目的:探讨低分子肝素(LMWH)对氧糖剥夺(OGD)诱导的PC12细胞炎症反应的影响及相关机制。方法:体外培养神经细胞株PC12，随机分为Sham(对照)组、OGD组、LMWH组及阻断剂组，其中阻断剂组又分为：Eritoran+OGD组、LMWH+Eritoran+OGD组、ST2825+OGD组、LMWH+ST2825+OGD组、吡咯烷二硫代氨基甲酸铵(PDTC)+OGD组及LMWH+PDTC+OGD组；建立OGD细胞模型，应用CCK-8法检测细胞活力，应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测Toll样受体4(TLR4)、MyD88和核因子κB(NF-κB)的mRNA和蛋白表达情况，ELISA法检测IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和S100β的浓度变化。结果:OGD组第1、2、3天的细胞活性较Sham组明显降低( P<0.05)，LMWH处理后，可显著提高PC12细胞OGD后第2、3天的细胞活性( P<0.05)，但较Sham组低。与Sham组相比，OGD组中TLR4、MyD88及NF-κB的mRNA表达量明显升高( F＝144.9，710.5，79.51， P<0.01)，当用LMWH处理后三种物质mRNA表达量下降，与OGD组比较差异均有统计学意义( P<0.01)，且TLR4/MyD88/NF-κB通路的特异性阻断剂Eritoran、ST2825、PDTC均可强化LMWH的抗炎作用。TLR4、MyD88及NF-κB的蛋白表达量同基因相一致。OGD组IL-1β、IL-6、TNF-α和S100β的表达显著高于Sham组( P<0.05)；LMWH组其表达被抑制，与OGD组比较差异均有统计学意义( P<0.05)，应用Eritoran、ST2825和PDTC分别阻断TLR4、MyD88和NF-κB，炎症因子和S100β的浓度明显降低，但仍高于Sham组( P<0.05)。 结论:OGD会导致PC12细胞病理性损伤，S100β含量增多，炎症反应加重；应用LMWH可以改善细胞活性，下调炎症反应程度，对细胞有保护作用，同时使用TLR4/MyD88/NF-κB通路各个环节的抑制剂后，OGD上调炎症因子的作用皆被不同程度地抑制，提示LMWH可能通过TLR4/MyD88/NF-κB通路调节OGD诱导的PC12细胞的炎症反应。

目的 分析鉴定柴胡水提物中的化学成分,探究柴胡抗抑郁活性成分.方法 利用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)分析鉴定柴胡水提物中的化学成分.采用皮质酮(CORT)诱导低分化PC12抑郁细胞模型,给予柴胡单体成分预处理PC12细胞24 h,利用CCK-8试剂盒检测细胞活力;利用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞LDH释放率.结果 共鉴定出53个化学成分,主要为Ⅰ型、Ⅱ型及Ⅲ型柴胡皂苷类成分.其中,柴胡皂苷A、柴胡皂苷B2、柴胡皂苷C、柴胡皂苷E、柴胡皂苷F和6″-O-乙酰基柴胡皂苷A对柴胡代谢轮廓的贡献度最大,并可增强CORT诱导PC12细胞活力(P<0.05、P<0.01);柴胡皂苷A、柴胡皂苷B2、柴胡皂苷C、柴胡皂苷E、柴胡皂苷F可降低CORT诱导PC12细胞LDH释放率(P<0.05、P<0.01).结论 柴胡皂苷A、柴胡皂苷B2、柴胡皂苷C、柴胡皂苷E、柴胡皂苷F可能为柴胡抗抑郁的主要活性成分,为柴胡质量控制及药效物质基础研究提供依据.

