目的 建立款冬花中毒性成分克氏千里光碱的含有量测定方法,考察蜜炙对其影响.方法 采用高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用技术进行定量分析,比较蜜炙前后款冬花中克氏千里光碱的含有量.结果 所建立的含有量测定方法经方法学验证,并成功应用于款冬花及其蜜炙品中克氏千里光碱含有量的测定;款冬花蜜炙后,克氏千里光碱含有量显著降低.结论 该方法简便快速、准确灵敏,可用于款冬花的质量控制的完善提供参考;蜜炙对款冬花可能具有一定的减毒作用.

目的:建立一种同时测定15个吡咯里西啶生物碱(pyrrolidine alkaloids,PAs)及其氮氧化物的超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC/MS/MS),完成15批不同来源的款冬花样品的含量测定.从而初步了解不同来源款冬花中PAs的分布现状,为药材的安全合理使用提供相关参考.方法:采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(3.0 mm×150 mm,1.8 μm),流动相为含0.05％甲酸和2.5 mmol·L-1甲酸铵的水溶液(A)以及含0.05％甲酸和2.5 mmol·L-1甲酸铵的甲醇(B),梯度洗脱,流速0.4 mL·min-1,进样量2 μL,柱温40℃.采用Agilent 1290-6470 QQQ型超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪,离子化模式为ESI+,多反应监测模式(MRM).利用外标法计算药材样品中所测成分的含量,通过计算不同成分的相对标准偏差(RSD)对样品间的差异进行分析.结果:建立的测定方法灵敏度高,分离度良好,方法学考察结果良好.样品测定结果表明,15批药材均含有PAs及其氮氧化物,且所含PAs种类基本相同.克氏千里光碱(senkirkine)是款冬花中最主要的PAs类成分.药材款冬花中不同PAs的含量与分布有较大差异.结论:款冬花中普遍含有吡咯里西啶生物碱及其氮氧化物,且以具有显著肝毒性的克氏千里光碱为其中最主要种类.针对PAs的含量测定为确保款冬药材的用药安全提供了有效的保证.

目的:通过UPLC-MS/MS法比较款冬花蜜炙前后3个吡咯里西啶生物碱(千里光宁碱、N-氧化千里光宁碱和克氏千里光碱)含量的变化.方法:采用CORTECS UPLC C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.6μm),以含0.05％甲酸和2.5 mmol·L-1甲酸铵的水溶液(A)及含0.05％甲酸和2.5 mmol· L-1甲酸铵的乙腈溶液(B)为流动相,梯度洗脱;电喷雾离子源,正离子多反应模式监测,外标法测定.结果:千里光宁碱、N-氧化千里光宁碱和克氏千里光碱质量浓度在1.025～102.5、0.992～99.2和5.040～504.0 ng· mL-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系(r＞0.9990);平均加样回收率分别为86.5％、92.1％、94.7％,RSD分别为4.1％、3.5％、2.3％.7批款冬花生品中N-氧化千里光宁碱的含量分别为0.942、0.334、0.353、0.536、0.347、0.678、0.552 μg·-11;克氏千里光碱含量分别为44.72、38.62、35.93、45.14、29.57、38.67、42.31μg·-1;千里光宁碱的含量分别0.464、0.115、0.185、0.125、0.468、0.261、0.122 μg·g-1.对应的蜜炙品中N-氧化千里光宁碱含量分别为0.616、0.087、0.237、0.315、0.224、0.553、0.401 μg·g-1;克氏千里光碱含量分别为34.33、29.57、25.01、32.66、20.34、26.45、31.54 μg·g-1;千里光宁碱的含量分别为0.772、0.357、0.314、0.354、0.574、0.379、0.263 μg·g-1.结论:和生品相比,蜜炙后款冬花中N-氧化千里光宁碱和克氏千里光碱呈下降趋势,但千里光宁碱呈上升趋势,N-氧化千里光宁碱部分转化为千里光宁碱.

