目的:研究健脾清化方对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）模型小鼠肝细胞凋亡的影响，探讨其作用机制。方法:选择29只C57小鼠予60%高脂饲料喂养16周，制备NAFLD模型，另设6只小鼠为正常组，予普通饲料喂养。造模成功后，选择体重较大的12只小鼠按随机数字表法分为中药组和模型组，同时继续喂养高脂饲料。中药组灌胃健脾清化方20.961 g/kg，正常组和模型组灌胃等体积的蒸馏水，1次/d，连续干预4周。采用ELISA法检测血清GOT、GPT水平，油红O染色检测肝组织脂质沉积情况，TUNEL荧光染色检测肝细胞凋亡情况，采用Western blot检测肝组织cleaved Caspase-3、Caspase-3、Bax、Bcl-2及JNK、p-JNK蛋白表达。结果:与模型组比较，中药组小鼠体重降低（ P<0.05），血清GPT水平降低（ P<0.05），肝组织脂质沉积及凋亡细胞减少，肝组织cleaved Caspase-3/Caspase-3比值、p-JNK/JNK比值及Bax蛋白表达降低（ P<0.05），Bcl-2蛋白表达升高（ P<0.05）。 结论:健脾清化方可抑制JNK蛋白磷酸化，减少NAFLD小鼠肝细胞凋亡，从而可能延缓NAFLD向肝硬化和肝癌的发展进程。

目的:基于胰岛素抵抗时磷酸化叉头框蛋白O1（pFoxO1）介导的肌肉环指蛋白（MuRF）骨骼肌蛋白降解途径，探讨胰岛素抵抗时骨骼肌蛋白含量变化及健脾清化方的作用。方法:采用高脂饲料喂养c57小鼠制备肥胖伴胰岛素抵抗模型。将成模小鼠按随机数字表法分为模型组、健脾清化方组、二甲双胍组，每组10只。健脾清化方组灌胃健脾清化方水煎液20.961 g生药/kg，二甲双胍组灌胃二甲双胍混悬液18.498 g/kg，模型组灌胃等体积的生理盐水，1次/d，连续给药4周。分别于造模后及给药后进行腹腔葡萄糖耐量试验（IPGTT），采用Western blot法检测pFoxO1、FoxO1、MuRF、肌生成促进因子1（MyoD）、肌球蛋白（myosin）相对表达，采用免疫组化染色法检测MyoD、myosin的定位和表达情况。结果:与模型组比较，健脾清化方组小鼠糖耐量试验中0、60、120 min血糖降低（ P<0.05）；健脾清化方组和二甲双胍组pFoxO1/FoxO1蛋白表达比值［（0.27±0.07）、（0.24±0.14）比（0.05±0.03）］升高（ P<0.05），MuRF蛋白相对表达［（1.22±0.42）、（1.15±0.32）比（3.21±0.35）］降低（ P<0.05），健脾清化方组MyoD［（1.42±0.45）比（0.4±0.11）］、myosin［（0.80±0.11）比（0.51±0.08）］蛋白相对表达升高（ P<0.05）；免疫组化染色显示，健脾清化方组MyoD［（5.06±1.72）比（2.28±0.83）］和myosin［（60.28±7.47）比（39.77±3.34）］表达升高（ P<0.05）。 结论:健脾清化方可有效提高肥胖伴胰岛素抵抗模型小鼠骨骼肌蛋白含量，其机制可能与促进骨骼肌FoxO1磷酸化，抑制骨骼肌蛋白MuRF降解途径有关。

