目的:探讨叶酸偶联量子点（FA-QD）免疫脂质磁珠法检测卵巢上皮性癌循环肿瘤细胞（CTC）的有效性及CTC与患者临床病理特征的相关性。方法:选取2019年8月至2020年1月在山西省人民医院就诊的卵巢上皮性癌患者67例。将卵巢癌SKOV-3细胞分为5个细胞数梯度（0、100、150、200、300个），比较上皮细胞黏附分子（EpCAM）免疫磁珠法（单标法）和FA-QD免疫脂质磁珠法（双标法）对CTC的检出率。应用FA-QD免疫脂质磁珠法检测卵巢癌患者外周血中CTC数量，荧光显微镜下见阳性CTC者即为CTC阳性患者，分析CTC与患者临床病理特征及肿瘤标志物的关系。结果:FA-QD免疫脂质磁珠法对SKOV-3细胞CTC的平均捕获率高于EpCAM免疫磁珠法（83.4%比70.3%）。在67例卵巢癌患者中，Ⅰ~Ⅱ期患者CTC阳性者比例为30.0%（3/10），Ⅲ期为91.9%（34/37），Ⅳ期为95.0%（19/20），差异有统计学意义（ P<0.05）；淋巴结转移患者CTC阳性者比例为97.1%（33/34），高于淋巴结未转移者的69.7%（23/33），差异有统计学意义（ P<0.05）；人附睾蛋白4（HE4）>110 pmol/L患者CTC阳性者比例为58.8%（10/17），低于HE4≤110 pmol/L患者的92.0%（46/50），差异有统计学意义（ P=0.005）；而年龄、绝经情况、病理分化程度、远处转移、癌胚抗原125（CA125）、癌胚抗原199（CA199）、血清癌胚抗原（CEA）分层患者间CTC阳性患者比例差异均无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:FA-QD免疫脂质磁珠法可有效检测卵巢上皮性癌患者外周血CTC。卵巢上皮性癌患者CTC水平与淋巴结转移、临床TNM分期及HE4水平有关。

目的 制备粒径均一、超顺磁性强、性质稳定、免疫活性强并可识别乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞的免疫磁性纳米粒(immunomagnetic nanoparticles,IMNP).方法 多元醇法合成含有活性羧基基团的超顺磁氧化铁纳米粒(superparamagnetic oxide iron nanoparticles containing reactive carboxyl groups,SMNP-COOH),热重分析法测定SMNP-COOH表面羧基含量,邻二氮菲测定铁含量.在1-甲基-3-乙基碳二亚胺(EDC),N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化下,采用碳二亚胺偶联法将鼠抗人乳腺珠蛋白(anti human mammaglobin,anti-hMAM)单克隆抗体共价修饰结合至SMNP-COOH表面合成IMNP.透射电镜(transmission electron microscope,TEM)、X射线衍射仪(X-ray powder diffraction XRD)、振动样品磁强计(vibrating sample magnetometer,VSM)、激光散射粒径电位测定仪和邻二氮菲法测定铁含量等方法分别对SMNP-COOH和IMNP进行表征,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定IMNP表面抗体活力.结果 X-射线粉末衍射检测表明,SMNP-COOH和IMNP两者特征峰与标准Fe3O4的特征峰一致.SMNP-COOH和IMNP的铁含量分别0.205和0.164 mol·L-1;透射电镜检查提示,SMNP-COOH和IMNP均呈球形或椭球形,透射电镜测定粒径为(13.7±3.6)和(15.4±4.5)nm;流体粒径测定结果表明,SMNP-COOH和IMNP强均粒径和多分散系数分别为23.4,71.2 nm,0.303和0.175;磁学性能研究表明,SMNP-COOH和IMNP均具有超顺磁性,抗体结合可以降低SMNP-COOH的磁性,两者质量饱和磁化强度分别为71.37和67.68 emu·g-1 Fe.ELISA法测定IMNP表面的抗体活力表明,IMNP表面结合的抗体量为93 μg·mg-1 IMNP.抗-hMAM抗体修饰的IMNP能与乳腺癌细胞株MDA-MB-415具有强的选择性和特异性.结论 成功合成超顺磁性强,能与乳腺癌细胞株发生特异性结合的免疫磁性纳米粒,可用于免疫磁性分离富集乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTCs),从而为乳腺癌CTCs的特异性检测提供更有利的武器.

目的 研究负载人工抗原递呈细胞(aAPC)的四氧化三铁(Fe3O4)磁性碳纳米粒子(aAPC)对滋养细胞凋亡、侵袭及黏附能力的影响.方法 取早孕流产妇女绒毛,分离、鉴定绒毛膜滋养细胞;将磁化aAPC与原因不明复发性流产(URSA)患者血浆混合,采用磁选柱分离与磁化aAPC结合的CD3+T细胞,采用免疫磁珠分选技术分离CD3+T细胞;建立与磁化aAPC结合的CD3+T细胞、滋养细胞,CD3+T细胞、滋养细胞共培养体系,滋养细胞单独培养体系,设置为A、B、C组.AnnexinV-FITC/PI染色法测定各组滋养细胞凋亡情况;细胞迁移(Transwell)小室实验测定各组滋养细胞侵袭能力;黏附实验测定各组滋养细胞黏附能力.结果 与A组比较,B、C组滋养细胞凋亡率均升高,滋养细胞穿过微孔细胞数/视野均减少,光密度值均减小(P<0.05);与B组比较,C组滋养细胞凋亡率升高,滋养细胞穿过微孔细胞数/视野减少,光密度值减小(P<0.05).结论 磁化aAPC可增强滋养细胞侵袭、黏附能力,抑制其凋亡.