款冬花是常用中药材之一,除有效成分外,还含有多种吡咯里西啶生物碱类成分,该类成分具有较强的肝毒性,但现行的质量标准中均没有对该类成分的限量控制和风险提示,长期服用该药材,存在较大的用药安全风险.本文对近年来款冬花中吡咯里西啶生物碱的化学成分、毒性研究和质量控制进行综述,以期为该药材的质量评价和用药安全提供参考.

建立同步测定一点红不同部位中N-氧化印美定(ImNO)、N-氧化石松胺(LyNO)、千里光菲灵碱(Sp)、N-氧化千里光菲灵碱(SpNO)、N-氧化千里光宁碱(SnNO)和克氏千里光碱(Sk)等6种吡咯里西啶生物碱的UPLC-MS/MS方法.采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm× 100 mm,1.8 μm),以含0.05％甲酸和2.5 mmol· L-1甲酸铵的水溶液(A)及含0.05％甲酸和2.5mmol·L-1甲酸铵的乙腈溶液(B)为流动相,梯度洗脱;电喷雾离子源,正离子多反应模式监测,外标法测定.定量结果显示,一点红的不同部位中吡咯里西啶生物碱有一定差异,Sk在4个部位均有检出,并且含量大致相等;SnNO也存在于各个部位中,但根中较其他部位明显偏高;Sp和SpN0存在于根和花中,且根中含量高于花中;ImNO和LyNO仅存在叶中,含量较低.所测的6种成分中ImNO、LyNO和SpNO均为首次从该药材中发现并进行了含量测定,丰富了该药材的毒性成分种类,为该药材的质量评价及安全用药提供科学依据.

目的:建立UPLC-MS/MS法测定大蓟中7个吡咯里西啶生物碱(印美定、石松胺、凌德草碱、N-氧化凌德草碱、N-氧化印美定、N-氧化石松胺和克氏千里光碱)的含量,并根据测定结果进行初步的风险评估.方法:采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(100 mm ×2.1 mm,1.8 μm),以含0.05％甲酸和2.5 mmol·L-1甲酸铵的水溶液(A)及含0.05％甲酸和2.5 mmol·L-1甲酸铵的乙腈溶液(B)为流动相,梯度洗脱;电喷雾离子源,正离子多反应模式监测,外标法测定.结果:印美定、石松胺、凌德草碱、N-氧化凌德草碱、N-氧化印美定、N-氧化石松胺和克氏千里光碱质量浓度分别在1.024～102.4、1.032 ～ 103.2、1.016～101.6、1.022～102.2、1.056 ～105.6、0.958 ～ 95.8和0.988～98.8 ng· mL-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系(r ＞0.9990);平均加样回收率分别为89.2％、95.2％、88.6％、92.1％、106.2％、91.5％和93.2％,RSD分别为3.2％、3.5％、3.1％、3.8％、3.2％、3.3％和3.9％.10批大蓟样品中印美定、石松胺、凌德草碱、N-氧化凌德草碱、N-氧化印美定、N-氧化石松胺和克氏千里光碱的含量范围分别为1.36 ～5.32、1.38 ～5.25、1.12 ～5.84、1.69 ～8.52、3.03 ～25.25、1.25 ～5.96和1.29～4.25 μg·kg-1.结论:本研究所建立的方法可同时测定大蓟中7个主要吡咯里西啶生物碱含量.初步风险评估显示,该药材存在一定的用药安全风险.

目的 对飞扬草中肝毒性吡咯里西啶生物碱的含量进行测定,并根据测定结果进行初步的风险评估.方法 建立液质联用法测定印美定、石松胺、N-氧化印美定、N-氧化石松胺和克氏千里光碱的含量.根据含量测定结果,采用暴露限制(MOE)法进行风险评估.结果 6批飞扬草样品中印美定、石松胺、N-氧化印美定、N-氧化石松胺和克氏千里光碱的含量范围分别为45.62～91.04、10.12～58.26、28.34～85.23、25.34～88.43、19.85～54.43 μg·kg-1.MOE 值为5 228～9 775.结论 本研究所建立的方法为飞扬草中肝毒性吡咯里西啶生物碱的质量控制和安全性评价提供了科学依据.

