compound C+心肌缺血再灌注组(C+I/R组)。采用结扎左冠状动脉前降支30 min、再灌注120 min的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型。C+I/R组于缺血前30 min时尾静脉注射Compound C 0.5 mg/kg,Sham组和I/R组尾静脉注射等量生理盐水。再灌注120 min时计算心肌梗死面积百分比,采用ELISA法测定血清CK-MB、LDH浓度,采用ELISA法测定心肌组织谷胱甘肽(GSH)、SOD、ROS水平,采用Western blot法测定心肌组织AMPK、磷酸化AMPK(p-AMPK)、p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)、Nrf2、血红素氧合酶1(HO-1)的表达。 结果:与Sham组比较,I/R组心肌梗死面积百分比、血清CK-MB、LDH水平升高,心肌组织GSH和SOD水平降低,ROS水平增加,AMPK、p-AMPK、p-p38 MAPK、Nrf2、HO-1表达上调( P<0.05);与I/R组比较,C+I/R组心肌梗死面积百分比、血清CK-MB、LDH水平升高,心肌组织GSH和SOD水平降低,ROS水平增加,AMPK、Nrf2、HO-1表达下调( P<0.05)。 结论:AMPK/p38 MAPK/Nrf2信号通路参与了糖尿病大鼠心肌缺血再灌注时内源性抗氧化应激机制。
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编辑人员丨5天前
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DCN、HtrA1及VEGFR-2在子痫前期患者血清及胎盘组织中的表达及其意义
编辑人员丨2023/8/6
[目的]探讨核心蛋白多糖(DCN)、丝氨酸蛋白酶(HtrA1)及血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2)在子痫前期孕妇血清、胎盘组织中的表达及其意义.[方法]选择同期住院的正常对照组孕妇25例,轻度子痫前期孕妇25例,重度子痫前期孕妇25例,采用酶联免疫吸附法(ELISA)及免疫组化SP法检测DCN、HtrA1及VEGFR-2在血清中的浓度及胎盘组织中的表达情况并比较.[结果]正常对照组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组血清中DCN水平、HtrA1水平、VEGFR-2水平均随着病情的加重依次增高(P<0.05),且组间比较差异有统计学意义(P<0.05).DCN、HtrA1、VEGFR-2在正常对照组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组胎盘组织中的表达也依次增高,差异有统计学意义(H=25.029,P=0.000;H=24.815,P=0.000;H=24.515,P=0.000);且表达强度与疾病程度呈正相关(r =0.517,P=0.000;r =0.511,P=0.000;r =0.513,P=0.000).[结论]DCN、HtrA1及VEGFR-2在子痫前期患者血清及胎盘组织中的表达随病情加重显著增强,其可能共同参与子痫前期的发病机制.
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编辑人员丨2023/8/6
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伴皮质下梗死和白质脑病的常染色体隐性遗传脑动脉病
编辑人员丨2023/8/6
脑小血管病是以卒中和认知损害为主要临床特征的一组异质性疾病,可分为散发型和遗传型.伴皮质下梗死和白质脑病的常染色体隐性遗传性脑动脉病(cerebral autosomal recessive arteriopathy with subcortical infarcts and leukoencephalopathy,CARASIL)属于遗传型脑小血管病,在中国、日本、西班牙、希腊等地均有报道,诊断主要依靠特征性临床症状、影像学特征和基因检测.CARASIL在MRI上表现为弥漫性白质异常信号和皮质下多发性梗死,为HTRA1基因突变所致.
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编辑人员丨2023/8/6
