目的:探讨Flap核酸内切酶1（FEN1）在急性髓系白血病（AML）患者骨髓单个核细胞中的表达水平及其与临床病理特征、疗效的关系，为AML患者病情监测与靶向治疗提供新方向。方法:回顾性分析广东医科大学第一临床医学院、福建医科大学附属协和医院2018年11月至2020年12月57例初治AML患者和26名健康人（健康对照）的资料。收集所有受试者骨髓标本，采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测受试者骨髓单个核细胞FEN1 mRNA的表达水平；抽取9例初治AML患者和4名健康对照骨髓标本，采用蛋白质印迹法检测FEN1蛋白表达水平。比较有疗效评估资料的AML患者中不同疗效者FEN1 mRNA表达水平差异。以FEN1 mRNA中位相对表达量为临界值，将AML患者分为FEN1高表达组（≥临界值）和低表达组（<临界值），分析FEN1表达水平与AML患者初诊时临床病理特征、实验室指标、细胞及分子遗传学改变的关系。结果:初治AML患者FEN1 mRNA中位相对表达量高于健康对照[0.696（0.025~3.661）比0.246（0.013~1.237）， Z=1.75， P=0.041]。蛋白质印迹法检测显示，AML患者的FEN1蛋白表达水平高于健康对照。复发AML患者（15例）FEN1 mRNA相对表达量高于完全缓解（CR）患者（19例）[1.153（0.047~4.172）比0.259（0.023~1.148）， Z=2.71， P=0.009]。初诊时，FEN1高表达组（32例）患者临床法、美、英协作组（FAB）分型M 5、初诊时伴发热及淋巴结肿大患者比例均高于FEN1低表达组（25例）（均 P<0.05），两组间不同性别、年龄、疲劳、皮肤黏膜苍白及肝脾大患者比例差异均无统计学意义（均 P>0.05）；FEN1高表达组患者初诊时白细胞计数、乳酸脱氢酶、C反应蛋白、骨髓原始细胞比例均高于FEN1低表达组（均 P<0.05），血红蛋白、血小板计数均低于FEN1低表达组（均 P<0.05），两组间降钙素原水平及染色体核型、细胞遗传学预后分级和是否基因突变患者比例差异均无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:AML患者FEN1表达上调，且复发患者FEN1表达水平进一步升高。AML患者FEN1表达与不良临床病理特征及较差实验室指标检测结果等有关，其可能成为AML患者病情监测的指标。

目前核酸检测技术已被广泛应用于临床实验室诊断，常规检测技术如实时荧光定量PCR技术耗时长且依赖特定的仪器设备。成簇规律间隔短回文重复序列（CRISPR）/CRISPR相关蛋白（Cas）系统是细菌和古细菌在与病毒斗争过程中获得的适应性免疫防御机制，已被发展成强大的基因组编辑技术。最近CRISPR领域的先驱团队基于Cas13a、Cas12a和新发现的Cas14蛋白开发出SHERLOCK、DETECTR等新型核酸检测工具，在传染性疾病的快速诊断、癌症中基因突变的检测和基因分型等方面意义重大，其灵敏度高、特异性强且快速经济，在临床分子诊断领域具有巨大潜力。本文综述了CRISPR/Cas系统的作用机制及新型诊断平台的原理和应用进展，总结了新型检测技术的优缺点并对其发展前景进行展望。

目的:探讨细胞周期蛋白依赖性激酶7 (cyclin-dependent kinase 7,CDK7)对卵巢癌细胞增殖的作用.方法:应用特异性siRNA转染法沉默卵巢癌OVCA433、TOV-112D和IGROV1细胞中CDK7基因表达后,采用CCK-8法检测细胞增殖能力.应用成簇的规律间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeat,CRISPR)及其相关核酸内切酶9(CRISPR-associated endonuclease 9,Cas9)基因编辑系统敲除卵巢癌HEY、OVCA420、OVCA433和IGROV1细胞中的CDK7基因后,采用克隆形成实验检测细胞克隆形成能力.用CDK7抑制剂THZ1处理卵巢癌TOV-112D、IGROV1、OVCA433、OVCAR8、OV90、SKOV3和COV413B细胞后,采用CCK-8法和克隆形成实验检测TOV-112D、IGROV1、OVCA433、OVCAR8和OV90细胞增殖和克隆形成能力,蛋白质印迹法检测IGROV1、OVCA433、SKOV3和COV413B细胞中CDK7蛋白表达水平和RNA聚合酶Ⅱ磷酸化水平.结果:沉默或敲除CDK7基因后,卵巢癌细胞的增殖和克隆形成能力均明显减弱(P值均＜ 0.05).THZ1处理可抑制卵巢癌细胞的增殖和克隆形成,并下调CDK7蛋白表达和RNA聚合酶Ⅱ磷酸化(P值均＜0.05).结论:CDK7可能通过调控RNA聚合酶Ⅱ磷酸化,促进卵巢癌细胞的增殖.

目的 了解2018年10月桂林市确诊的1例人感染H9N2禽流感病毒的全基因组序列分子特征.方法 对病例咽拭子标本分离毒株后进行全基因组测序,分析基因进化来源、致病性及毒力、宿主适应性、耐药位点以及糖基化位点等特征.结果 该病例感染的H9N2毒株是HA基因裂解位点为RSSR↓G的低致病性禽流感病毒,属于H9.4.2.5分支,但存在炎症基序及多位点突变可致毒力增强.该禽流感病毒HA的受体结合位点为LMG,可致宿主偏好性改变,从易结合禽类受体α-2,3唾液酸改变成偏好结合人类受体α-2,6唾液酸,且HA蛋白存在D94N、S123P和T156A的突变,可增强病毒对人类受体的偏好结合.NA和PA基因未检测到神经氨酸酶类抑制剂和5'帽状结构(CAP)依赖型核酸内切酶抑制剂耐药突变,但M2基因存在对烷胺类药物耐药的S31N突变.HA蛋白存在8个潜在糖基化位点,未发生糖基化位点数目增减突变,但丢失218位点,新增313位点的糖基化.结论 广西的H9N2禽流感病毒经过重组变异已获得了感染并适应人类宿主的能力,为防止H9N2亚型或重组新型禽流感在人间大流行,须加强其分子进化方面的监测.