目的:观察沉默中介体复合物亚基19(Med19)基因对人前列腺癌PC3细胞裸鼠体内增殖、生长作用的影响，探讨其机制。方法:采用针对Med19的小干扰RNA(siRNA)慢病毒载体转染PC3细胞，3 d后，应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测Med19-siRNA转染组(siRNA)与对照组(scRNA)Med19基因和蛋白表达，噻唑蓝(MTT)实验评估肿瘤细胞增殖和生长能力，Western blot检测肿瘤细胞中p27、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)的表达。构建经慢病毒转染的PC3裸鼠模型，测量移植瘤的大小和增殖、凋亡指数。结果:Med19-siRNA慢病毒感染PC3细胞后，转染组Med19 mRNA[表达率为(16.88±3.40)%]和蛋白表达与对照组比较明显降低，差异有统计学意义( t＝9.089， P<0.01)；MTT实验表明转染组细胞增殖较对照组缓慢( t＝10.492， P<0.01)；在PC3-Med19-si细胞中，p-Akt和p-PI3K的表达降低，而p27的表达升高；转染组裸鼠移植瘤的重量和增殖指数均低于对照组，差异有统计学意义[(0.17±0.08) g比(0.39±0.19) g， t＝2.488， P<0.05；(18.30±6.55)%比(33.22±4.36)%， t＝3.792， P<0.01)。两组中的细胞凋亡指数差异无统计学意义( t＝0.184， P>0.05)。 结论:沉默Med19基因后，通过调节p27、p-Akt、p-PI3K的表达来抑制前列腺癌PC3的生长，导致前列腺癌在增殖、生长能力均受到显著抑制。

目的 观察中介体复合物亚基19(Med 19)基因沉默对人前列腺癌LNCaP细胞增殖、生长作用的影响,探讨其机制.方法 采用针对Med 19的小干扰RNA(siRNA)慢病毒载体转染LNCaP细胞,应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测Med 19-siRNA转染组(siRNA)与对照组(scRNA) Med 19基因和蛋白表达情况,噻唑蓝(MTT)实验、软琼脂实验评估肿瘤细胞增殖和生长能力,流式细胞仪分析细胞周期的变化.计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示.组间比较采用双侧t检验.结果 Med 19-siRNA慢病毒感染LNCaP细胞后,转染组Med19 mRNA和蛋白表达与对照组比较明显降低,差异有统计学意义(t=-69.141,P＜0.01);MTT实验表明转染组细胞增殖较对照组缓慢(t=-11.948,P＜0.01);软琼脂实验中转染组集落数量为(8.61±0.51)个,较对照组[(18.89±0.82)个]显著减少,差异有统计学意义(t=-98.775,P＜0.01);转染组G0/G1期细胞比例为(67.29±1.70)％,与对照组[(56.23±1.46)％]比较差异有统计学意义(t=-21.906,P＜0.01).结论 沉默Med 19基因后,促使人前列腺癌LNCaP细胞停留在G0/G1期增多,导致前列腺癌在增殖、生长能力均受到显著抑制.

目的 探讨中介体复合物亚基19(Med19)对人前列腺癌PC3细胞侵袭迁移能力的影响及其在上皮-间充质(EMT)转化过程中的机制.方法 采用针对Med19的siRNA慢病毒载体感染PC3细胞,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹方法(Western印迹)检测Med19-siRNA感染组(siRNA)与空载组(scRNA)Medl9基因表达情况;采用Boyden小室侵袭实验、划痕实验检测感染后PC3细胞侵袭、迁移能力变化;采用qRT-PCR检测感染后PC3细胞上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、增强子结合蛋白-2(ZEB2)、转录因子Snail-1和Snail-2 mRNA的表达.结果 Medl9-siRNA慢病毒感染PC3细胞后,实验组Medl9 mRNA及蛋白表达水平(16.9±3.4)％比空载组近100％明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),Boyden小室侵袭实验和划痕实验显示感染组细胞侵袭、迁移能力明显减弱(P<0.01),感染组N-Cadherin、Vimentin、ZEB2、Snail-1和Snail-2表达降低,E-Cadherin表达升高,差异有统计学意义(P<0.01).结论 沉默Med 19基因可通过抑制EMT中的相关基因,降低人前列腺癌PC3细胞的侵袭转移能力.

中介体复合物(mediator complex subunit,MED)是广泛存在于酵母和哺乳动物体内的一种高度保守的多蛋白体复合物,参与转录因子与RNA聚合酶Ⅱ(RNA polymerase Ⅱ,RNA pol-Ⅱ)间的信息传递过程.MED19作为人中介体复合物的亚基之一,与人生长发育,尤其是肿瘤发生发展密切相关.本文对人MED19基因的结构和生物学功能研究进展进行综述,为后续MED19研究提供依据与思路.