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基于P38 MAPK/ERK自噬通路探讨五眼果水提物对草酸钙晶体致HKC细胞损伤的抑制作用
编辑人员丨2024/4/27
目的 基于P38 MAPK/ERK通路探讨五眼果水提物抑制一水合草酸钙(COM)晶体致HKC细胞损伤的作用机制.方法 将HKC细胞分为正常组、模型组和五眼果水提物高、中、低剂量组(160、80、40 μg/mL),除正常组外其余各组用 100 μg/mL COM晶体构建HKC细胞损伤模型,药物组同时给予相应质量浓度药物.采用MTT法检测细胞存活率,微板法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和粘附在细胞表面钙离子(Ca2+)水平,自噬双标腺病毒(mRFP-GFP-LC3)结合激光共聚焦显微镜检测自噬流,Western blot 法检测细胞 LC3B、Beclin1、P62、mTOR、p-mTOR、ERK1/2、p-ERK1/2、P38 和p-P38 蛋白表达.结果 与模型组比较,五眼果水提物组细胞存活率升高(P＜0.05),细胞上清液LDH活性和粘附在细胞表面Ca2+水平降低(P＜0.05),细胞自噬体和自噬溶酶体形成减少(P＜0.05),p-ERK1/2/ERK1/2、LC3BⅡ/LC3BⅠ和 Beclin-1 蛋白表达降低(P＜0.05),P62、p-P38/P38 和 p-mTOR/mTOR蛋白表达无明显变化(P＞0.05).结论 五眼果水提物通过调控 P38 MAPK/ERK信号通路抑制自噬,降低COM晶体与细胞的黏附性,从而减轻草酸钙晶体对肾小管上皮细胞的损伤.
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编辑人员丨2024/4/27
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五眼果水提物激活自噬预防小鼠肾结石形成的研究
编辑人员丨2023/8/5
目的 探讨五眼果水提物对肾结石模型小鼠的影响及其初步机制研究.方法 雄性KM小鼠随机分为六个组:正常组、模型组、阳性组(枸橼酸钾1.75g/kg),五眼果高、中、低剂量组(40、20、10g生药/kg),每组10只.各给药组按20 mL/kg灌胃给予相应的药物,连续30d,正常组和模型组灌胃给予等量生理盐水.于第21天开始,除正常组外其余各组均腹腔注射乙醛酸(10 mg/mL)诱导肾结石模型,连续10 d.于第30天收集各组小鼠24 h尿液检测Ox和Ca2+,次日取血检测血清肌酐、尿素氮和Ca2+,剖取肾脏,一侧肾脏采用Western blot检测自噬相关蛋白Beclin-1、LC3B、P62和肾损伤分子(KIM-1)的表达水平;另一侧肾脏用多聚甲醛固定,通过HE染色观察肾脏结晶沉积和肾组织病理学改变.结果 与模型组相比,五眼果水提物可明显降低尿钙水平(P＜0.05),促进尿草酸排泄(P＜0.05),明显降低血清肌酐和尿素氮水平(P＜0.05),对血清Ca2+水平无明显影响(P＞0.05).HE染色观察结果显示五眼果水提物可明显减轻小鼠肾小管扩张和肾小管变性坏死程度,减少纤维组织增生及结晶沉积.五眼果水提物可使LC3BII/LC3BI表达水平明显升高(P＜0.05),KIM-1表达水平明显降低(P＜0.05).结论 五眼果水提物可通过激活自噬,减轻肾损伤,防止肾结石的形成.
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编辑人员丨2023/8/5