目的:观察健脾清化方对高脂饮食诱导的肥胖模型小鼠(DIO)胰岛素敏感性的影响,并基于骨骼肌线粒体动力学讨论其作用机制.方法:将30只小鼠随机分为正常组(NOR组,n=6)和模型对照组(n=24),NOR组小鼠予正常饲料喂养.MOD组小鼠利用高脂饲料诱导建立C57BL/6J肥胖模型.将18只造模成功小鼠随机分为模型组(MOD组)、健脾清化方组(JPQH组)、二甲双胍组(MET组),每组6只,分别予生理盐水、健脾清化方(1.3g/mL)、二甲双胍(30mg/mL)进行干预.干预6周后,称量小鼠体质量,检测空腹胰岛素(FINS)、胰岛素敏感性、葡萄糖耐量,反转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测小鼠骨骼肌有丝分裂融合蛋白1(Mfn1)mRNA、有丝分裂融合蛋白2(Mfn2)mRNA、视神经萎缩蛋白1(Opa1)mRNA、动力相关蛋白1(Drp1)mRNA、线粒体分裂蛋白1(Fis1)mRNA表达水平,蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测Mfn1、Mfn2、Opa1、Fis1、Drp1、肌球蛋白重链(MYH)蛋白表达水平.结果:干预1周后,JPQH组小鼠体质量低于MOD组(P＜0.05);干预2、3、4、5、6周后,JPQH组小鼠体质量与MOD组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);干预2、3、4、5、6周后,MET组小鼠体质量低于MOD组(P＜0.05);干预1周后,MET组小鼠体质量与MOD组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).JPQH组小鼠FINS水平低于MOD组(P＜0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).IPITT试验中,JPQH组小鼠各时间点血糖水平均低于MOD组(P＜0.05);JPQH组小鼠0 min血糖水平高于MET组(P＜0.05);JPQH组小鼠30、60、90、120 min血糖水平与MET组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);JPQH组曲线下面积AUC低于MOD组(P＜0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).OGTT试验中,JPQH组小鼠0min血糖水平与MOD组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),JPQH组小鼠30、60、90、120 min血糖水平均低于MOD组(P＜0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);JPQH组曲线下AUC低于MOD组(P＜0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).JPQH组小鼠Mfn1 mRNA相对表达量低于MOD组(P＜0.05),高于MET组(P＜0.05);JPQH组小鼠Mfn2 mRNA相对表达量高于MOD组、MET组(P＜0.05);JPQH组小鼠Opa1 mRNA相对表达量低于MOD组(P＜0.05),高于MET组(P＜0.05);JPQH组小鼠Fis1 mRNA相对表达量高于MOD组(P＜0.05),低于MET组(P＜0.05);JPQH组小鼠Drp1 mRNA相对表达量与MOD组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).JPQH组小鼠Mfn1、Mfn2蛋白相对表达量高于MOD组、MET组(P＜0.05);JPQH组小鼠Opa1、Fis1蛋白相对表达量低于MOD组、MET组(P＜0.05);JPQH组小鼠Drp1蛋白相对表达量与MOD组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);JPQH组小鼠MYH蛋白相对表达量低于MOD组(P＜0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:健脾清化方可以降低高脂饮食诱导的肥胖小鼠体质量,改善小鼠的胰岛素敏感性,降低胰岛素抵抗;健脾清化方可能通过影响骨骼肌线粒体动力学进而改善骨骼肌胰岛素抵抗,以稳定血糖.

目的 探讨健脾清化方对高脂饮食诱导的肥胖小鼠胸主动脉内皮的保护作用及可能机制.方法 采用高脂饲料喂养C57BL/6小鼠12周诱导肥胖小鼠模型,将小鼠分为模型组、健脾清化方组和盐酸二甲双胍组,以正常喂养小鼠作为正常组,每组6只.给药6周后,HE染色观察小鼠胸主动脉内皮结构变化,Masson染色观察胸主动脉纤维化改变,透射电镜观察胸主动脉内皮细胞超微结构,免疫组化检测胸主动脉血小板内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1/CD31)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)表达.结果 与正常组比较,模型组小鼠胸主动脉局部内皮细胞脱落,内膜层增厚,有泡沫样细胞聚集,局部管壁平滑肌和弹力纤维萎缩,平滑肌细胞排列紊乱,胶原纤维增加,CD31表达降低,NLRP3表达显著升高(P＜0.01);与模型组比较,健脾清化方组小鼠胸主动脉内皮结构基本完整,内皮细胞脱落减少,内膜及中膜胶原纤维减少,CD31表达有升高趋势,NLRP3表达显著降低(P＜0.01).结论 健脾清化方可能通过下调NLRP3表达改善肥胖小鼠受损的血管内皮形态和超微结构,改善炎症状态,CD31可能是健脾清化方保护血管内皮结构和通透性的重要靶点.

