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五步蛇毒蛋白C激活物对人脐静脉血管内皮细胞组织因子表达的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的 观察五步蛇毒蛋白C激活物(PCA)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的保护作用,并分析其对组织因子(TF)表达的影响.方法 常规培养HUVEC,实验分为空白对照组、脂多糖(LPS)组、PCA(0.625、1.25、2.50 μg ·mL-1)组和PCA+LPS组.MTT法检测HUVEC活性,ELISA检测HUVEC培养上清中TF分泌量,免疫荧光染色检测核转录因子(NF)-κB是否被激活-核转运.结果PCA对HUVEC活性和形态无显著影响(P＞0.05).与空白对照组,LPS组细胞活性显著下降(P＜0.01);而LPS+PCA组细胞活性显著高于LPS组(P＜0.05).LPS组TF表达量和NF-κB表达均显著高于空白对照组(P＜0.01);LPS +PCA组与LPS组比较TF表达量和NF-κB表达降低(P＜0.01).结论 PCA可降低HUVEC分泌TF,减少LPS对HUVEC的损伤作用,其可能与抑制NF-κB通路的活化有关.
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编辑人员丨2023/8/6
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五步蛇毒蛋白C激活剂在脓毒症大鼠早期适应性免疫应答中的作用
编辑人员丨2023/8/5
目的 探讨五步蛇毒蛋白C激活剂(PCA)在脓毒症大鼠早期适应性免疫应答中的作用.方法 采用SPF级SD大鼠78只,用随机数字表法分组:对照组(n=6,腹腔注射生理盐水);通过腹腔注射脂多糖(LPS 10 mg/kg)复制脓毒症大鼠模型,模型组以LPS注射后4、6、8、12、16、24 h时的标本采集时间分为6组,6只/组;余36只大鼠于LPS注射30 min后使用药物干预,分为1-磷酸鞘氨醇受体1(S1PR1)激动剂SEW2871干预组(0.5 mg/kg,腹腔注射)和PCA干预组(0.1 mg/kg,腹腔注射),各干预组以LPS注射后6、12、24 h时的标本采集时间分为3组,每组6只.采用ELISA法检测血浆IL-4、S1P、IL-12和IFN-γ水平,应用免疫荧光法检测肠系膜淋巴结S1PR1和CD103表达的变化.结果 与对照组比较,脓毒症大鼠在注射LPS后的24 h内,血浆S1P、IL-12、IL-4和IFN-γ水平明显增高(P<0.05),LPS注射后6 h内IFN-γ/IL-4比值逐渐增高,之后逐渐降低;肠系膜淋巴结中S1PR1和CD103的表达明显增高(P<0.05).SEW2871明显增加血浆S1P、IL-12和IFN-γ的浓度,降低血浆IL-4水平(P<0.05),且明显减少淋巴结中S1PR1和CD103的表达(P<0.05).蛇毒PCA干预后,血浆IL-4水平明显增高,淋巴结S1PR1表达显著增多(P<0.05).结论 五步蛇毒PCA对维持脓毒症早期机体炎症和免疫反应的平衡具有调节作用,其机制可能与S1P-S1PR1通路有关.
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编辑人员丨2023/8/5