目的:探讨低分子肝素(LMWH)联合小剂量阿司匹林对原因不明复发性流产(URSA)患者血栓前状态(PTS)及免疫功能的影响.方法:选择2016年1月-2017年1月本院就诊的早孕期URSA患者102例,采用随机数字表法分为观察组与对照组各51例.对照组应用小剂量阿司匹林治疗,观察组在对照组基础上加用LMWH.比较两组妊娠结局、不良反应发生情况,治疗前后测定PTS相关指标[D-二聚体(DD)、抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)活性、蛋白C(PC)活性、蛋白S(PS)活性、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活抑制剂-1(PAI-1)]、免疫功能相关指标[白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-10(IL-10)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)],并与同期51例健康早孕孕妇(正常组)比较.结果:观察组外周血DD、t-PA、PAI-1、IL-17、IL-6、IFN-γ均高于正常组,AT-Ⅲ、PC、PS活性、TGF-β、IL-10、IL-4均低于正常组(P＜0.05).与治疗前相比,两组孕12周、20周末外周血DD、t-PA、PAI-1、IL-17、IL-6、IFN-γ均显著降低,AT-Ⅲ、PC、PS活性、TGF-β、IL-10、IL-4均显著升高(P＜0.05),且观察组DD、PAI-1、IL-17、IL-6、IFN-γ低于对照组,AT-Ⅲ、PC、PS活性、TGF-β、IL-10、IL-4高于对照组(P＜0.05).观察组保胎成功率(88.2％)高于对照组(70.6％)(P＜0.05).两组妊娠期并发症发生率及不良反应率比较未见差异(P＞0.05).结论:LMWH联合小剂量阿司匹林治疗URSA安全有效,可提高活产率,且不增加妊娠期并发症及不良反应发生率,可能与改善PTS及免疫功能紊乱有关.

目的 探讨复方柴归方(逍遥散化裁方,FFCGF)对皮质酮诱导的低分化PC12抑郁细胞模型的保护作用及其相关机制.方法 采用皮质酮(CORT)诱导低分化PC12抑郁细胞模型,给予不同浓度(50、100、200 μg· mL-1) FFCGF预处理PC12细胞36 h,MTT检测细胞活力,观察FFCGF对CORT(500 μM)细胞损伤后的保护作用;检测细胞培养上清液中的LDH活性,判断药物对细胞膜的保护作用;使用Annexin V-FITC/PI双染色法检测药物对CORT诱导的PC12细胞凋亡的保护作用;检测线粒体膜电位以及细胞内钙离子含量,观察FFCGF的保护作用.结果 研究表明皮质酮诱导PC12细胞损伤以后,细胞的活力的指标下降,而乳酸脱氢酶释放率、细胞凋亡率及钙离子浓度指标升高.给予FFCGF后对应的指标发生回调,表明FFCGF对CORT诱导低分化PC12细胞损伤具有较好的保护作用.结论 FFCGF对CORT诱导的低分化PC12抑郁细胞模型具有较好的保护作用.

目的:本研究旨在运用转录组学技术探讨复方柴归方对皮质酮(CORT)致低分化PC12细胞神经元保护作用机制.方法:通过给予复方柴归方对CORT诱导低分化PC12细胞模型进行干预,采用转录组测序技术对正常对照组、模型对照组和复方柴归方100 mg/L组PC12细胞的基因进行测序分析获得差异表达基因,并对差异基因进行功能注释及蛋白相互作用网络分析.结果:与模型对照组/正常对照组鉴定出的差异基因比较,发现复方柴归方回调的差异基因有91个,其中上调基因74 个,Prkaa2、Pdg-fra、Adam10、Sesn3、Phip、Ep300、Ank2等基因;下调基因 17个,Rps19、Ppp1r15a、Trib3、Gadd45b、Rps28、Ddit3、Gadd45g、Mt1、Gdf15、Mt2A等基因.这些基因富集显著回调通路有30条,涉及有信号转导中的PI3K-AKT、FoxO、MAPK、mTOR信号通路等;细胞通讯中的紧密连接、间隙连接等;细胞生长与死亡中的细胞凋亡、p53信号通路、细胞周期等;环境适应性中的昼夜节律等.结论:复方柴归方的神经元保护机制可能与调控PI3K-AKT等信号通路中相关基因表达水平关系密切,可为进一步研究复方柴归方及其中药新制剂"柴归颗粒"的抗抑郁作用机制奠定基础.

