为寻找新型植物病毒抑制剂,以烟草花叶病毒(TMV)为供试病毒,研究发现入侵植物椴叶鼠尾草提取物具有抗TMV活性.通过半叶枯斑法不同施药方式筛选发现,在质量浓度为 1mg/mL时,石油醚萃取物的保护作用和钝化作用最强,抑制率为40.95％和52.85％;乙酸乙酯萃取物的治疗作用最强,抑制率为52.85％,与阳性对照药剂宁南霉素无显著差异.石油醚萃取物各馏分中,Fr7的保护作用和治疗作用最好,抑制率为40.51％和45.52％,Fr6的钝化作用最好,抑制率为74.63％.乙酸乙酯萃取物各馏分中,Fr1'的保护作用最强,抑制率为61.77％,Fr3'的治疗作用最强,抑制率为55.02％,Fr4'的钝化作用最强,抑制率为60.22％.运用现代色谱波谱技术分离鉴定了 5个化合物分别为tilifodiolide、eupatoric acid、熊果酸、齐墩果酸和2-甲基-5,7-二羟基色原酮.

目的:对半夏主产区叶斑病进行调查,明确各地叶斑病主要病原菌种类,同时结合生物学特性测定和室内杀菌剂筛选,为半夏叶斑病的防治提供参考.方法:在 2020 年 6～9 月,对贵州、河北、甘肃半夏种植区叶斑病进行调查,对致病菌进行分离、回接验证、形态和分子鉴定、生物学特性检测,同时采用平板抑菌实验进行杀菌剂的筛选.结果:引起 3 种叶斑病的致病菌分别为高粱附球菌Epicoccum sorghinum、南瓜孢子菌Stagonosporopsis cucurbita-cearum、茄链格孢Alternaria solani.3 种病原菌在温度为25～28℃、pH为弱碱性时适应性较好;菌株E.sorghinum生长不受光照条件的影响,菌株S.cucurbitacearum有光照时生长速率较快,菌株A.solani在24 h暗培养条件下生长迅速.室内药剂筛选结果表明,枯草芽孢杆菌对 3 种叶斑病菌均有较好的抑制效果,其次为苯醚甲环唑,植物源乙蒜素抑菌效果较差.结论:半夏叶斑病可由多种病原菌引起,室内条件下枯草芽孢杆菌、苯醚甲环唑对本研究筛选到的 3 株优势致病菌有较好的防治效果,可为半夏叶斑病的田间防控提供一定的依据.

目的:明确半夏枯斑病的病原菌种类及其分类学地位.方法:采用组织分离法进行病原菌的分离鉴定,采用柯赫氏法则验证病原菌的致病性,采用形态学鉴定结合多基因系统发育分析,明确病原菌分类学地位.结果:采用组织分离法,从半夏发病植株中分离得到 5 株菌株,依据柯赫氏法则验证菌株BXHM-1 和BXHM-2 能够引起半夏叶片发病.基于ITS序列、Tub-2和TEF1-α基因序列进行多基因序列系统发育分析,菌株BXHM-1和BXHM-2与已报道的马铃薯坏疽病菌Boeremia exigua聚集在同一进化分支上.综合形态学和分子生物学鉴定结果,将贵州省赫章县新发现的半夏枯斑病病原鉴定为B.exigua.结论:首次报道Boeremia exigua引起半夏叶部病害,本研究为该病害的防治提供了基础研究.

对千里光(Senecio scandens)化学成分及其抗烟草花叶病毒(TMV)活性进行研究,为开发新型植物病毒抑制剂提供理论依据.综合运用硅胶、凝胶、MCI等多种柱层析方法对千里光地上部分乙酸乙酯萃取物化学成分进行分离,利用NMR、MS鉴定其结构;采用活体半叶枯斑法测定化合物对TMV的抑制活性.从千里光乙酸乙酯萃取物中共分离得到13个化合物,根据其理化性质以及波谱数据分别鉴定为24-烯-环阿尔廷酮(1)、3β-羟基-7β-甲氧基-5-豆甾烯(2)、正三十二烷(3)、乌索酸(4)、豆甾醇(5)、(22E)-ergosta-6,22-diene-3β,5β,8α-triol(6)、山柰酚(7)、3-吲哚甲醛(8)、泽兰黄酮(9)、槲皮素(10)、紫杉叶素(11)、jacaranone(12)、叶绿醇(13).除化合物7和化合物10外,其余化合物均为首次从该植物中分离得到.活性测定结果表明,化合物8和化合物13具有较强的抗TMV活性.