目的:采用可同时测定32个吡咯里西啶类生物碱(PAs)的液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)对紫草药材及含款冬花和紫草的中成药制剂中的PAs成分进行鉴定和含量分析.方法:药材和中成药制剂经提取后用阳离子交换固相萃取小柱净化富集;富集后的样品采用Phenomenex Prodigy 5μODS3100A色谱柱(150 mm×3.2 mm,5μm)梯度洗脱后,使用电喷雾离子源、正离子多反应监测模式进行检测.结果:14种含款冬花的中成药制剂所含PAs主要为克氏千里光碱,PAs的总检出量为0.059～5.330μg·g-1或μg·mL-1,按药品说明书计算的PAs日摄入量为2.24～95.92μg;紫草药材主要含有蓝蓟定、石松胺、印美定及其氮氧化物等PAs,8批药材的PAs总检出量为0.60～140.69μg·g-1;在10种含紫草的中成药制剂中,PAs日摄入量为0.38～25.20μg.结论:大多数紫草药材PAs含量相对较低,有望通过控制紫草药材中PAs含量,使含紫草的中成药制剂中PAs含量满足欧盟限量要求;而对于含款冬花的中成药制剂中,大多数(8/14)PAs检出量超过了欧盟限量的10倍,提示含款冬花的中成药制剂有必要开展克氏千里光碱的质量控制及其摄入所致的潜在安全风险评价.

目的 采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法对清热散结片和胶囊中的8种吡咯里西啶类生物碱(PAs)进行识别和定量分析.方法 样品经0.1％甲酸水溶液-甲醇(6:4)混合溶液超声提取后,加野百合碱作为内标;以甲醇与含0.1％甲酸和5 mmol·L-1甲酸铵的混合溶液作为流动相,C18柱梯度洗脱,采用电喷雾(ESI)离子源,动态多反应监测正离子模式分析,内标曲线法定量.结果 8种PAs在1～100 ng·mL-1范围内线性良好,相关系数(r)≥0.999,检出限为0.04～0.39 ng·mL-1,加样回收率在89.9％～107.7％,且RSD1.6％～4.7％,方法学考察结果满意.样品中检出了4种PAs(阿多尼弗林碱、千里光宁、千里光菲林、克氏千里光碱),后3种为该类制剂中首次检出并报道.PAs总检出量为每粒(片)8.48～61.82μg,按说明书服用量计算,日摄入量为96.2～1483.7μg.结论 清热散结片与胶囊中检出多种PAs,且总检出量与算得的日摄入量较高,为降低临床用药风险,有必要对这两种制剂中的PAs进行系统全面的研究.

目的:建立苍术中吡咯里西啶生物碱(PAs)的含量测定方法,考察麸炒前后5个PAs的变化规律.方法:采用UPLC-MS/MS法进行含量测定,采用ACQUITY UPLCHSS T3(150mm×2.1mm,1.8μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1％甲酸溶液(体积比为11∶89),恒流洗脱,流速0.30 mL·min-1,进样体积1 μL;电喷雾离子源,正离子多反应监测模式,以标准曲线法计算含量.结果:3批苍术经过麸炒后,PAs总量从188.74～254.64 μg·kg-1下降到101.74～135.36 μg·kg-1;野百合碱从25.35～52.18μg·kg-1下降到23.25～37.41 μg·kg-1;氮氧化野百合碱从25.12～40.22μg·kg-1下降到6.98～18.23μg·kg-1;克氏千里光碱从 11.64～36.25 μg·kg-1下降到3.64～12.85 μg·kg-1;蓝蓟定从37.52～85.32μg·kg-1下降到32.41～38.25 μg·kg-1;氮氧化蓝蓟定从26.96～74.21 μg·kg-1下降到 11.82～26.37μg·kg-1.结论:该方法可用于苍术中PAs的测定.麸炒后PAs总量和单个含量均有降低,阐明了苍术麸炒解毒的科学内涵.