目的 探讨局部枸橼酸钠抗凝对连续性肾脏替代治疗(continuous renal replace-ment therapy,CRRT)的重症急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)患者炎症状态的影响.方法 随机抽取我院重症监护病房(intensive care unit,ICU)2018年1月至2019年12月行CRRT治疗的A K I患者枸橼酸钠组(有出血倾向或外科围手术期)和低分子肝素组(无出血倾向)各50例.枸橼酸钠组给予枸橼酸钠抗凝.低分子肝素组给予低分子肝素抗凝.比较两组治疗前后肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、降钙素原(procalci-tonin,PCT)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、白细胞计数(white blood cell,WBC)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophils lymphocytes ratio,NLR)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、凝血酶时间(throm-bin tim e,T T)、血清总钙、血镁、血磷、临床疗效.结果 共100例/207台次纳入本研究,枸橼酸钠组50例/103台次,低分子肝素钠组50例/104台次.治疗后,枸橼酸钠组患者T N F-a、IL-6、PCT下降幅度显著高于低分子肝素组,差异均有统计学意义(P<0.05),且治疗时间越长,下降幅度越大;透析时长>24 h时枸橼酸钠组患者NLR下降幅度显著高于低分子肝素组,差异有统计学意义(P<0.05).针对明确合并重症感染AKI的这部分患者进一步进行亚组分析,与低分子肝素组相比,枸橼酸钠组在透析6 h、12 h、24 h后,T N F-a、IL-6、PC T明显下降,且治疗时长越长,下降幅度越大,差异均有统计学意义(P<0.05).透析24 h后WBC下降幅度和12 h、24 h后NLR下降幅度两组差异均有统计学意义(P<0.05),且枸橼酸钠组下降幅度比低分子肝素组大;透析时长>24 h时血磷、血镁、血清总钙下降幅度两组差异有统计学意义(P<0.05),血磷与血镁在枸橼酸钠组下降幅度较大,而血清总钙在低分子肝素组下降幅度较大.透析时长6～12 h时,枸橼酸钠组患者APTT、TT延长幅度比低分子肝素组小,差异有统计学意义(P<0.05).两组治疗后,死亡患者比例、肾功能恢复比例、肾功能未恢复比例、持续透析患者比例差异均无统计学意义(P>0.05).结论 对行连续性肾脏替代治疗的重症AKI患者采用局部枸橼酸钠抗凝不仅安全,而且可以减轻患者体内炎症状态.

目的 探讨葛根素对缺氧诱导的大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞PC12细胞神经损伤及c-Jun氨基末端激酶(JNK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响.方法 体外培养PC12细胞,50 ng/ml神经生长因子(NGF)诱导分化,对高分化的PC12细胞进行缺氧处理,再对缺氧诱导的PC12细胞进行不同浓度(0.1、1.0、10.0μmol/L)葛根素处理,将细胞分为对照组,缺氧组,0.1、1.0、10.0μmol/L葛根素组,葛根素+JNK通路激活剂茴香霉素(AC)组.四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞活力;流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法检测各组PC12细胞活性氧(ROS)水平;试剂盒检测各组细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;Western印迹检测各组凋亡蛋白JNK/MAPK信号通路相关蛋白表达情况.结果 低分化PC12细胞多呈椭圆形,聚集成小团簇状;高分化PC12细胞长出类似神经元样突起,培养一段时间后,细胞体积增大突起增多增长,形成网络.与对照组比较,缺氧组PC12细胞活力、SOD水平显著降低,细胞凋亡率、细胞内ROS含量、MDA水平及蛋白p-JNK、caspase-3表达显著升高(P<0.05);与缺氧组比较,0.1、1.0、10.0μmol/L葛根素组PC12细胞活力、SOD水平显著升高,细胞凋亡率、细胞内ROS含量、MDA水平及蛋白p-JNK、caspase-3表达显著降低,且呈剂量依赖性(P<0.05);与10.0μmol/L葛根素处理组比较,葛根素+AC组细胞活力、SOD水平显著降低,细胞凋亡率、细胞内ROS含量、MDA水平及蛋白p-JNK、caspase-3表达显著升高(P<0.05).结论 葛根素能够保护缺氧诱导的PC12细胞神经损伤,可能与抑制JNK/MAPK通路的激活有关.