目的:探讨2型糖尿病患者治疗前后舌诊客观化指标与胰岛素抵抗的关系.方法:纳入2型糖尿病患者50例作为糖尿病患者组(简称“患者组”),同期纳入健康成年人50例作为正常组.患者组给予健脾清化方治疗3个月,采集患者治疗前后的糖脂代谢、胰岛素抵抗指标,包括空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2 h PG)、糖化血清蛋白(GSP)、空腹胰岛素(FIns)、餐后2h胰岛素(2 h Ins)、空腹游离脂肪酸(FFA)、餐后2h游离脂肪酸(2 h FFA)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用TDA-1型小型舌象仪采集患者的舌象参数,正常组于试验开始时统一采集舌象参数,包括舌质参数(zhiCON、zhiASM、zhiENT、zhiMEAN)及舌苔参数(taiCON、taiASM、taiENT、taiMEAN).结果:与治疗前比较,治疗后患者的糖脂代谢指标及胰岛素抵抗指数均呈下降趋势,其中FIns、FFA、2hPG水平与治疗前比较差异具有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).与正常组比较,患者组治疗前的舌质zhiCON与舌苔taiCON值具有显著性差异(P＜0.01);与治疗前比较,治疗后患者组的舌质zhiCON、zhiENT值均降低,差异具有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05),且患者组治疗后的舌象参数更接近正常舌象参数.治疗前的HOMA-IR与舌质参数zhiCON、zhiENT、zhiMEAN呈正相关(P＜0.05),与zhiASM呈负相关(P＜0.05);2 h FFA与zhiENT呈正相关(P＜0.05),与zhiASM呈负相关(P＜0.05).治疗后的HOMA-IR、FIns、FFA与舌苔参数taiCON、taiENT、taiMEAN呈正相关(P＜0.05),与taiASM呈负相关(P＜0.05,P＜0.01);FIns与舌质参数zhiCON、zhiENT呈正相关(P＜0.05),2 h Ins与zhiASM呈负相关(P＜0.05).结论:舌象客观化指标与2型糖尿病患者的胰岛素抵抗可能具有一定的相关性.

目的:探讨健脾清化方对2型糖尿病大鼠肝脏糖异生的影响.方法:取Wistar大鼠,除正常组外,采用高脂喂养联合小剂量链脲左菌素(STZ)腹腔注射诱导2型糖尿病大鼠模型,成模后随机分为模型组、健脾清化方组.健脾清化方组予以含生药15 g-kg-1·d-1的混悬液灌胃,正常组和模型组用同体积双蒸水灌胃.连续灌胃4周后观察各组大鼠葡萄糖耐量和丙酮酸耐量,Western blot法测大鼠肝脏糖异生相关蛋白pFOXO1、FOXO1、PEPCK、G6Pase蛋白的表达,RT-PCR法测大鼠肝脏PEPCK、G6Pase的mRNA表达.结果:腹腔葡萄糖耐量和丙酮酸耐量试验结果显示,与正常组比较,模型组各时间点的血糖和曲线下面积(AUC)显著增加(P＜0.01);与模型组比较,健脾清化方能降低各时间点的血糖和AUC(P＜0.05).肝糖异生相关蛋白及mRNA结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肝脏pFOXO 1/FOXO1蛋白表达的比值显著降低(P＜0.01),G6Pase、PEPCK蛋白及mRNA表达显著增加(P＜0.01);与模型组比较,健脾清化方组大鼠肝脏pFOXO1/FOXO1蛋白表达的比值显著增加(P＜0.01),G6Pase、PEPCK蛋白及mRNA表达降低(P＜0.05).结论:2型糖尿病大鼠肝脏糖异生增加;健脾清化方可通过影响2型糖尿病大鼠肝脏糖异生相关酶的表达,减少其肝脏糖异生,从而降低血糖.