[背景]纹枯病是水稻最重要的病害之一,目前对其病菌致病机制的研究还较少.[目的]鉴定更多水稻纹枯病菌致病基因,为纹枯病的防治提供理论依据.[方法]采用 3′-RACE方法获得RsPG5 基因全长,并使用 ExPASy 等在线软件对其编码产物的结构及生物学特性进行分析,测定其编码产物的致病功能.[结果]RsPG5 具有 7 个外显子和 6 个内含子,编码区全长 1263 bp,可编码 420 个氨基酸.编码产物为糖苷水解酶 GH28 家族成员,具有真菌多聚半乳糖醛酸酶特有的保守序列NTD、DD、GHG和RF(I)K,并且有一个含 15 个氨基酸的信号肽;二级结构由α-螺旋、β-折叠和随机卷曲螺旋构成,并且可形成 4 个二硫键;三级结构为由 α-螺旋、β-折叠和随机卷曲螺旋按右手螺旋规则形成的具有裂隙区的特定空间结构,裂隙区可能负责着其酶活功能.生物学性质预测表明,RsPG5 为稳定、易溶于水的外泌性蛋白,主要定位于细胞壁、液泡和线粒体.RsPG5具有明显的多聚半乳糖醛酸酶活性,可分解果胶,破坏水稻叶鞘细胞;针刺接种分蘖末期水稻叶鞘,72 h后可形成明显的褐色坏死斑;将纹枯病菌接种至水稻叶鞘,在病菌致病过程中RsPG5 可上调表达.[结论]RsPG5 是一个典型的多聚半乳糖醛酸酶蛋白,为水稻纹枯病菌的重要致病因子.

前期研究发现seco-pregnane类甾体苷具有较强的抗烟草花叶病毒(TMV)活性,为进一步寻找活性化学成分,开展白薇化学成分研究.从白薇乙醇提取物的氯仿部位中分离得到10个单体化合物,根据其理化性质以及波谱数据鉴定为:glaucogenin-C 3-O-α-L-diginopyranosyl-(1→4)-β-D-thevetopyranoside(1)、glaucogenin-C 3-O-β-D-oleandropyranosyl-(1→4)-β-D-digitoxopyranosyl-(1 →4)-α-L-cymaropyranoside(2)、glaucogenin-C 3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranosyl-(1→4)-β-D-oleandropyranoside(3)、glaucogenin-A 3-O-α-L-cymaropyranosyl-(1 →4)-β-D-digitoxopyranosyl-(1→4)-β-D-oleandropyranoside (4) 、glaucogenin-A 3-O-α-L-diginopyranosyl-(1→4)-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-oleandropyranoside (5)、glaucogenin-A 3-O-α-L-cymaropyranosyl-(1 →4)-α-L-cymaropyranosyl-(1 →4)-β-D-oleandropyranoside(6)、glaucogenin-A 3-O-α-L-cymaropyranosyl-(1 →4)-β-L-cymaropyranosyl-(1→4)-β-L-cymaropyranoside (7)、 glaucogenin-A 3-O-α-L-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-L-cymaropyranoside(8)、antofine (9) 、2-O-β-D-fructofuranosyl-β-D-glucopyranoside (10).化合物1～8,10均为首次从该植物中分离得到.采用半叶枯斑法,从钝化活性、保护活性、治疗活性三方面评估化合物1～9的生物活性,结果表明,化合物1和9具有显著的抗TMV活性.

为了更好的研究毒根斑鸠菊(Vernonia cumingiana Benth)叶茎的化学成分与活性测定,利用硅胶柱层析、Sephadex LH-20等柱色谱技术对毒根斑鸠菊叶茎提取物进行了分离,并采用现代波谱学技术(1 H NMR、13C NMR、HMBC、HMQC等)及X-射线单晶衍射技术并根据其理化性质鉴定了七个化合物的结构,分别为vemone A(1)、α-波甾醇(2)、β-谷甾醇(3)、芹菜素(4)、柽柳素(5)、羊齿烯醇(6)、4-羟基-2-甲氧基肉桂醛(7).化合物4～7为首次从毒根斑鸠菊中分离得到,化合物1为一个新的倍半萜类化合物.采用双层琼脂扩散法对分得的单体化合物Vernone A进行了抑菌活性测定,结果显示vernone A对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、伤寒杆菌在实验浓度范围内未表现出明显抑菌作用.

目的 为进一步寻找具有较强抗烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)活性的柠檬苦素类化合物,开展复叶地黄连Munronia henryi化学成分研究.方法 综合运用硅胶柱色谱、C18柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及高效液相色谱等方法进行系统分离和纯化,根据化合物的理化性质及其波谱数据进行结构鉴定,采用半叶枯斑法,从钝化活性、保护活性、治疗活性3方面评估化合物1～13的抗TMV活性.结果 从复叶地黄连的甲醇提取物中分离得到了13个化合物,分别鉴定为nymania-3(1)、prieurianin(2)、munronin L (3)、12-O-methylvolkensin (4)、12-hydroxyisopimara-8(14),15-dien-7-one(5)、munronin R(6)、3β,4β-dihydroxypregnan-16-one(7)、(E)-aglawone-3-one(8)、N-(N-benzoyl-S-phenylalaninyl)-S-phenylalaninol acetate (9)、N-(N-benzoyl-S-phenylalaninyl)-S-phenylalaninol benzoate (10)、glabrol(11)、syringaresinol (12)、7-methoxy-8-hydroxydihydroasarone (13).其中化合物1对TMV的半数抑制浓度(IC50)为17.2 μg/mL.结论 化合物5、7～13为首次从该植物中分离得到,化合物1～3、5、9～12具有较强的抗TMV活性,其活性高于阳性对照药物宁南霉素.