目的:探讨健脾清化方改善2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛素抵抗的作用机制.方法:采用高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)建立稳定的T2DM大鼠模型,连续灌胃给药12周,腹腔胰岛素耐量(IPITT)法观察糖尿病大鼠胰岛素抵抗,双重免疫荧光技术检测肠道Th1和Th17免疫细胞转录因子T-bet和RORα的表达,流式多因子技术检测肠道Th1和Th17细胞型炎症因子.结果:与模型组比较,健脾清化方明显改善2型糖尿病大鼠的胰岛素抵抗水平(P＜0.01),下调糖尿病大鼠肠道Th1和Th17免疫细胞的转录因子T-bet和RORα的表达(P＜0.01),降低肠道Th1和Th17免疫细胞型炎症因子的浓度(P＜0.01).结论:健脾清化方能够改善T2DM大鼠的胰岛素抵抗,其作用机制可能与减少肠道Th1和Th17免疫细胞型转录因子表达及炎症因子浓度有关.

目的:基于“脾主升清”理论观察健脾清化方联合抗菌素治疗慢性尿路感染的疗效.方法:80例慢性尿路感染患者随机分为两组,每组40例,对照组根据药敏选用合适的抗生素治疗,治疗组在对照组基础上加用健脾清化方治疗,疗程6周.观察两组临床疗效和中医证候积分,病原菌清除率,免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平变化.结果:治疗组,对照组总有效率分别为85.0％,77.5％;病原菌清除率为85.0％,70.0％,治疗组临床疗效,病原菌清除率优于对照组(P＜0.05).治疗后治疗组主要症状积分和症状总积分均明显降低,IgA、IgG、IgM水平升高(P＜0.05或P＜0.01),对照组部分主要症状积分和症状总积分亦明显降低,IgM水平升高(P＜0.05或P＜0.01);治疗后组间比较,对照组在降低神疲乏力,小便频数短赤,口苦黏腻,总积分及升高IgA、IgG方面优于对照组(P＜0.05或P＜0.01).结论:健脾清化方联合抗菌素治疗慢性尿路感染具有较好的疗效,并能改善患者的免疫功能.

介绍何立群教授辨治慢性肾脏病策略及用药经验.认为其发生多为风邪、寒邪、水湿、毒邪等外邪和七情、饮食、劳倦等内邪共同作用的结果.治宜活血化瘀,理气补肾通络;疏肝理脾,益气养血解郁;祛邪扶正、补调泻兼顾.解析经验方“抗纤灵方”“抗纤灵二号方”“健脾清化方”.并举验案1则.

目的:观察茯苓健脾清化方治疗因饮酒出现功能性腹泻的临床疗效.方法:50例因饮酒出现功能性腹泻的患者随机分为观察组和对照组.观察组给予茯苓健脾清化方,对照组给予益生菌.比较两组患者改善腹泻的临床疗效、住院费用及不良反应.结果:治疗后观察组每日排便次数显著低于治疗前(P＜0.05),大便性状评分显著高于治疗前(P＜0.05).观察组临床痊愈1例,显效15例,有效5例;对照组显效8例,有效8例;两组疗效比较,差异有统计学意义(P＜0.05).观察组每日费用为5元,对照组为12元,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:茯苓健脾清化方治疗因饮酒出现功能性腹泻疗效确切,且费用低廉.